一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法
【专利摘要】本发明公开一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法。首先称取土壤样品，加无水硫酸钠和无水硫酸镁，再加入醋酸乙腈溶液，超声提取后，进行离心；将离心后得到的乙腈提取液浓缩，然后用流动相定容，转入装入有混合填料的离心管中，超声、离心，取上清液过滤，然后上机，采用液相色谱分析方法进行检测，得到土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的含量。本发明以土壤为基质，利用基质分散固相萃取技术对样品进行预处理，能够同时测定毒死蜱农药及其三种代谢物的检测，该方法具有检测准确、高效，快速、价格低廉的特点。
【专利说明】一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法

【技术领域】
[0001] 本发明属于环境检测方法【技术领域】，尤其是涉及一种土壤中毒死蜱农药及其三种 代谢物的检测方法。

【背景技术】
[0002] 随着甲胺磷等剧毒农药的禁用，毒死蜱（Chlorpyrifos)作为替代农药得到了广 泛的使用和推广。近年来，人们在土壤和水体中分别监测和检测到了毒死蜱及其代谢物，人 们也对毒死蜱及其代谢物在环境中的残留和分布现状给予了极大关注。开发一种土壤中毒 死蜱农药及其三种代谢物的前处理及分析方法，为摸清土壤中毒死蜱及其三种代谢物的残 留含量、分布，评价种植安全，具有紧迫性和重要意义。
[0003] 目前，土壤中毒死蜱残留方法主要应用气相色谱、液相色谱和气质、液质联用方 法，检测项目局限于毒死蜱及其主要代谢物3, 5, 6-三氯-2-批啶酚（TCP)，而关于毒死蜱其 他两种代谢物：3,5,6-2-甲氧基-批陡（TMP)和毒死蝶氧化物（Chlorpyrifos-Oxon)的代 谢物的检测方法，还很少见。为了全面了解毒死蜱农药及其代谢物在环境中的迁移、转化， 为解决大批量处理环境样品，提高检测效率和经济效益，开发一种简洁、迅速、价廉，并且同 时测定毒死蜱及其三种主要代谢物的残留检测方法，显得尤为重要。


【发明内容】

[0004] 本发明的目的在于基于现有的毒死蜱及其3, 5, 6-三氯-2-吡啶酚两种农药残留 基础上，改进和增加新的两种代谢物的检测，提供一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物 的检测方法，通过以土壤为基质、利用基质分散固相萃取技术对样品进行预处理，实现毒死 蜱及其三种代谢物的农药残留的快速检测，检测结果准确，高效，其价格低廉，适合于大批 量的环境样品的测试和研究。
[0005] 为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
[0006] -种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法，包括以下步骤：
[0007] 1)提取：称取制备好的土壤样品，添加到含有无水硫酸钠和无水硫酸镁的离心管 中，再加入醋酸乙腈溶液，进行超声提取和离心处理；
[0008] 2)净化：将离心后得到的乙腈提取液浓缩，然后用流动相定容，转入装有混合填 料的离心管中，进行超声提取和离心处理，然后吸取上清液，上机待测；
[0009] 3)采用液相色谱分析方法进行检测，得到土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的含 量。
[0010] 进一步地，步骤1)中，土壤样品、无水硫酸钠、无水硫酸镁、醋酸乙腈的质量比例 是：1: (0. 1?1) : (0. 8?1. 6) : (4?10)。比如，可以称取均匀制样的样品5. 0g于50mL的 离心管中，然后加入0. 5g?5无水硫酸钠和4. 0?8g无水硫酸镁，在加入20?50mLl %醋 酸乙腈溶液。
[0011] 进一步地，步骤1)中，超声提取的时间为10?30min ;离心处理的转速为5000? 10000r/min，离心处理时间为5?lOmin。
[0012] 进一步地，步骤2)采用旋转蒸发仪将离心后得到的乙腈提取液浓缩。
[0013] 进一步地，步骤2)所述用流动相定容，是用乙腈和水（水中含体积比为0. 1? 0. 5%的乙酸）定容至1?5mL，乙腈和水的质量比例为9:1?1:1。
[0014] 进一步地，步骤2)所述混合填料的成分为Florifil，PAS，和C18，三者的质量比例 为疋1〇1^1:卩六5:(： 18=(3?5):(4?6):(4?8)。匕匕如^1〇1^1，？六5，和(：18的使用量可 以是：85mg: 100mg: 100mg。
[0015] 进一步地，步骤2)将浓缩定容样品转入到装有混合填料的离心管中后，振荡1? 3min，在5000?10000r/min转速下离心5?10min，吸取上清液，过0. 45 μ滤膜，上机测 试。
[0016] 进一步地，步骤3)采用HPLC/PDA、HPLC/MS/MS或者GC/MS/MS方法进行检测。优 选使用HPLC/PDA方法进行检测。下列仪器条件是优化的条件，在乙腈和乙酸不同比例下均 可以发生，比如乙腈50% -90%范围内，水（含乙酸0· 1?0.5% )的范围是10% -50%。
[0017] 仪器条件：
[0018] 液相条件：A :乙腈；Β :0. 1%乙酸
[0019] 色谱柱：Alltima ? C18 色谱柱（4. 6mmX 250mm，5 μ m)
[0020] 色谱条件：
[0021]

【权利要求】
1. 一种土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的检测方法，包括以下步骤： 1) 称取制备好的土壤样品，添加到含有无水硫酸钠和无水硫酸镁的离心管中，再加入 醋酸乙腈溶液，进行超声提取和离心处理； 2) 将离心后得到的乙腈提取液浓缩，然后用流动相定容，转入装有混合填料的离心管 中，进行超声提取和离心处理，然后吸取上清液，上机待测； 3) 采用液相色谱分析方法进行检测，得到土壤中毒死蜱农药及其三种代谢物的含量。
2. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中土壤样品、无水硫酸钠、无水硫酸 镁、醋酸乙腈的质量比例是：1: (0. 1?1) : (0. 8?1. 6) : (4?10)。
3. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤1)中超声提取的时间为10?30min， 离心处理的转速为5000?10000r/min，离心处理时间为5?lOmin。
4. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)采用旋转蒸发仪将离心后得到的乙 腈提取液浓缩。
5. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)所述用流动相定容是用乙腈和水定 容至1?5mL，乙腈和水的质量比例为9:1?1:1。
6. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)所述混合填料的成分为Florifil， 卩八5，和(：18，其质量比例为疋1〇1^1 :?六5:(：18=(3?5):(4?6):(4?8)。
7. 如权利要求6所述的方法，其特征在于：步骤2)所述混合填料中各成分的质量比例 为：Florifil :PAS:C18 = 3:4:4。
8. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤2)将浓缩定容样品转入到装有混合填 料的离心管中后，振荡1?3min，在5000?10000r/min转速下离心5?10min，吸取上清 液，过0.45 μ滤膜，然后上机测试。
9. 如权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤3)采用HPLC/PDA、HPLC/MS/MS或者 GC/MS/MS方法进行检测。
10. 如权利要求9所述的方法，其特征在于：步骤3)采用HPLC/PDA方法进行检测，液 相条件为乙腈和乙酸，采用Alltima ? C18色谱柱。
【文档编号】G01N30/02GK104111291SQ201410277229
【公开日】2014年10月22日 申请日期:2014年6月19日 优先权日:2014年6月19日
【发明者】孙宝利, 陕红, 董一威, 黄金丽, 仝乘风 申请人:中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所