专利名称:分析盒和液体输送控制装置的制作方法
技术领域:
本发明涉及一种在分析微量试样中使用的能够方便地进行分析和检测的分析盒,以及制造这种分析盒的方法。本发明还涉及应用该分析盒的分析方法。此外,本发明涉及连接到分析盒并控制在该分析盒中输送液体的液体输送控制装置。
在这些POC分析等中,要求能够方便地快速地且低廉地(尤其是在分析医疗诊断中)进行分析,降低分析时间和将分析所要求的试样的剂量减少到很低的水平是要解决的重要的挑战。
例如,在血液测试中,如果分析所要求的试样的剂量非常小,就可以减少要采集的血液量,因此减轻了患者的负担,进一步提高了应用到家庭医疗护理(比如,通过自己采集血液自己进行分析)的可能性。此外,如果分析所要求的试样的剂量非常小,则用于分析的试剂的量也可以减少到很低的水平,由此可以降低分析的成本。此外,由于同时还能够实现减少浪费,因此应该继续研究将试样的剂量降低到很低的水平并减少分析时间。
在通过眼睛观察等进行测定的定性分析的情况下,广泛地使用这样的方法中,在这些方法中试样比如血液、尿液以及污水与浸染有分析试剂的试纸直接接触。然而,在血液生物化学的定量分析的情况下,在这种定量分析中分析在血液中的酶的活性和要测量的物质的量,要求定量,因此当前在医疗实践中所使用的大多数方法都是这样的混合在分析器中的试剂溶液、缓冲剂等并应用自动移液管等与在分析器的小容器或试管中采集并称量的试剂进行定量反应以应用检测装置进行检测。
然而,在应用这些方法的情况下,需要适当地补充在分析器中的试剂溶液、缓冲剂等。此外,在如下的情况下可能产生问题比如在液体溢出、自动移液管的喷嘴堵塞以及由于清洁不够造成的污染,在医学领域中的POC分析的情况下对于分析员尤其是医生和护士来说这些是极大的负担。
为解决这些问题,希望这样的一种类型的测量系统,在该测量系统中在分析盒中提供所要求的试剂溶液和缓冲剂等。作为一个实例,在日本专利公开No.8-160031中描述了一种方法,在这种方法中,在其中包含试剂等的内袋封装在在其中包含试剂的袋中,用手挤压上述内袋并使其破裂,由此使试样和试剂等混合并进行反应,然后通过目测定性测定。然而,这种方法并不适合于在要求较高精度的血液化学等领域中的定量分析。
在日本专利公开No.2-87067和日本专利公开No.2-88970中的装置的结构中也公开了在分析盒中包含试剂的思想。在这种情况下,试剂溶液等都包含在小袋中,该小袋破裂,由此试剂溶液等泄漏到盒中。此外,对于输送液体的方法,还采用应用离心力的方法。
在试剂的剂量较大的情况下,用于分析的试剂溶液等的剂量还可以从几百微升到几毫升的较大的范围,溶液等都可以容易且低廉地封装在上述袋中,可以应用上述方法而不会造成问题。然而,当试剂的剂量小到只有几微升左右时,与较少量的试剂相对应的试剂溶液等的少量的剂量应该封装在较小的袋中,该袋应该破裂并泄漏出里面的液剂,应用上述方法可能非常困难。
此外,公开了这种的技术,在该技术中将液体试剂等封装在盒中的较小的容器中,并应用尖的物体等使小容器的可破裂部分(可破裂的密封)破裂以通过该破裂处泄漏出液体试剂,与血液试样混合并进行定量反应。例如,在日本专利No.2790359(BoehringerMannheim k.k.)的血红蛋白Alc(HaAlc)的测量盒中,应用重力和毛细作用力来输送液体,使可破裂的密封破裂以将封装在该盒中的液体试剂泄漏到具有预定的体积稀释容器中,在HbAlc和乳胶珠的溶血作用和随后的测量之后,由此使液体试剂与具有预定体积的毛细管中的试剂定量地混合以执行血色素(Hb)的测量。
此外,在国际专利申请WO93/25889中公开了一种自动分析器的盒,固体试剂封装在该盒中,从该盒的外部提供稀释剂和液体试剂。此外,通过尖的物体比如钉子使可破裂的密封破裂。由此使固体试剂与稀释剂混合并在其中溶解,并连同液体试剂一起与血液试样混合。
此外,在国际专利申请WO99/52633(Lumenal Technology Co.,Ltd)中公开了一种具有这样的结构的盒,在该结构中在将液体试剂封装在其中的室的出口上穿过“破裂开的通道”通过空气将液体试剂推出并将在这时所产生的气泡限制在室中(并不将气泡从孔中推出)。
对于应用这种可破裂的密封的方法,比如在前述的应用袋的方法情况下,如果封装的液体试样的剂量是从几百微升到几毫升的较大的范围,则能够容易地且低廉地封装液体试样,但是如果试样的剂量只有几微升左右,因此液体试样很少以致如下的工作非常困难在前述的较小的容器中并入可破裂的密封、灌注并封装较小量的液体试样、使可破裂的密封破裂、取出液体试样等。
此外,在日本专利No.4-53384B和日本专利公开No.8-62225A的技术中也包括如下的技术,在该技术中液体试剂(试剂溶液)盒缓冲剂等都封装在盒中,并应用离心力输送该液体以与这些液体混合并进行反应。
在上述方法中,因为试剂和缓冲剂都以液态封装在盒中,要求取出液体的机构比如使密封破裂的机构,因此该盒必须具有很复杂的结构。此外,为在液态下封装该试剂并将该试剂放入反应道中,要求几十到几百微升或更多的试剂,因此试剂的成本增加。
此外,在上文所描述的大多数的方法中,应用离心力来输送液体。在这种方法中,输送液体的方向限制在从旋转的中心朝外延伸的一种方向上,在输送液体等接通/切断时应该精确地启动/停止旋转,造成液体输送和反应道的复杂的结构设计。此外,还有一缺点是在其上装备有盒以便进行测量的分析器在结构上较复杂并且昂贵。此外,在任何情况下,由于毛细管的厚度在毫米级,因此要求大量的试样,与其相关的试剂的剂量增加,随着前述的所封装的液体试剂的增加将不再能降低分析成本。
在另一方面,公开了这样的一种方法,在该方法中,将冻干的的固态试剂放在盒中,应用溶解封装在该盒中的稀释剂稀释血样,将上面描述的固态试剂溶解在所稀释的试样溶液中并与其进行反应以进行分析(所出版的PCT国际公开的日文翻译的专利申请公开No.10-501340,所出版的PCT国际公开的日文翻译的专利申请公开No.9-504732等)。
在这种方法中,将固态试剂放置在盒的反应道的端部的周围的室中,稀释的试样流入每个室中以溶解固态试剂并与其反应,由此造成吸收率的变化。此外,由于借助于离心力输送液体,输送液体的方向限制在离心力的方向,即从圆形盒的圆的中心朝外延伸的方向。
如上文所描述,为检测反应,由于固态试剂位于在反应道的末端所以仅执行一种试剂成分的一种反应。因此,为进行某些检测,必需应用与由学术界和政府机构所指定的特定推荐的检测反应中的组分不同的反应和试剂组分。即,在这些推荐中,当检测一种物质时还经常应用两种或三种类型的试剂溶液(例如,在Summary of Clinical ExaminationProcess(由Izumi Kanai所写,Kanahara press.1998)中所描述的),以及如果应用一种类型的试剂,与先前检查数据的相关性可能较差,很难实施本身的定量。
此外,通过液流排出在上文所描述的室中的空气,但由于该室位于反应道的末端,因此空气不能从盒中排放,应该将室移到在盒中的其它的位置。因此,进行设计以使上文描述的空气通过液体所流进的反应道的上部空间排出。换句话说,在反应道方面存在的缺点是在每个较窄的反应道中液体和空气以相反的方向流动。
在国际专利公开WO93/04195(所出版的PCT国际公开的日文翻译的专利申请公开No.10-501340A,所出版的PCT国际公开的日文翻译的专利申请公开No.9-504732A等)中公开了这样的技术,在该技术中将试剂溶液液滴滴定到液氮中冷冻成球形,并在降低的压力下直接干燥以在较短的时间内溶解放置在周围的室中的试剂。
在这些文献中,还公开了使用如下的物质作为添加剂以形成适合数量的液滴并提高溶解度聚乙烯二醇、肌醇、聚乙烯基砒络烷酮、合成血液、胆酸钠、甘露醇、白朊或这些物质的混合物。此外,在国际专利公开WO93/04195(ALP Measurement Reagent)的实例3中还描述加入丙三醇,但它的目的并不清楚。
还公开了这样的方法,在该方法中只是在试样的血浆中溶解在盒中沉淀的固态试剂以进行分析而不应用试样溶解液体。例如在如下的文献中公开了这种方法厂商名称Twinkle(R)of Nippon Medi-physics Co.,Ltd,日本专利公开No.9-196920(Immune Item)、日本专利公开No.8-114539(Biochemical Item)、日本专利公开No.9-196739(Dissolving LiquidTip detection)以及日本专利公开No.9-138195(Analysis by TransmittanceOptical measurement of Porous Material)。
在这种方法中,将固态试样溶解在血浆本身中并同时进行反应,但它不能在较短的时间内应用100%的血浆容易均匀地溶解固态试剂。此外,因为没有稀释血浆,存在的致命的问题是污染物(抑制剂物质)抑制剂分析。
在这些公开的技术中,应用在其中在降低的压力下从反应道的端部中吸入液体的方法作为输送液体的主要方法。换句话说,在一个反应道中以预定的间隔在流动的方向上形成通向盒的外部的许多开口,通过打开/关闭在盒的外部的开口来控制液体的输送。然而,在输送液体的方法中,存在的缺点是只能够线性地控制液体的流量。这些开口并不具有憎水出口的功能,但通过关闭开口起到能够降低在开口的上游区域中的压力的排气阀的作用。
除了这些以外,在其中通过反应道沉淀试剂的方法包括在美国专利No.5478751说明书(Abbott Co.,Ltd.)、日本专利公开No.3-223674说明书(Mochida Pharmaceutical Co.,Ltd.)和美国专利No.5147607说明书(Mochida Pharmaceutical Co.,Ltd.)中公开的方法,这些方法都不同于上述方法,在上述方法中试样与高浓度的试剂接触并连续稀释,虽然要通过反应道流入的物质不必是100%的血浆。在如下的情况下应用这些方法,在免疫检测反应中固相抗体(抗原)与试样接触,但并不适合于基于在危险系统中进行反应的血浆生物化学检查和在环境中的危险物质的检查。
此外,如下的方法已经实际投入了应用,在这些方法中应用分析试剂浸染滤纸等,试剂与血液试样接触,应用毛细力和重力在滤纸上移动血浆以实施分析。这些方法例如包括在由Kyoto Daiichi Kagaku Co.,Ltd.制造的Spotchem(R)(商标名)、由Fuji Photo Film Co.,Ltd.制造的Drychem(R)(商标名)、由Boehring Mannheim K.K.制造的Reflotron(R)(商标名)或美国专利No.5212065(International Diagnostic System)中所描述的方法。
所谓的基于干燥的化学性质的基于分析滤纸的盒比较方便,因为它们能够定量反应而同时不需要从外部加入实际溶液和缓冲剂。然而,所要求的血液试样的剂量较大,即对于每项分析大约10微升,这意味着通常在血液生物化学化验中进行的十项或更多项的测量的情况下,要求一百几十微升的血液。此外,用于浸染滤纸等的实际的试剂量相应地增加。此外,因为与试样相接触并同滤纸等所浸染的试剂连续反应,所以限制了分析反应的类型,它们之中的一些方法不同于前述的由学术界所推荐的方法。
此外,由于试样不稀释,增加了在试样中由污染物所产生的不利影响的可能性。此外,对于大多数来说,对于每一项分析都要求一个盒,只有Kyoto Daiichi Kagaku的方法能够同时实施许多分析,但在这种方法中,将每次用于一项分析的许多盒都放在相同的带上,最多只能分析六项。
在另一方面,与上述应用干燥的化学性质的方法相反,已经开发了实施微观分析的μTAS(微米总量分析系统)的技术。在μTAS中,为将任何试样以及血液的剂量减少到很少的水平,应用形成在玻璃或硅的表面上的带有槽的几平方厘米到几十平方厘米的小片,试剂溶液和试样在槽中流动以实施分离并反应以分析很小量的试样(日本专利公开No.2-245655A、日本专利公开No.3-226666A、日本专利公开No.8-233778A、Analytical Chem.69,2626-2630(1997)Aclara Biosciences等)。对于这些技术,存在的优点是试样的剂量、检测所要求的试剂的剂量、在检测中所使用的可消耗的产品所产生的废物以及废液量都减少了,检测所要求的时间缩短了。
本发明人已经提交了涉及μTAS的申请,比如日本专利申请No.10-181586说明书(“Mixing analysis apparatus and mixing analysismethod”)、日本专利申请公开No.2000-2675A(专利申请No.10-181587说明书“Capillary Photothermal Converting analysis apparatus”)、日本专利申请公开No.2000-2677A(日本专利申请No.10-167603说明书(“Analysis apparatus”)以及国际专利公开Wo99/64846(国际专利申请PCT/JP99/03158说明书)。
如果应用在这些说明书中所描述的技术,可以将分析血液生物化学的每一项所需的试剂溶液的剂量减少至大约10nl,要求的试样剂量可以减少到大约0.1nl(1000到100pl)同时检测时间为大约10秒(除此以外大约要求1微升的缓冲剂来输送液体,此外,如果连续地供应试样则10分钟内大约要求10nl的试样)。
然而,在如今普遍公知的μTAS技术中,在晶片(盒)内进行分离、混合、反应和检测,但从晶片(盒)的外面输送进行反应所需的试剂溶液。这些技术例如包括与前述的μTAS相关的已有技术中的方法(Proceedings of the μTAS‘98 Workshop,1998年10月13-16日在加拿大的Banff举行,编者D.Jed Harrison和Albert van den Berg,Kluwer Academic Publishers等)和在树脂晶片中的DNA分析的技术(RM Mccormik等人/Anal.Chem.Vol.69,No.14(1997)2626-2630等)。
这些技术并不适合于要求简单的POC分析等,因为需要从晶片的外部提供液体试剂的容器,并要求补充液体试剂、消除阻塞或清洁在晶片和容器之间的连接的维护操作。
在另一方面,为允许试样和试剂溶液在晶片(盒)中移动,在毛细管(槽)中的空气通到它们需要排放到反应道之外的目的地。在这时,理想的是在反应道的末端上形成气体可渗透的/非液体可渗透的机构以确保将液体保持在晶片中。否则,液体可以溢出到晶片之外。
为实现形成这种气体可渗透的/非液体可渗透的机构,已经考虑了相当长的时间将在其中较小的憎水开口和憎水膜片用作仅使气体可以通过而不使液体通过的孔的技术作为对付与毛细管的情况相比大得多的液体剂量的技术。
例如,在日本专利公开57-17659A和公开的PCT国际专利申请公开的日文翻译No.9-500809A中描述了在血液处理装置比如人工肾中的血液中排放空气的技术。此外,在日本专利公开No.2-2812A中中描述了在工厂中普遍使用的在比晶片大得多的装置中形成气孔作为自动气孔过滤器以使在液体化学物质和水中的空气排出的实例。在任何情况下,他们能够对付与在微升等级之下的液体剂量相比大得多的剂量。
对于那些用作在晶片中的那些气孔以对付在微升等级之下的剂量的液体的开口,大家公知的大约3平方微米的很小的憎水开口(HMCV(憎水微毛细气管))(proceedings of the μTAS‘98 Workshop,1998年10月13-16日在加拿大的Banff举行,编者D.Jed Harrison和Albert van den Berg,Kluwer Academic Publishers,p307-310Hydrophobic microcapillary vent for pneumatic manipulation of liquidin μTAS,Kazuo Hosokawa,Teruo Fujii和Isao Endo,Document ofElectricity Academy WorkshopSociety for Study of Chemical SensorSystem CS-99-1 to 12,p19-22,1999年3月16日,Teruo Fujii,KazuoHosokawa,Hong Jong Wook,Minoru Seki,Isao Endo等人)。
此外,还公开了在反应道的端部形成憎水膜片的技术(Affy MetrixCo.,Ltd.,Anderson等人,Proceeding of Transducers‘97.1997International conference on Solid sensors and Actuators 2C1.02,国际专利公开WO No.9702357,美国专利No.5856174说明书)。在这种技术中,通过试管将在晶片之外的试样和试剂溶液连接到晶片,应用形成在晶片中的隔膜阀选择上文所描述的试剂溶液和上文所描述的试样在其中流动的毛细管(通过来自晶片之外的力使阀打开/关闭)。然后,将在毛细管中的空气通过由在反应道的端部上的憎水膜片构成的孔排放到反应道之外以输送液体。上文所描述的孔总是朝外打开,通过如下的方式控制液体的输送应用连接到孔的反应道的压力损失并通过可破裂的密封形成压力释放开口,由此造成了该结构非常复杂的问题。
2)应用毫微升到微微升数量级的很小剂量的试样可以进行测量和反应。
3)将进行分析所要求的试剂、缓冲剂等都封装在盒中或连接到其中,由此通过分析员进行的试剂管理和维护所需的时间和付出的努力可以减少或完全节省。
4)在较短的时间内并且低廉地方便地进行分析。
5)减少对检测反应的限制,同时执行多项分析。因此,可以执行与学术界、政府机构等所指定的推荐方法相同或类似的检测反应。
6)分析盒具有简单的内部结构并由此可以低廉地生产。
7)可以精确地输送液体。
本发明的另一目的是提供一种应用上文所述的分析盒的分析方法。
本发明的再一目的是提供一种液体输送控制装置,这种液体输送控制装置可以连接到上文所描述的分析盒,并且能够精确地且容易地控制在该分析盒中的液体的输送,而且它便宜。
本发明包括如下的结构以实现上述发明目的。即,根据本发明的分析盒是这样的一种分析盒,该分析盒具有许多容器和在这些容器之间连通的毛细管,其特征在于至少一个上述容器具有通向分析盒的外部的开口,至少一个开口以气体可渗透的/液体不能渗透的排气孔(具有排气孔的部件)覆盖,而且在该分析盒中还具有在分析中应用的试剂。
可以低廉地生产具有这种结构的分析盒,因为在盒内的结构简单,并且能够处理在μTAS情况下的非常小的剂量的液体。此外,通过控制气体进入上文所描述的排气孔,可以控制通过上文所述的毛细管使液体流进上文所描述的容器或来自上文所描述的容器中的液体流,因此使它能够控制到在分析盒中的每个容器中的液流或从该每个容器中流出的液流而不需要从分析盒的外部输送液体以及将液体带到分析盒的外部。
由此可以提供不需要保养的一种合而为一的分析盒,并且除了试样以外所有的试剂等都封装在分析盒中。此外,可以精确地并容易地控制上文所描述液体输送。
此外,如果分析盒具有如上文所描述的结构,在分析盒中提供在分析中所使用的所有的试剂或部分试剂,由此能够降低在POC分析等的分析时分析员所付出的管理和保养试剂的(或完全节省)时间和努力。此外,还可以将分析所需的试样和试剂的剂量降低到很低的水平,在较短的时间内低廉地方便地进行分析。
此外,因为降低了对检测反应的限制,并且可以同时执行多项分析,所以在POC分析等中可以执行与学术界、政府机构等所指定的方法相同或类似的检测反应。因此,容易进行与通过在过去所执行的临床测试所获得的数据进行比较。此外,分析操作员可以在上文所述的分析盒中封装所需的试剂以执行所需的分析。
此外,可以给带有以上文所述的排气孔覆盖的上文所述的开口的容器中的至少一个容器中提供上文所述的试剂。
此外,上文所述的试剂中的至少一种试剂可以是非液体试剂。
这种结构允许上文所述的非液体试剂溶解在试剂溶解液体等中以在上文所述的分析盒中进行分析之前立即制备试剂溶液,由此,与液体试剂封装在容器中的情况相比,降低了在运输和存储的过程中试剂从上文所述的分析盒中溢出的可能性,并抑制了试剂的质量的下降。
此外,因为在其中封装有试剂的分析盒作为产品提供,如果购置了在其中封装了所需的试剂的分析盒,分析员可以进行所需的分析而不需要进行在分析盒中封装试剂的操作。
在分析盒中封装非液体试剂的方法包括将所需的剂量的非液体试剂封装在容器中的方法,以及给该容器填充在其中溶解了的试剂的溶液以及此后将其干燥成非液体试剂的方法。
此外,在本发明中,非液体试剂是指固态试剂比如粉末和冻干的产品和橡胶状试剂,并且可以是具有一定粘度的粘性淀粉糊浆状试剂以防止在分析盒的配送(运输、存储等)的过程中试剂从分析盒中流出。
如果这种非液体试剂封装在带有上述排气孔的试剂存储容器中以提供该非液体试剂作为产品,则封装在或连接到分析盒中的试剂溶解液可以通过上述毛细管输送到上述试剂存储容器中以在分析之前立即溶解上文所描述的试剂。此外,由于可以使用几十微升左右的剂量的上文所述的试剂溶解溶液并且十分低廉,因此可以将这种溶液放在基于液体袋系统的分析盒中。
为减少在上述试剂溶解液体中溶解在分析盒中封装的非液体试剂的过程中的溶解时间,对于某些项的测量可以在非液体试剂中加入添加剂溶液。对于这种添加剂溶液,多元醇比较适合,尤其是从乙二醇、丙二醇和丙三醇中选择的至少一种类型的醇更为可取。
此外,对于根据本发明的分析盒,上文所述的排气孔可以由具有细孔的憎水部件构成。具体地说,具有细孔的部件优选憎水多孔膜。
在上文所述的许多容器的开口以公共憎水多孔膜覆盖以形成每个容器的排气孔的情况下,上文所描述的憎水多孔膜应该处于这样的一种状态即在容器之间的部分不应该具有多孔性。此外,通过给位于容器之间的部分施加压力可以将上文所述的憎水多孔膜转换到非多孔的状态。
在这种结构中,对于气体很难通过位于在上述容器之间的部分,因此气体几乎在上述容器之间流动。因此,降低了对液体进入附近的容器的控制存在不利的影响的可能性,因此可以独立地并且精确地控制每个容器的气体进入量/排放量。
此外,对于由许多容器构成的容器组和同时实施的液体的进入/排出的情况这些都相同。换句话说,在以公共憎水多孔膜覆盖许多容器组以形成每个容器的排气孔的情况下,上文所述的憎水多孔膜应该处于这样的状态在其中位于容器组之间的部分没有多孔性。因此,可以独立地且精确地控制液体进入容器组。
此外,根据本发明的分析盒包括用于存储液体试样的试样存储容器、用于存储稀释上述试样的稀释剂的稀释剂存储容器、用于测量上述试样的测量容器以及用于将上述稀释剂与上述测量的试样进行混合以稀释该试样的稀释容器,以及可以具有这样的结构,在该结构中连接上述毛细管以便分别在上述测量容器和上述试样存储容器、上述稀释剂存储容器和上述稀释容器之间进行连通。
此外,根据本发明的分析盒包括用于存储用于校正分析结果的校正溶液的校正溶液存储容器和用于存储液体试样的试样存储容器,用于存储稀释上文所述的校正溶液和上文所述的试样的稀释剂的稀释剂存储容器、用于测量上述校正溶液和上述试样的测量容器和用于将上述所测量的校正溶液或上述所测量的试样与上述稀释剂进行混合以稀释该校正溶液或该试样的稀释容器,以及可以具有这样的结构,在该结构中连接上述毛细管以便分别在上述测量容器和上述校正溶液存储容器、上述试样存储容器、上述稀释剂存储容器和上述稀释容器之间进行连通。
此外,如上文所述,上述各种容器通过上述毛细管彼此连通,但通过上述毛细管上述各种容器还可以直接彼此连通,或者可以以其它的容器在其之间的方式彼此间接地连通。然而,考虑到控制液体进入和出来的精度和效率,可取的是彼此直接连通。
此外,通过如下文所描述的方法可以制造如上文所述的本发明的所有的类型的分析盒,该方法包括在对应于平面部件的上述容器的位置上形成通孔并在对应于该平面部件的一个平板面的上述毛细管的位置上形成槽的平面处理步骤,以上述排气孔覆盖没有上述槽的上述平面部件的平板面的排气孔形成步骤,从具有上述槽的上述平面部件的平板面上将上述试剂引入到对应于试剂存储容器的上述通孔中以存储上述试剂的试剂引入步骤,以及以盖板覆盖具有上述槽的上述平面部件的平板面以形成上述容器和上述毛细管的覆盖步骤。
在此,上述排气孔形成步骤可以改变为以具有上述细孔的憎水部件或上述憎水多孔膜覆盖没有上述槽的上述平面部件的平板面的步骤。此外,上述试剂引入步骤可以改变为从上述具有上述槽的平板面上将上述试剂溶液引入到对应于用于存储上述试剂的试剂存储容器的通孔中并将试剂溶液干燥为非液体试剂的步骤。
此外,通常,上述槽仅形成在上述平面部件的一个平板面上,并以上述排气孔部件覆盖没有上述槽的其它的平板面。
此外,根据本发明的液体输送控制装置是一种连接到如上文所描述的分析盒以控制在上述容器之间通过上述毛细管输送液体的液体输送控制装置,其特征在于通过允许或调整气体通过上述排气孔的进入量/排出量,上述液体通过上述毛细管流进上述容器或从上述容器流出。
由于这种结构,该液体输送控制装置能够精确地控制液体的输送比如在上述分析盒中的试样、试剂溶液等并能够低廉地生产。
此外,根据本发明的液体输送控制装置可以包括放置在与在其间具有上述排气孔的上述容器相对的位置中的阀,其中通过该阀可以允许或调整通过上述排气孔的气体的进入/排出。可替换的是,液体输送控制装置可以包括放置在与在其间具有上述排气孔的上述容器相对的位置中并连接到上述排气孔部件以便覆盖上述开口的连接器、耦合到上述连接器的泵和放置在上述连接器和上述泵之间的阀,其中通过上述泵或上述阀中至少一个可以允许或调整通过上述排气孔的气体的进入/排出。
此外,根据本发明的液体输送控制装置通过如下的方式可以控制上述液体通过上述毛细管从上述容器中流出应用没有用上述排气孔部件覆盖的上述开口允许或调节气体进入上述容器。
此外,这种液体输送控制装置可以与用于分析的检测装置结合使用或可以独立使用。
此外,根据本发明的分析方法是应用上文所述的分析盒分析试样的方法,其特征在于包括在分析之前立即通过上述毛细管从试剂溶解液存储容器将试剂溶解液体输送到试剂存储容器以溶解上述试剂以制备试剂溶液的试剂溶解步骤,在该试剂溶解液存储容器中存储有用于溶解上述非液体试剂的上述试剂溶解液体,在该试剂存储容器中存储有上述非液体试剂。
此外,该分析方法包括应用上述毛细管将在上述试剂存储容器中的上述液体试样和上述试剂溶液进行混合并进行反应的混合和反应步骤。
此外,根据本发明的分析方法是应用如上文所描述的分析盒分析试样的方法,其特征在于包括将试样输送到测量容器中以测量试样并将稀释剂和所测量的试样输送到稀释剂容器中以使其混合以稀释上述试样的步骤。
此外,此外,根据本发明的分析方法是应用如上文所描述的分析盒分析试样的方法,其特征在于包括将试样输送到测量容器中以测量试样并将稀释剂和所测量的试样输送到稀释剂容器中以使其混合以稀释上述试样的步骤,以及将这种稀释试样与试剂进行混合的试样分析步骤,其后分析该试样,以及在上述试样分析步骤之前和之后包括如下的步骤应用测量容器和用于稀释上述试样的稀释容器来稀释并分析校正溶液,以及应用通过校正溶液的分析所测量的值来校正通过试样的分析所测量的值。此外,在下文中上述校正溶液还称为标准溶液。
附图5所示为通过在附图4所示的过程中制备的分析盒的外观的透视图;附图6所示为在其中将连接器安装在附
图1的反应道模型的平面部件的位置的实例;附图7所示为说明制造分析盒的过程的概念性视图;附图8所示为说明连接器的结构的剖视图,在该连接器中与分析盒相接触的部分呈刀口状;附图9所示为说明分析盒和液体输送控制装置的结构的概念性视图;附图10所示为测量憎水膜的反水压力的实验室装置;附图11所示为构成本发明的一实施例的分析盒的平面部件的反应道模型;附图12所示为附图11的平面部件的背面(没有槽的平板面);附图13所示为附图12的平面部件的a-a’线的剖视图;附图14所示为说明处于如下状态中的具有排气孔的分析盒的结构和气体特性的剖视图其中气体不能在横向渗透;附图15所示为附图14的分析盒的平面视图;附图16所示为说明处于如下状态中的具有排气孔的分析盒的结构和气体特性的剖视图其中气体在横向渗透。
在下文中,为解释的方便在每附图中表示方向的术语比如“上”、“下”、“前”、“后”、“左”和“右”都意味着单个的方向。
附图1和2所示为本发明的第一实施例的分析盒1(用于临床诊断的化学项的测量)。附图1所示为分析盒1的反应道模型,并且是从没有槽的构成分析盒1的平面部件100的表面的侧面看的视图。此外,附图2所示为分析盒1的容器部分的部分垂直剖视图。此外,附图2所示为各种容器的试剂存储容器111a的代表性实例。
分析盒1具有通过从有机聚合物比如PMMA、硅、玻璃等材料中选择的材料所形成的平面部件100,这种平面部件100具有从前面到背面穿过部件的许多通孔101至108、110至122c,平面部件100的背面形成有几微米到几毫米的宽度和深度的许多槽(通过在附图1中的线所示)。
即,具有相对较大的直径的通孔101形成在左侧上的稍微偏上的位置中,具有相对较大的直径的通孔102形成在通孔101之下,并形成槽以使在通孔101和102之间形成链接。
此外,具有中等尺寸直径的通孔103形成在该部件的中心附近稍微偏上的位置中,具有中等尺寸直径的通孔104形成在通孔103之下,具有中等尺寸直径的通孔105形成在通孔103的右边,具有中等尺寸直径的通孔106形成在通孔105之下,以及具有中等尺寸直径的通孔107形成在通孔106的右边。此外,形成槽以使在通孔103和104之间形成链路,以及形成槽以使在通孔105和106之间形成链路。
此外,具有中等尺寸直径的通孔108形成在通孔102的右边,比其它的槽更宽的宽槽108形成在通孔108的右边和通孔103之下。此外,形成槽以使分别在宽槽109和通孔103之间和在宽槽109和通孔108之间形成链路,并在宽槽109和通孔106和107之间通过在其某些中点分之的槽形成链接。
此外,具有较小直径的通孔110形成在宽槽109之下,形成槽以使在宽槽109和通孔110之间形成链接。此外,形成从通孔110朝下延伸的短槽,从通孔102朝下延伸并在右边方向上弯曲的槽链接到短槽。
此外,在平面部件100的低部部分中,形成大量的通孔以使在垂直方向上在许多行上和在横向方向上在许多列中形成通孔。在附图1中,形成在垂直方向上有3行和在横向方向上有12列的总共36个通孔111a,111b,111c,112a,…,122a,122b,122c作为实例。
这些通孔111a至122c都是其直径比通孔110的直径进一步更小的通孔,在每列中的三个通孔(111a,111b,111c,等)组成一组,每组都具有相同的结构。
此外,从通孔110朝下延伸的短槽分之为许多槽,每个分之的槽朝下延伸到有上述三个通孔(111a,111b,111c,等)组成的每个组的左侧,并在第一行通孔111a,112a,…,122a和第二行通孔111b,112b,…,122b之间和在第二行通孔111b,112b,…,122b和第三行通孔111c,112c,…,122c之间成U-形弯曲,并以迂回的方式从低侧连接到第三行通孔111c,112c,…,122c。此外,以U-形弯曲的槽可以是线性槽、弧形槽等,只要它足够长以允许在试样和试剂的混合和反应所需的时间周期内流出液体。
此外,在第一行中的通孔111a,112a,…,122a和在第二行中的通孔111b,112b,…,122b通过朝外延伸的槽每个都连接到在每组的左侧上垂直地延伸的槽。
此外,对于平面部件100的前面和后面上文所描述的通孔101至108,110至122c的直径可以不相同(例如通孔逐渐变小),或者可以都相同。此外,应用钻子、激光器等在形成了平面部件100之后在平面部件100上可以形成通孔101至108,110至122c,或者如果平面部件100由数值形成,则可以在形成平面部件100的模具上事先形成提供通孔101至108,110至122c的突起部分以在形成平面部件100时形成通孔。
在另一方面,平面盖板130粘接到具有如附图2所示的上述槽的平面部件100的后面上,由此上述槽是毛细管150。此外,上述通孔101至108,110至122c在平面部件100的前面上具有通向平面部件100的外面的开口,并作为在其中存储液体比如试样和试剂和废液的容器。此外,在下文中,为解释和说明的方便,用于表示通孔的附图标记101至108和110至122c还直接用作容器的附图标记。
此外,液体不能通过但气体(特别是空气)可以通过的膜140(例如,PTFE的多孔膜)粘接到平面部件100的前面,由此形成了覆盖容器102,104,106,108和110至122c的开口的排气孔141。
现在,简要描述容器101至108,110至122c和宽槽109的使用(在下文中将更加详细地描述)。
容器101和102是用于试剂溶解液的容器(下文中描述为试剂溶解液滴定容器101和试剂溶解液存储容器102),容器103和104是用于试样稀释的容器(在下文中描述为试样稀释滴定容器103和试样稀释存储容器104),以及容器104和106是用于标准溶液的容器(在下文中描述为标准溶液滴定容器105和标准溶液存储容器106)。
此外,容器107是用于试样的容器(在下文中描述为试样存储容器107),宽槽109是用于测量试样和标准溶液的槽(在下文中描述为测量槽109),容器108是用于测量槽109的废液的容器(在下文中描述为废液存储容器108),以及容器110是用于应用试样稀释剂稀释试样的容器(在下文中描述为稀释和混合槽110)。
此外,在平面部件100的低部部分中的总共36个容器111a,111b,111c,…,122c形成了定量反应区125,其中在上面的两行中的24个容器是用于试剂的容器(在下文中描述为试剂存储容器111a至122a和111b至122b),而下面的行中的12个容器是用于废液的容器(在下文中描述为废液存储容器111c至122c)。
在分析盒1中的试剂的封装形式包括如附图2中所示将非液体试剂160固定在容器中的形式和如附图3所示将在其中封装有液体试样302的部分包装300和用于破裂该部分包装300的针301一同提供的形式。
此外,附图3所示为如下的状态在其中通过活塞303从平面部件100的外面推在平面部件100中形成的部分包装300,由此通过包括在平面部件100的外面的针301破裂部分包装300以使液体试剂302流进试剂溶解液滴定容器101和毛细管150。
在此所使用的部分包装300的形状并不特别限于这些,只要它是一种能够包含足够溶解或稀释试剂和试样的试剂溶解液体稀释剂的剂量的容器,但容易制造的盒状或圆柱状包装比较可取。
部分包装300的材料优选具有良好的阻气性以便防止在所盛的液体中的水分蒸发和由于氧气的进入造成所盛的液体质量下降。为防止氧气进入,可以使用在其上镀或淀积铝的树脂片,但是如果由在其中封装的氮气紧紧地包围着分析盒则可以消除氧气的进入的问题。此外,可取的是,需要尽可能地减少在所盛的液体中的水分的蒸发,因为如果水分蒸发的话则改变了所盛的液体的浓度。特别是对于在其中封装有校正溶液的部分的包装,水的蒸发量应该小至每年0.1%,并且使用镀铝的聚乙烯片等。
对于部分包装300的材料,聚乙烯、聚丙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、聚甲基戊烯树脂等都适合于用作部分包装袋300的材料,因为这些树脂可以减少水分的渗透性并且容易实施注塑成型和压力成型。
此外,部分包装300优选形成为尽可能地薄以使它在使用时容易破裂。将试剂溶解液体或稀释剂放在所形成的部分包装中,并连接上带有用于使部分包装破裂的钉子的盖。盖和钉子的材料可以与部分包装的材料相同或不同。此外,形成钉子以使它与盖结合成一个整体或可以在形成它之后将它连接到盖。在任何情况下,钉子应该具有使部分包装的低部破裂的强度。
通过超声波焊接、应用粘胶剂的粘接、应用双面胶带的粘接等将带有钉子的盖连接到部分包装。此外,可以将整个部分包装封装在分析盒中,并在其上部部分覆以憎水排气孔。在这种情况下,不需要钉子,通过在排气孔上压活塞等产生的压力使部分包装破裂以将所盛的液体排出。
对于部分包装的形状,除了上述形状的部分包装以外,还可以使用具有注射器形状的活塞型容器。在带有旋塞的容积的出口上形成活塞型的容器,通过施加预定大小的压力可以使该旋塞破裂,当活塞型容器连接到在该容器中封装液体的分析盒时,通过一种装置从外部压内缸(活塞)以控制在分析时液体等的输送,从上述出口中将所盛的液体挤出。此外该缸的包装应该是牢固的。
此外,由聚乙烯等材料构成的并且一端封闭的麦杆状的容器是低廉的部分包装的一种实例。在这种容器中,当给在其中封装有液体的容器中施加压力时,出口中的旋塞打开以将所盛的液体挤出到容器和反应道中。
将要求相对较大的体积的液体试剂(其剂量在从几十到几百微升或在某些情况下几千微升的范围中的液体)比如试剂溶解液和试样稀释剂都封装在这种部分包装300中,然后将部分包装300放置在分析盒1中。
如果放入非液体试剂160,则上述非液体试剂160溶解在当部分包装300破裂时所提供的试剂溶解液体中,因此在分析盒1中制备了试剂溶液。
如果应用部分包装300来将试剂溶液等引入到容器中,则可以将预定浓度的试剂溶液和缓冲剂放入部分包装300中。此外,为溶解非液体试剂160以在分析盒1中制备预定浓度的试剂溶液,容器需要具有预定的容许偏差范围的预定体积。在血液生物化学检查的情况下,在试剂溶解之后它的浓度的变化优选为2%或更小作为CV值(通过将标准偏差除以平均值所获得的值)。因此,容器的形成和制造的精度和连接盖板130和排气膜140的工艺中的精度变得非常重要。然而,由于在形成和制造过程中的精度和在工艺中的精度的原因,在本实施例中还存在在容器和槽中的上述CV值大约为5%的情况,所以每个分析盒优选应用标准溶液校正。
此外,附图2所示为非液体试剂160吸附到排气膜140的情况的实例,但非液体试剂可以吸附到容器111a的壁,只要毛细管150和排气膜140的整个表面没有覆盖试剂。实际上该试剂可以吸附到排气膜140和容器111a的壁。
附图4所示为说明将在其上吸附有非液体试剂160的排气膜140(例如,PTFE多孔膜)连接到构成容器的具有通孔111a,111b,111c,…,122c(为表示的方便附图4仅示出了这些通孔中的一部分)的平面部件100的过程,通过有机聚合物的注塑成型已经形成了这些通孔,并且在这些容器其间具有表面支撑试剂。此外,附图5所示为分析盒1的外观的透视图。
如附图4所示,非液体试剂160以点的形式吸附在相对于在排气膜140上的通孔111a,111b,111c,…,122c的位置的位置中,通过将排气膜140粘接到平面部件100将非液体试剂160封装在容器111a,111b,111c,…,122c中。
连接到其中的盖板130的平面部件100仅具有试样入口150,该入口150具有用于使液体通过的开口的血浆分离过滤膜,在部分包装300中所盛的试剂溶解溶液、试样稀释剂和其它的试剂都封装在分析盒1中。
应用排气孔141通过连接到分析盒1的液体输送控制装置实施在本实施例的分析盒1的毛细管中的液体的输送。液体输送控制装置包括允许或调整气体通过排气孔141进入/排出的阀(未示)。此外,阀放置在与在其中有排气孔141的容器相对的位置中,并位于在仅仅粘接到具有被覆盖的排气孔141的分析盒1的连接器(未示)和气压泵(未示)之间。此外,上述阀可以形成在连接器中。
即,上述液体输送控制装置包括液体输送控制机构,该液体输送控制机构通过打开上述阀允许液体流进容器中以使气体进出排气孔141并通过关闭上述阀调节液体进入容器来调节气体进出排气孔141。
为允许气体通过排气孔141进出,连接器可以与分析盒1分离以使排气孔141直接释放在外部或者应用三通阀来通过切换该阀直接将排气孔141释放在外部,连接器粘接到分析盒1。此外,不使用气压泵,可以使用真空泵来将在连接器中的压力减小到负压。此外,还可以将压力施加到液体发送侧并减小在液体接收侧中的压力。
此外,通过将连接器粘接到分析盒1并关闭上述阀或停止气压泵可以实施调节气体通过排气孔141的进出量。
此外,应用不需要应用上述阀进行操作的液体输送控制装置可以允许或调节气体通过排气孔141的进出量。
这种液体输送控制装置包括例如这样的一种液体输送控制装置,该液体输送控制装置应用连接器形成在带有排气孔的容器的相对的侧面上,当连接到气压泵的管等连接到其中时该连接器打开,而当该管等断开时该连接器关闭,通过连接/断开该管等可以控制允许或调节气体通过排气孔的进出。
附图6所示为在附图1的平面部件100中在其中提供连接器的位置的一种实例。如附图6所示,除了试剂溶解液滴定容器101、试样稀释滴定容器103和标准溶液滴定容器104以外的所有的容器都带有连接器。
此外,对于试剂存储容器和废液存储容器,这样提供一个连接器以便覆盖所有的试剂存储容器111a,112a,113a,…,122a,111b,112b,113b,…,122b,以及这样提供一个连接器以便覆盖所有的废液存储容器111c,112c,113c,…,122c。
此外,在附图6的实例中,一起示出了通过电渗流输送液体的电极和引线和记录分析盒1的每批校正值和测量项信息的条形码。
现在应用附图1和附图3描述液体的运动。附图3所示为将分析盒1设置在分析装置中的视图,在该分析装置中仅示出了分析盒1的连接部分包装300的部分和仅示出了分析装置的活塞303。此外,这个分析装置可以与液体输送控制装置和检测装置结合使用或单独使用。
这种分析装置具有通过在该分析装置中的活塞303挤压连接到分析盒1的部分包装300由此将所盛的液体排放到分析盒1的机构。具体地说,将具有与部分包装300的直径匹配的直径的活塞303放置在设置分析盒1的部分包装300的部分中,在分析开始时,活塞303自动地给部分包装300施加压力以使封装在部分包装300中的试剂溶解液体或试样稀释剂流入分析盒1的容器中。
即,如附图3所示,通过应用活塞303挤压部分包装300使在其中盛有试剂溶解液体的部分包装300破裂以通过试剂溶解液滴定容器101将试剂溶解液体引入到试剂溶解液存储容器102中。同时,打开耦合到连接到试剂溶解液存储容器102的连接器的阀,并关闭所有的其它的阀。在部分包装300中的液体剂量远大于试剂溶解液存储容器102加上试剂溶解液滴定容器101的体积。
类似地,从在其中盛有试样稀释剂的部分包装300中通过试样稀释滴定容器103将试样稀释剂引入到试样稀释存储容器104中。
如果要求的话,从部分包装300中将在其中溶解有预定浓度(阳极控制)的检测目标的标准溶液通过标准溶液滴定容器105引入到标准溶液存储容器106中以进行校正。应用与用于试样的测量容器和稀释和混合容器相同的测量容器109和稀释和混合容器110稀释标准溶液。在每个分析盒中应用标准溶液来进行校正,由此校正了在分析盒的制造的过程中的精度偏差和在处理分析盒的过程中的精度偏差,因此它能够进行较高精度的分析。
在定量反应区125的试剂存储容器111a到122a和111b到122b(事实上还可以进行定性反应)中,固定适合于每次测量的不同的组分的非液体试剂160。每个都盛有非液体试剂160的试剂存储容器111a到122a和111b到122b的阀都打开,则通过气压泵(未示)给试剂溶解液存储容器102施加压力,所有的其它的容器的阀都关闭,试剂溶解液体流进每个试剂存储容器111a到122a和111b到122b中以溶解非液体试剂160。
如果排气孔141具有预定的性能,在每个试剂存储容器111a到122a和111b到122b中的空气通过排气孔141排放到分析盒1的外部,并且当试剂存储容器111a到122a和111b到122b都填充液体时,停止将液体输送到试剂存储容器111a到122a和111b到122b中。即,每个非液体试剂160溶解在其剂量与试剂存储容器的体积一致的试剂溶解液体中以形成预定浓度的试剂溶液。
通过血浆分离过滤膜(过滤器)将总的血液试样引入到试样存储容器107中。然后,滤去血细胞(血小板可以保留)以剩下血浆,将该血浆存储在试样存储容器107中。当在试样存储容器107中的血浆试样流入到测量容器109中时,只是废液存储容器108的阀打开,而其它所有的阀都关闭。
此外,当应用上述气压泵给试样存储容器107施加压力时,在试样存储容器107中的血浆试样通过具有预定容积的测量容器109流进废液废液存储容器108中。如果在以血浆试样填充测量容器109时废液废液存储容器108的阀关闭,则停止输送血浆试样。如果停止给试样存储容器107的施加压力以关闭阀,则当应用上述气压泵给试样稀释存储容器104施加压力以打开稀释和混合容器110的阀时,以在试样稀释存储容器104中的稀释剂稀释在测量容器109中的血浆试样,并使其流入到稀释和混合容器110中。
此外,在容器盛满液体时,关闭阀以停止通过气压泵施加压力,但在该系统可以采用通过检测空气不再从排气孔中排出等手段来自动地停止该阀。然后,只要容器盛满液体就停止通过气压泵施加压力,由此降低排气孔的负荷。
可以应用两级或多级容器作为稀释和混合容器110以实施如上文一步一步地描述的操作,由此可以提高混合效率,或者应用两级稀释和混合容器来带走液体并返回,由此提高混合效率。通过稀释和混合容器110的容积和和测量容器109的容积来唯一地确定稀释率。
可取的是,对于每批的分析盒1的处理和组装,通过抽查分析盒1来校正这种容积。可取的是,在系统中通过条形码和磁带在分析盒1中记录这种校正的信息,分析装置自动读取在测量时的信息以计算通过分析所测量的值。
如果将以这种方式获得的以预定的稀释率稀释的血浆试样与预定浓度的试剂溶液反应,则在分析盒1中可以容易地实施这种分析反应比如定量反应、定性反应等。
在试剂存储容器111a和111b中的试剂溶液与经稀释的试样逐一地进行反应,并且在流进在附图1中的废液存储容器111c之前在检测部分126中进行测量(借助于在附图1中的实例中的热透镜进行检测)。试剂存储容器112a和112b和废液存储容器112c都是用于另一测量的容器,试剂存储容器122a和122b和废液存储容器122c都是用于其它的另一测量的容器。虽然在附图中没有示出附图标记,但对于其它的定量反应区125来说都相同。
为在分析盒1中进行混合,可以采用流量比率控制系统,在这种流量比率控制系统中将试剂溶液和稀释的试样以预定的流量比率连续地混合在一起以实现适合于反应的混合率而不需要测量容积。此外,以在每测量容器中进行测量的方式对试剂溶液进行称重并混合从而进行定量反应。
对于通过毛细管在任何容器之间输送液体的方法,可以使用如下的方法之中的任一方法如上文所述的基于吸气和排气泵的方法、如在本发明人的日本专利申请No.11-352445说明书(当提交本发明申请时还没有公开)中所描述的基于重力的方法、如下文所描述的应用电渗流的方法、在其中通过活塞等类似的部件从外部通过部分壁推或挤压在分析盒中的液体的方法以及基于微动泵等应用微动机构、隔膜、止回阀等的组合的方法或者这些方法的结合。
例如在前述的Proceedings of the μTAS’98 Workshop,1998年10月13-16日在加拿大的Banff举行,编者D.Jed Harrison和Albertvan den Berg,Kluwer Academic Publishers等中描述了微动泵的实例。
在上文中已经描述了通过在释放到外部的容器(排气孔)和受空气压力挤压的容器(排气孔)之间的压力差输送液体的实例,但是通过在以泵减压的容器(排气孔)和释放到外部的容器(排气孔)之间的压力差也可以输送液体。在这种情况下,使接受液体的容器(排气孔)减压,而使送出液体的容器(排气孔)释放到外部。此外,通过在以泵减压的容器(排气孔)和受空气压力挤压的容器(排气孔)之间的压力差也可以输送液体。还可以在受到不同的增压等级的容器之间和在受到不同的减压等级的容器之间输送液体。
(分析盒的详细描述)本实施例的分析盒1包括在带有槽的表面上形成的平面部件100和盖板130,液体通过该槽输送。此外,平面部件100连接到在其间带有上述槽的盖板130,由此形成毛细管150以制备分析盒1。
可以应用无机材料比如硅和玻璃和有机聚合物制备平面部件100。在应用硅和玻璃的情况下,应用真空蒸发等方法在玻璃、石英或硅基片上形成几千埃厚的蚀刻的保护膜(铬等),并应用旋转器在其上涂敷构图抗蚀剂。此后,应用光刻蚀刻掩模将抗蚀剂暴露在紫外线光中,其后进行显影(应用溶剂除去未固化部分)以将抗蚀剂构造成所需的形式。
然后,应用所构图的抗蚀剂作为蚀刻掩模,应用铁氰化钾溶液等溶液来溶解蚀刻保护膜以对蚀刻保护膜进行构图。随后,应用所构图的抗蚀剂和蚀刻保护膜作为掩模,例如应用氟化溶液来蚀刻基片以形成槽。此后,蚀刻掉抗蚀剂和保护膜。此外,除了上述基片以外,制备玻璃等基片,在该玻璃等基片上应用比如超声波加工工艺形成通孔。最后,将带有槽的基片和带有通孔的基片彼此粘接在一起并使所形成的槽在其间,并在例如真空烘箱中加热(如果两个基片都是玻璃基片的话,则可以将它们在600℃下加热几小时),然后进行冷却,由此将它们熔接而制备平面部件。
平面部件100还基于在日本专利公开No.6-283830中所描述的制造电路板的方法制造。如果在这种方法中应用玻璃基片,则应用在其中在玻璃基片上形成抗蚀剂图形的方法,并通过喷砂工艺处理玻璃基片。由于较厚的抗蚀剂造成所有的飞行的颗粒都在垂直方向上运动,与通常较薄的抗蚀剂相比可以快速地处理基片,可以形成较高纵横比的槽。此外,应用如下的方法,在该方法中在玻璃或树脂基片上涂敷光敏抗蚀剂以将除了槽以外的部分暴露在光中,随后除去未固化的部分以在基片上形成槽形抗蚀剂图形。
在应用有机聚合物来制备平面部件100的情况下,如果进行光学检测,应用对用于检测的波长的光透明的树脂。例如,在应用光热转换检测法来实施检测的情况下,以ASTM D1003法测量的树脂的透光率为80%或更大,优选90%或更大。此外,在通过分光光度法、化学发光法和荧光测定法进行检测情况下,透光率为80%或更大,优选90%或更大。
此外,在每种方法中都能够使用的激励和检测的激光的波长在从400到800纳米的范围,在光热转换检测法中优选从600到800纳米的范围。此外,一般地,如果以H2O2-proxytase为例,在通过分光光度法检测的情况下波长的范围为从500到800纳米,在通过化学发光法检测的情况下波长的范围为从400到600纳米,在通过荧光测定法检测的情况下波长的范围为从480到700纳米。
此外,在应用光热转换法的情况下,由于树脂最小的吸收率的原因,在树脂中也形成热透镜以形成背景,因此在树脂中在全部的光距上激励光和探测光的树脂的吸光率为5%或更小,优选1%或更小,更为可取的是0.5%或更小。
此外,在用于具有槽的平面部件100的有机聚合物的材料的选择中,模制加工性是一个重要的因素。根据模制的加工性可以适合使用的材料包括可以进行常规的融化处理的热塑性树脂和通过UV固化获得的树脂。此外,从大量地低廉地制造在它的表面上具有槽的平面部件100的角度讲前者更适合。
具体地说,如下的树脂较适合非晶热塑性树脂、具有非晶树脂作为主要成分的热塑性聚合物合金或具有较低的结晶度的某些晶体热塑性树脂。特别是,基于苯乙烯的树脂比如聚苯乙烯和苯腈丙烯腈共聚物、甲基丙烯酸树脂比如聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)和甲基丙烯酸甲酯苯乙烯共聚物、聚碳酸脂(PC)、聚砜(PS)、聚醚砜、聚醚酰亚胺、多芳基化合物、聚甲基戊烯等都适合于应用。
此外,基于1,3-环己二烯的聚合物也适合于使用。对于基于1,3-环己二烯的聚合物,可以使用均聚物,但也可以使用共聚物。这些共聚物包括带有如下单体的共聚物基于共轭二烯链的单体比如1,3丁二烯、异戊二烯、1,3戊二烯、3-己二烯、芳香乙烯单体比如苯乙烯、α-甲基苯乙烯、p-甲基苯乙烯、1,3二甲基苯乙烯、乙烯基萘和乙烯基苯乙烯、极化的乙烯基单体比如异丁烯酸甲脂、丙烯酸甲酯、丙烯腈、甲基乙烯基甲酮和甲基α-氰基丙烯酸酯或极性的单体比如环氧乙烷、氧化丙烯、环内酯、环内酰胺和环硅氧烷或乙烯、基于α-烯烃的单体。对于共聚合化率,1,3-环已二烯单体与共聚单体的重量比率优选在75/25到100/0的范围内。
较高的光透射率的基于环己二烯的聚合物详细描述在日本专利申请No.9-277045说明书中。因为这种聚合物在200纳米的波长以上具有非常小的吸收率,并且是非晶的C-H聚合物,所以还可以应用短波长光源检测它们。
通过如下的方式可以制造由有机聚合物所形成的在其表面上带有槽的平面部件在模具中使单体或大单体UV固化或热固化、熔化处理和塑性处理热塑性树脂、对在表面上没有槽的平面部件进行加工或通过激光等蚀刻在表面上没有槽的平面部件等。从能够大量且低廉地制造在表面上具有槽的平面部件这方面讲,可合适地使用的方法包括熔化处理和塑性处理热塑性树脂。进一步适合地使用的方法包括应用模具注塑成型和/或压力成型以及热塑性树脂的压花形成工艺。
具体地说,注塑成型法是一种特别优选的方法,因为该方法能够以良好的可制造性来制造由有机聚合物制成的具有很高精度和细微的槽的平面部件,在注塑成型法中实施注入成型,同时减少在将树脂装入到模具腔体中的过程中与模具相接触的树脂的表面的固化温度(日本专利公开No.10-128783A、日本专利公开No.10-46665说明书和日本专利公开No.10-50719说明书)。这种注入成型法的具体实例包括在实施注入成型之前以二氧化碳气体填充该腔体的方法。在这种情况下二氧化碳气体的压力优选为10兆帕或更小。
此外,在其中加热模具的表面以实施模制的下列注入成型法也都是优选的方法比如在进行成型之前立即通过高频感应加热加热模具的表面的注入成型法(描述在日本专利公开No.62-58287B,美国专利No.4439492说明书等中),以及通过在进行成型之前立即通过辐射加热来加热模具的表面的注入成型法(描述在Molding Symposia’95,241<1995>,Molding’96,69<1996>,Synthetic Resin,42vol.(1),48<1992>等)。
换句话说,由于上述模塑方法通过在实施模塑之前立即应用热源比如高频感应和卤素灯通过有选择地加热模具的表面能够实现兼顾模具表面可传递性和模塑周期,因此这些方法是优选的。
对于形成平面部件的模具,由通常用于模制合成树脂的金属构成的模具适合于这些应用,比如以铁作为主要成分的铁或钢材料、以铝作为主要成分的铝或合金、锌合金和铍铜合金。
现在描述制造模具的方法的一个实例。首先,应用比如紫外线固化的树脂的机加工、蚀刻或光蚀刻处理的方法由比如金属、塑料、硅或玻璃的材料制备具有由细微槽的所需的平面部件的表面的基体。以及应用镍等通过电渗成型法由基体制造该模具。
此外,应用上文所述的日本专利公开No.6-283830中所公开的方法也可以制造该模具,在该方法中形成抗蚀剂图形。在金属基片形成了抗蚀剂图形之后,以电镀金属填充不存在抗蚀剂的部分。然后,除去抗蚀剂以形式在表面上形成由细微图形的金属板。应用这种金属板作为模具可以处理树脂和烧结玻璃。
此外,包括具有槽的由有机聚合物制成的平面部件的分析盒具有槽的内表面,通过聚乙二醇的接枝聚合对该槽的内表面进行蛋白质吸收预防处理。此外,在将下文将描述的电渗流作为输送液体的手段的情况下,进行表面处理以形成稳定的电渗流。
通过如下的方法通过将平面部件100和盖板130连接在一起并使上文所述的槽在其间而形成本实施例的分析盒1超声波焊接、熔接、应用热的熔熔胶合剂和UV胶合剂进行的粘接、应用胶粘剂进行粘接、应用双面胶带进行粘接和直接压力焊接或通过薄弹性片进行压力焊接。
盖板130的材料可以从在平面部件100中所使用的材料中选择,可以使用相同或不同的材料。只要对光学检测没有不利的影响,对材料的厚度就没有特别的限制,但是材料的厚度的范围优选从大约0.05到几毫米内。
此外,在可制造性方面本实施例的分析盒1优选是这样的结构在表面上具有槽的平面部件100连接到盖板130上同时上述槽在其间,但它还可以是三层结构,在这种三层结构中可以将具有通孔的平面部件放在两盖板之间以形成槽。
这种盖板可以带有通孔容器,或者可以具有矩形或圆柱形容器(包括废液存储容器)以从平面部件100凸伸。凸伸容器的尺寸并没有特别的限制,但是其高度大致在从1到几毫米的范围直径在从1到几毫米的范围比较可取。如果带有槽和盖板的平面部件的厚度为几毫米,则上述通孔还可以具有容器的作用。
在本实施例中,在平面部件100上的槽的横截面的形状可以是多边形的形状比如矩形和三角形、半圆形和半椭圆形,没有特别的限制。此外,平面部件100在表面可以具有通过将不同形状的一些槽组合在一起而形成的反应道。槽的上表面(开口部分)的宽度可以与下表面(底部)的宽度相同或比其更大。此外,最为可取的是,槽的横截面为矩形横截面形状。
如果这些槽太小的话则在液体中的细微颗粒或血细胞可能造成阻塞。此外,如果槽太大则当混合两种液体时扩散的混合效率降低。因此,可取的是,槽的宽度在从1到500微米的范围内,槽的深度的范围在从0.1到1000微米的范围内,以及横截面积为从1到250000平方微米的范围内。更为可取的是,槽的宽度是从2到300微米的范围内,槽的深度的范围在从1到200微米的范围内,以及横截面积为从2到60000平方微米的范围内。
在平面部件100的表面上的槽的尺寸的精度没有特别的限制。然而,当实施非常少量的成分分析或定量分析时,优选较高程度的尺寸精度。即,为确保操作精度和在单个分析盒中的复现性,对于宽度和深度槽的尺寸精度优选在设计尺寸的正负5%内,对于剖面积尺寸精度优选在设计尺寸的正负7%内。此外,更为可取的是,对于较高精度的定量分析,对于宽度和深度槽的尺寸精度优选在正负2%内,对于剖面积尺寸精度在正负4%内。
在通过控制流量的比率来实施在本实施例中的分析盒1中进行定量反应的情况下,以固定的比率混合液体至少以一定的时间周期连续地实施反应(本发明人提交的日本专利申请No.10-181586说明书,“Mixinganalysis apparatus and mixing analysis method”),通过具有槽的平面部件100形成该分析盒1,该分析盒1具有用于一种试样和至少一种类型的试剂溶液的单个反应道和控制流量的机构,在这些反应道逐个地或同时地融合之后这些单个的反应道链接到具有检测部分的反应道。此外,流量是指在预定时间周期内在槽(毛细管)中移动的液体的体积。
(排气孔的描述)对于在本实施例中所使用的排气孔(具有排气孔的部件)141,可以使用任何材料,只要在分析盒1中液体不能通过这些材料而气体尤其是空气可以通过该材料即可。
如果在分析盒1中的液体是一种溶液,可以应用带有孔的憎水材料。如果应用憎水孔作为排气孔,则由于表面张力的缘故溶液不能通过该排气孔,所以只要气体可以通过该排气孔,因此与不具有憎水性的材料相比,降低了液体泄漏的可能性。
排气孔的一种优选实施例是由憎水聚合物或无机材料构成的带有少量的直径大约为1微米到几百微米的小孔的平板、薄板等。即使一个容器的排气孔仅具有一个到几个孔,如果适合地选择孔的尺寸和材料的憎水性的话,也可以增加作为排气孔的有效的功能。应用钻等可以机械地打这些孔或可以应用激光等可以打这些孔。
可取的是,憎水有机聚合物在20℃下具有大约4×10N/m或更小的临界表面张力,聚合物的实例包括聚四氟乙烯(PTFE)、硅、硅氧烷、聚乙烯、聚丙烯、聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚碳酸酯、聚砜、聚醚砜、多芳基化合物、聚甲基戊烯、和基于的1,3-环已二烯聚合物。
在另一方面,在分析盒1中的液体是憎水有机溶剂的情况下,适合于使用憎水多孔膜。此外,还可以使用由憎水材料构成的平板、薄片、膜等作为排气孔,在溶液的情况下这些平板、薄片、膜等具有小孔。
对于医疗诊断,在分析盒1中的液体通常是水作为主要成分,因此使用憎水材料作为排气孔。
对于排气孔,不仅可以具有少量的孔的较小的直径的材料,而且可以还使用多孔膜。在制造分析盒的过程中,因为通过将憎水多孔膜粘接到所形成的基片上可以简单地形成排气孔,所以提高了可制造性。此外,通过挤压这种憎水多孔膜以施加压力可以将在容器中的液体挤到毛细管中,这是比较可取的。
对于憎水膜材料,适合于使用在上文所描述的憎水有机聚合物。然而,在GOT/GPT、胆固醇水平等的生物化学分析中,为防止吸收血浆蛋白质等,经常将表面活化剂加入到试剂中,因此在这种情况下需要使用更多的憎水膜。
通常,还可以使用醋酸纤维素膜,但当使用在其中加入了表面活性剂的试剂时,较高憎水性膜比如PTFE、硅和聚乙烯是更为可取的,因为这种膜具有较强的能力(反水压力)以防止液体从排气孔泄漏。如果考虑干燥非液体试剂并将其固定到排气孔的过程,则相对于包含表面活性剂的在形状上更稳定的PTFE膜具有较高的憎水性,因此它比较可取。
由于在较高的压力下输送液体,因此,排气孔的反水压力越高,越是可取,排气孔的反水压力优选为100g/cm2或更高,更为可取的是1000g/cm2或更高,进一步更为可取的是3000g/cm2或更高。
在试剂存储容器等中使用憎水多孔膜作为排气孔的情况下,当试剂溶解液体输送到试剂存储容器中时如果液体的压力太高,则憎水多孔膜可以膨胀以引入大量的试剂溶解液体以降低试剂溶液的浓度。因此,应用以非编织纤维比如聚丙烯加强的表面(与试剂存储容器相对)的憎水多孔膜作为一种优选实施例。
在其中将具有孔的片或憎水多孔膜连接到具有通孔的基片以形成排气孔的方法包括在其中应用热固化或UV固化粘合剂、双面胶带等将它们粘接在一起的方法。
如果在具有孔的片或憎水多孔膜中在具有排气孔的功能的部分中(即覆盖通孔的部分)存在粘合剂或双面胶带则会出现问题。因此,如果涂敷粘合剂的话则需要进行预处理以掩盖覆盖通孔的部分,或者,如果使用双面胶带的话对与覆盖通孔的部分相对应的部分事先进行冲孔以在其中形成孔。在使用双面胶带的情况下,从制造的效率的方面讲如下的方法比较可取,在该方法中事先制备具有用于对覆盖通孔的部分进行冲压的刃部的模具并将具有孔的片或憎水多孔膜连续地连接到具有通孔的基片上同时对双面胶带进行冲孔。
气体在憎水多孔膜中通过的方向通常垂直于憎水多孔膜的表面的方向,即厚度方向。然而,气体还可以在平行于憎水多孔膜的表面的方向上传递(在下文中称为横向方向)。即,应用非气体可渗透的材料比如PET膜还可以覆盖与憎水多孔膜的容器相对的表面以防止气体从厚度方向穿过,由此在横向方向上从容器将气体传递到膜的端部。然而,一般地说从简化排气孔的结构方面讲,气体在厚度方向传递更为可取。
此外,还存在的情况是,在膜的横向方向传递气体对在分析盒的液体输送的控制有不利的影响。如果每个容器分别具有憎水多孔膜,即如果憎水多孔膜仅覆盖一个容器的开口,则不会出现问题。然而,如果一个憎水多孔膜覆盖许多容器的开口,则可能造成问题。
即,当以相同的方式(以相同的模式)控制液体进入到许多容器时不存在问题,但当独立地控制液体进入到每个容器时,如果气体在横向方向上传递,则气体可以泄漏到容器的排气孔中造成对精确控制的干扰。因此,为在应用一个憎水多孔膜作为许多容器的排气孔时控制液体进入到许多容器中,应该防止气体在憎水多孔膜的横向方向上传递。
为此,可取的是,以单个的憎水多孔膜覆盖每个容器的开口,但当以一个(公共的)憎水多孔膜(从分析盒的可制造性方面讲,更可取的是,以一个憎水多孔膜覆盖它们)覆盖许多容器的开口时,位于容器之间的憎水多孔膜部分需要不渗透气体。
因此,消除了气体在横向方向上传递而造成对液体进入到附近的容器的控制有不利的影响的情况。为使憎水多孔膜不透气,需要填充在憎水多孔膜中形成的孔以消除孔,即去除膜的多孔性。
为实现这一目的,具体地说,可以考虑如下的方法将位于在容器之间的部分浸染粘胶剂或溶剂的方法、通过加热熔化该部分的方法、给该部分施加压力的方法,等。然而,对于通过加热熔化该部分的方法,可能使憎水多孔膜起皱,由此很难使膜粘接到基片。通过施加压力来填充在憎水多孔膜中的孔以消去该孔的方法是上述方法中最为可取的方法。对于施加压力的可取的条件,将温度保持在标准室温中,所施加的压力取决于憎水多孔膜的厚度和孔的平均直径。
此外,还是在由许多容器组成的容器组的情况下,在这些容器组中同时实施对液体的进入/排出的控制,应该给每个容器组提供独立的憎水多孔膜,或者许多容器组以公共的憎水多孔膜覆盖以形成每个容器的排气孔,上述憎水多孔膜应该具有在去除了多孔性的容器组之间的部分。因此,可以独立地控制气体进入每个容器组。
在憎水多孔膜中的孔的平均直径可以是在10微米到0.01微米的范围。然而,考虑到如下的事实随着孔的直径的降低,反水压力增加以及每小时通过的气体量减少(即,气体通过所需的时间和压力增加),以及考虑到容易采集,孔的平均直径优选在从0.05到5微米的范围。当气体在憎水多孔膜的厚度方向上通过时,根据憎水性或阻液性以及气体的可渗透性,孔的直径优选在从0.1到0.3微米的范围内。当气体在横向方向上通过时,根据孔的距离,孔的平均直径优选在从0.5到5微米的范围内。
此外,憎水多孔膜的厚度通常在范围从20到300微米的范围内,但从气体通过的速度和强度方面考虑,其厚度范围为50到100微米比较可取。
(非液体试剂的封装和溶解的描述)本发明的一个特征是非液体试剂封装在带有如上所描述的憎水排气孔的容器中,在分析试样时在分析盒中溶解上文所描述的试剂以立即制备非常少量的试剂溶液。这将在下文中详细地描述。
在本发明的分析盒中,至少一些要封装的试剂是非液体试剂。上述试剂可以是固态试剂比如粉末、晶体或冻干的产品,或者可以是橡胶状或粘性淀粉糊浆状试剂,只要在分析盒的销售的过程(运输和存储的过程中)或在处理分析盒时上述试剂不流入用于连通容器的毛细管中即可。
销售这种分析盒,该分析盒带有封装在具有上文所描述的憎水排气孔的试剂容器中的非液体试剂,封装或附着在分析盒中的试剂溶解液体通过毛细管输送到上述试剂容器中以在实施分析之前立即溶解试剂。
这种机构允许在分析盒中制备非常少量的试剂溶液(即,几微升的试剂溶液),因而不会造成试剂浪费。
此外,因为将在其中封装有试剂的分析盒作为产品,因此,如果购买到在其中封装有所需的试剂的分析盒的话,分析员可以实施所需的分析而不在分析盒中进行封装试剂的操作。
在分析盒中封装非液体试剂的方法包括如下的方法在其中将所需量的固体试剂比如粉末或晶体试剂或冻干的试剂块存储在容器中的方法,以及在其中将溶液试剂分配到试剂容器中以及随后通过使该溶液试剂干燥得到非流体性试剂的方法。
当分配了溶液试剂时,应用双面胶片171将由四氟化乙烯树脂制成的排气膜140粘接到具有通孔的平面部件100的没有槽的表面上,并通过如在附图7中所示的分配装置180将试剂溶液引入到由此所形成的容器中。然后,将试剂溶液干燥成非液体试剂,此后应用双面胶片172将由丙烯树脂制成的且没有孔的盖板130连接到与上述表面相对的表面上,由此形成了本发明的分析盒1。
此外,分析盒1装备有在其中包含标准溶液、试样溶解液体等的部分包装181和用于将血细胞从全部血液试样中分离的过滤器182。此外,在排气膜140中,通过给包围上述容器的开口的部分施加压力来防止气体在横向方向上通过。此外,在双面胶片171中,事先冲压覆盖与上述容器的开口的部分相对应的部分以形成孔。
由于在NDA芯片方面新近的进步,可以实现以几个%或更小的CV值测量从大约1纳升到大约几微升的非常小的范围的体积的技术,因此,如果将这种技术的标点仪(例如,由BioDot Co.,Ltd.制造的Pixsys3000)作为注射试剂溶液的注入装置,则可以精确地测量该试剂并将其封装在分析盒1中。
此外,即使以与前述相反的顺序将排气膜140粘接到盖板130,则仍然可以制备分析盒1。应用双面胶片172将盖板130粘接到具有通孔的平面部件100的带有孔的表面上,将试剂溶液引入到由此所形成的容器中。然后,将试剂溶液干燥成非液体试剂,此后应用双面胶片171将由丙烯树脂制成的排气膜140粘接到与上述表面相对的表面上,由此形成本发明的分析盒1。此外,在这种情况下,优选应用具有较高粘性(较低的流动性)的试剂溶液以使试剂溶液难以流到毛细管中。
下文将利用附图1和2描述这些。应用一种装置比如标点仪以点状形式使溶液试剂沉淀在容器中或在覆盖容器的排气孔141上。然后,干燥溶液试剂,随后将盖板130粘接到平板部件以将非液体试剂160封装在分析盒1中。可替换的是,可以应用如下的方法在该方法中将薄片粘接到具有槽的平面部件100,溶液试剂以点状的形式沉淀与排气膜140的容器相对的位置而干燥,随后将排气膜140和盖板130粘接到平面部件100上。
然而,在这种情况下,不仅需要确保在试剂溶液沉淀时的定位精度,而且还需要控制以点状的形式沉淀的试剂的后干燥直径。换句话说,减少沉淀试剂的后干燥直径以使它比容器的直径更小,而且还要在注入溶解试剂的试剂溶解液体时应该容易清除空气。为此,沉淀试剂的后干燥直径应该比容器的直径稍稍小一些,优选为容器的直径的90%或更小。
即使在标准的室温下和在湿度保持在较低的水平的环境中在标准大气压下可以自然地干燥注入到容器中的试剂溶液,因为它的剂量非常低。在制造的效率方面,希望在降低的压力比如低于大气压的压力下在较短的时间内干燥试剂。在这种情况下,优选基于防止冲击等的真空程序干燥该试剂。还可以冻干,但可能造成平面部件变形而损坏。此外,该试剂可以是通过含水的聚合物和多糖加在一起形成的半干的物质或浆糊状的物质,只要即使在分析盒1倾斜的时该试剂也不会流出即可。
此外,可以分别地冻干该试剂溶液并存储在带有憎水排气孔的容器中,随后通过粘上盖板以覆盖该容器。如果等于或小于要封装在容器中的试剂溶液的剂量的试剂溶液以点状的形式沉淀在适合的薄片等上,并且冻干,则该试剂容易存储在容器中。当试剂溶液以适当的直径通过喷嘴滴定在液氮中时还可以形成较小的试剂颗粒。此外,将非液体试剂形成在分析盒之外的平板上并将该平板封装在容器中。然而,就可制造性而言上述应用溶液试剂的方法更为可取。
在另一方面,为减少正好在分析之前将封装在分析盒中的非液体试溶解在试剂溶解液体中的溶解时间周期,将溶解添加剂加入到用于测量项目的非液体试剂中。为溶解添加剂,可以使用具有适当的分子重量分布的聚合物比如聚乙二醇(PEG)、单糖比如葡萄糖、二糖比如shoecrose、多糖比如右旋糖苷和pluran、低聚糖或这些糖的混合物。
在上述溶解添加剂中,可取的是至少从多元醇特别是乙二醇、丙二醇和丙三醇中所选择的一种类型的添加剂。如在下文描述的实验性的实例2中所示,即使过去在加入通常用作溶解添加剂的PEG都无效时多元醇也仍然有效。此外,在这些多元醇中,优选丙三醇,对于通过仅加入聚乙二醇效果不佳的试剂丙三醇仍然有特别的添加剂效果。
(实例描述)在分析的情况下,可以将河水、海水和来自工厂的废水作为试样。此外,在医疗诊断检查中,可以将血液等作为试样。可以将任何形式的血液比如血浆、血清以及全部血液作为试样。当以血浆或血清的形式作为试样时,可以防止在分离血细胞中产生的损失,因此实际分析所要求的试样的剂量可以很小,即1微升或更小。
通常,当进行血液生物化学检查时应该从全血液中去除血细胞以形成血浆。因此,在直接将全血液引入到分析盒1中的情况下,可取的是试样的剂量为几十微升。对于从全血液中获得血浆的方法,有如下的方法应用离心分离器来处理分析盒1以在分析盒1中进行离心分离,但就方便性而言还可以使用这样的方法使全血液通过血浆分离过滤膜以分离血浆。血浆分离过滤膜包括细胞过滤器、聚四氟乙烯过滤器和玻璃过滤器。在这些过滤器中,就血浆分离而言,玻璃过滤器(例如由WhatmanCo.,Ltd.制造的GF-D)比较可取。
在另一方面,当在分析盒1中实施测量白细胞数量、红细胞数量、血小板数量等时,因为总的血液试样直接稀释并溶血以便使用,因此并不需要血浆分离膜,因此全血液量可以非常小,即1微升左右。
(试剂溶解液和试样稀释剂的描述)试剂溶解液和试样稀释剂都是在分析过程中需要几十微升或更多的剂量的液体试剂,因此将它们封装在袋比如前述的部分包装中并放置在分析盒1中。袋的材料并没有特别的限制,只要袋的质量不会降低并且容易打开以将所装的试剂泄漏到分析盒1的毛细管和容器中即可。就试剂的稳定性而言由有机聚合物构成的袋、由淀积有铝的有机聚合物构成的袋、具有多层结构的袋比较可取。
打开上述袋的方法可以是应用如在附图3中所示的凸起的物体使袋破裂的方法,或者可以是推或挤压与盖相对应的部分以从袋的本体上去除该部分由此打开该袋的方法。此外,可以将打开上述袋的机构形成在该分析装置中,或者正好在使用之前由操作员打开。
(对应用离心力输送液体的排气孔的描述)已经描述了在分析盒1的一个表面上形成排气孔的形式,但是当应用离心力输送液体(离心液体输送)时,可以将排气孔形成在盘形盒的上部盒底部表面中的一个或两个表面上。在这种情况下,由于存在排气孔阻碍光学检测的情况,因此可以将排气孔形成在盘形盒的外部表面上,即在离心力的方向上。因为如果沿着盘形盒的外部表面形成容器则可以仅实施一种试剂反应,所以还可以采用这样的方法,在该方法中在盘形盒中形成许多试剂存储容器,应用蜡制阀(通过熔化蜡打开的阀)和通过打破在离心力和表面张力之间的平衡来打开的阀打开每个容器的出口以将试剂溶液流入到反应道中。
(液体输送控制装置的描述)对液体输送控制装置没有特别的限制,只要该装置能够允许或调整气体通过排气孔141的进入/排出即可。
液体输送控制装置的典型实例是这样的一种液体输送控制装置,该液体输送控制装置包括控制允许或调节气体通过排气孔141进入/排出的阀、连接到上述阀并能够输送和吸入气体的泵、将在与该容器相对的位置上的上述阀与在其间的排气孔141相连接的连接器,以及用于在上述阀、上述泵和上述连接器之间进行连通的管。
连接器需要粘接到分析盒1保持气体密封。为此,在与分析盒1相接触的表面应该提供通常用于O-环的材料构成的包装,或者连接器本身应该由比如具有较好粘接性和气密性的材料构成。此外,在分析盒1的侧面上形成比如由O-环材料构成的包装。
这种材料通常是合成橡胶材料。例如,该材料是乙丙橡胶、硅橡胶、丁腈橡胶、氯丁二烯橡胶、异戊间二烯橡胶、丁苯橡胶、丁基橡胶、乙丙橡胶、聚氨酯橡胶等。
此外,将与分析盒1相接触的连接的部分制成锋利的刀刃状以将连接器连接到分析盒以使刀刃部分插入到分析盒1中。这样,可以确保足够的气密性。此外,与上述方向相对比,与连接器相接触的分析盒1的部分可以制成锋利的刀刃状以将分析盒1连接到连接器以使刀刃部分插入到连接器中。
在附图8中示出这样的实例,在该实例中将与分析盒1相接触的连接器的部分成型为锋利的刀刃部分的形状以将连接器连接到分析盒以使刀刃部分插入到分析盒1中。
在圆形或矩形连接器200的外部区域形成刀刃状部分201。以及通过用于挤压前文所述的部分包装的活塞的活塞303对着分析盒1挤压连接器200以将刀刃状部分201插入到分析盒1中,由此连接器200和分析盒1连接在一起。这样,连接器200可以连接到分析盒1同时保持足够的气密性。
此外,如果以一个憎水多孔膜覆盖许多容器以形成排气孔,则由于挤压上述刀刃状部分而填满憎水多孔膜的孔,因此去除了位于容器之间的部分的多孔性。因此,防止气体在横向方向上从憎水多孔膜中通过。
此外,对所使用的泵并没有特别的限制,只要它能够产生所许的压力等级即可。通常,可以通常地使用压力型泵,但也可以使用如上文所描述的真空型泵。
此外,如果要求定量性的话,则使用微量注射泵、小流量蠕动泵、基于微动机构的线性泵等。
还可以使用双金属和压电致动器作为驱动力发生源,以及还可以使用重力和离心力作为液体输送驱动力。
(电输送方法的描述)通过应用电泳现象、电渗流等的电输送方法也可以实施基于上文所描述的气体的压力差输送液体的一部分,在这些方法中给在毛细管中的液体施加电场(详细的描述参看“Capillary Electrophresis”,Kodansha,等)。应用电渗流的方法是这样的一种方法,在该方法中在毛细管中的液体的运动与在毛细管的内表面上的离子的运动相关,以及如果通过玻璃和硅形成毛细管,则在玻璃等的表面上的硅的质子提供了运动力。
此外,即使使用由有机聚合物比如PMMA、聚碳酸酯树脂(PC)等材料构成的平面部件100,在毛细管的内表面上也不存在特定的离子种类,根据流经毛细管的液体的成分,通过电解质的电贺将在液体中的电解质吸附到毛细管的内表面上以形成电渗流。为形成稳定的电渗流,通过接合聚合等将具有磺酸基或羧基的有机聚合物加入到毛细管的内表面上。在具有羧酸酯基的有机聚合物比如聚甲基丙烯酸甲酯的情况下,可取的是,以氢氧化钠溶液等部分地水解槽的表面以暴露羧基从而稳定电渗流。
采用电渗流构成了一种优选的实施例,因为,对于电渗流,根据一组程序通过控制电压可以细微地快速地且正确地控制流量,由此使它能够精确地控制在分析盒1中的反应和分离。
对于形成电渗流的电源,可以使用高压电源装置(例如,ModelHCZE-30PNO,25,Matsusada Precision,可以施加高达30千伏的电压),这就能够从计算机的外部通过接口板(例如,DAQCard-1200,CB-50Connector Block,由National Instrument Co.,Ltd.制造)控制这些。例如应用NI-DAQ Drive Software(LabVIEW)等可以形成电压施加时序的程序等。
为形成电泳和电渗流来输送液体,需要提供金属针形电极、印有导电墨的电极或金属眼孔插入电极并使电极接触槽的部分和盖板部分130,或接触位于槽的某些中点或端部上的容器(以存储试剂、试样、缓冲剂、废液等)。
在插入金属针的情况下,应用适当的支撑器等将针固定在入口和出口孔中,该针由铂、铜等制成,其直径为0.1到1毫米,并且足够长以到达平面部件100的槽的附近。
在印有导电墨的电极中,将包含金、铜、镍、碳黑、石墨等细微颗粒的墨印在或淀积在上文所描述的孔的内壁的整个表面或一部分表面上以到达平面部件100的槽的附近的深度。此外,在真空淀积和溅射涂喷的情况下,将金或铂类似地印在或淀积在上文所描述的孔的内壁的整个表面或一部分表面上以到达平面部件100的槽的附近的深度。这时,如果上文所述的孔逐渐变细,则可以在内壁上形成电极而不使平面部件100倾斜。
在金属眼孔(带有凸缘的圆柱)的情况下,使用这样的电极,该电极具有使它能够粘接到通孔的内壁的直径和到达平面部件100的槽的附近的长度。对它的材料没有特别的限制,但要求能够防止在电极上的反应,镀铂的黄铜、铜、镍等都比较可取。上文所述的眼孔的“凸缘”具有增强在所述的眼孔和在平面部件100上的导线之间的导电性的作用。
此外,除了上述电极以外,应用导电墨、真空蒸发镀覆以及溅射涂喷可以形成连接在其中安装有分析盒1的分析装置中的电极电源端子的电极和在这些电极之间的引线。此外,通过如下的方式可以形成它们连接薄板比如铜板,然后通过蚀刻形成引线构图,并将经构图的铜箔等转印或连接到在平面部件100上。在任何情况下,选择材料或尺寸以降低在施加高压时所产生的热量,以便不影响电泳。
(流量的描述)为形成主要用于混合和稀释试样和试剂的反应道部分,可以采用一个反应道连接另一反应道的形式以及在一个点上一个反应道连接许多反应道的形式。通过将一个反应道连接另一反应道或将许多反应道连接到一个反应道,可以实施混合操作和稀释操作。
此外,这时,通过在每个反应道中的流量,可以以不同的比率实施混合和稀释。对于所实施的混合和稀释的比率,在通过泵输送液体的情况下可以机械地改变在每个连接反应道中的流量,以及通过改变横截面的尺寸和每个反应道的长度、通过改变施加给每个反应道的电压的过程以及在应用电渗流输送液体的情况下通过表面处理改变在每个连接反应道毛细管的内表面的电贺状态都可以改变在每个连接反应道中的流量。在通过气压输送液体的情况下,可取的是,考虑施加每个容器的压力的差值和液体的粘度等,确定与横截面积相关的压力损失和反应道的长度以设计反应道。
在生物化学检查项目中如果执行检测不涉及在反应之后从试剂中分离试样,则可以应用相同的反应道连续地实施从混合到反应到检测的操作而不测量固定量的试样和不进行试剂分离。通常,如果能够检测要检测的成分而例如在吸收波长方面不会受到其它的污染物的干扰,或者在氧化了在试样中的羟基的情况下如果改变了要检测的物质并应用分光光度计来检测所得的羰基,则可以应用相同的反应道来执行从以预定的流量比率进行混合、反应以及检测的操作而不执行分离的操作。
在类似于在其中通过流量的比率确定混合比率来实施反应的这类方法中,不需要较长时间地连续地进行混合和反应。例如,如果混合要求10秒钟,则最少花10秒钟(通常,稍微更长,大约20秒钟)来融合试样和试剂,通过该槽使试样和试剂的混合物运动长达足够完成反应的时间,此后最少花10秒钟来溶合该混合物和另一种试剂。然后,通过该槽使试样和试剂的混合物运动长达足够完成反应的时间,随后进行检测。
(检测方法的描述)如果直接测定总胆固醇、甘油三酸脂、胆红素等的数量,则仅测量在检测反应完成之后的反应产物。仅在所谓的结束点进行测量,因此最少仅进行一次检测。
在另一方面,当测量在试样的酶比如在血液中的GOT、GPT、γGPT的活性等时,仅进行一次检测是可接受的,但为了提高精度(比率测定)可取的是进行多次测量(检测)。
在这种情况下,仅在最后的反应溶液所流经的反应道中的许多点上实施检测,即在距离溶液与最后混合的试剂结合的点不同的距离(即,不同的时间)的许多点上实施检测。为此,需要在该检测装置中提供许多检测系统和将许多检测系统放置在最后反应溶液的反应道上。可替换的是,如果仅仅应用一个检测系统,检测(光学)装置或分析盒1需要移动。
在本实施例的分析盒1中,在试样分离并与其它的试剂反应之后,在已经分离和反应的反应道的下游以不同的方法检测检测目标。
对于检测方法,可以使用如下的检测方法光热转换检测法(例如,Analysis No.4280-284(1997)),光学检测法比如荧光测定法、吸光测定法和化学发光法、应用检测电极的电化学检测法、通过改变电阻值测量血细胞数量的方法、通过散射测定血细胞的数量的方法、通过计算免疫测定的免疫学检测方法等。
对于化学发光法和荧光测定法,在有催化剂比如氧化剂情况下将检测目标变成受激励的化合物,检测作为光释放出的能量,该能量是当化合物从这种状态变化到基态时所产生的(在荧光测定法的情况下,在受激励的化合物将能量传递到共存的能量接受者之后能量接受者从受激励的状态改变到基态时产生的能量)。在另一方面,对于吸光测定法,在包含检测目标的溶液中发出光以测量所发射的光的强度,测定所发射的光强度与入射光强度的比率。就灵敏度而言,一般地说,吸收测定法、荧光测定法和化学发光法的灵敏度依次递增。
对于主要的化学发光反应,自从古代已经公知了通过鲁米诺(Luminol)、Lucigenon等的方法。化学发光反应的优点在于能够快速地且高灵敏度地实施检测,并且检测装置相对低廉,因为检测不需要光源等。然而,它具有的缺点是发光衰减得非常快,试剂不稳定,本底较高等。荧光测定法也具有自从古代就已经公知的优点,但检测装置要求激励光源、分离激励光和荧光的滤光器等。
应用发光现象的这些方法都具有的缺点是在检测非常少量的试样的过程中光接收效率并不高,因为所发射的光在所有的方向上发散,在荧光测定法中所发射的荧光较低,等。对于吸光测定法,应该增加光波长以获得较高的精度的检测结果,因为在原理上检测在入射光和发射光之间的比率。
然而,对于具有大约1到1000微米的宽度和深度的毛细管,在从分析盒1的平板表面的前到后的方向上的光学长度(不需要与分析盒1的平面成直角),即在相对于液流倾斜的方向上的光学长度,可以不比槽的深度长许多。如果试样的浓度足够高,即使在光学长度几乎与槽的深度一样长也是可以是(垂直于分析盒1的平板表面的光学路径),但如果浓度较低,则它很难实施检测。即使浓度较低,也可以实施检测,因为通过在液体流动的方向上形成光路径(在分析盒1的平板表面上的光路)可以获得大约1到10毫米的光距,但它具有的缺点是检测单元的结构复杂。
对于电化学方法,应用利用特定物质的氧化还原电位的电极比如葡萄糖电极。
还可以应用热透镜方法(光热转换检测方法中的一种)作为本发明的检测方法,在该热透镜方法中应用激励光激励在液体中的试样以形成所谓的热透镜,应用检测光测量在热透镜中的变化(例如,日本专利公开No.60-174933A,A.C.Boccara等人,Appl.Lett.36,130,1980,J.LiquidChromatography 12,2575-2585(1989),日本专利公开No.10-142177A(Molecule Biophotonics),日本专利公开No.4-369467A(YokogawaElectric Corp.),Analysis No.4,280-284,1997,M.Harada等人,Anal.Chem.Vol.65,2938-2940,1993,Kawanishi等人,Japan AnalyticalChemistry Society No.44 Aannual Conference Abstracts,p119,1995,等)。
现在描述应用热透镜的检测方法的原理,基于光热转换现象形成该热透镜。将具有通过在溶液中所溶解的测量目标所吸收的波长的光施加到所测量溶液中。然后,通过激励光激励测量目标以产生热量(光热转换效应)。在这时,重要的是选择激励光波长以使这种激励光除了测量目标以外不被污染物吸收。
将所产生的热量传输到在应用激励光辐射的部分附近的溶剂中以使密度产生局部变化,并扩展折射率的变化。因为这个原因,以激励光辐射的部分看起来好象在吸收激励光的物质出现的情况下在其中形成了凹透镜。
将具有不同于激励光的波长的波长的探测光施加到看似在其中形成了凹透镜的部分中。因为通过该热透镜折射了该探测光,所以在形成热透镜时通过捕获探测光的光接收元件所捕获的探测光量减少。根据测量目标的浓度改变光热转换效应的水平,因此,通过测量上述光量的减少水平可以对测量目标进行量化。实际上,为改善S/N比,对激励光进行斩波,通常应用锁定放大器检测与其频率同步的探测光量的变化。
对于具有大约1到1000微米的宽度和深度的毛细管,在从分析盒1的平板表面的前到后的方向上的光距(不需要与分析盒1的平面成直角),即在相对于液体垂直或倾斜的方向上的光学长度,可以不比槽的深度长许多,但如果应用光热转换检测方法,则即使应用这种等级的光学长度仍然可以以足够高的灵敏度检测测量目标。
如果采用光热转换检测方法,则不要求形成较长的光距的复杂的反应道结构,由此使得能够低廉地制造分析盒1,因此这种方法比较可取。此外,应用带有低廉且简单的光学系统比如半导体激光器和光电二极管的组合可以实施检测,这比较可取。
对于应用光热转换检测方法的检测装置,要求一种激励光源,该激励光源具有由检测目标所吸收的波长并且能够提供足够形成热透镜的强度的输出。对于激励光源,通过棱镜从氙灯等中获取具有所需波长的光,或者应用具有能够激励检测目标的波长的激光。
对于激光,可以使用氦-氖激光、氩激光、二氧化碳激光、钇铝石榴石(YAG)激光器等,但如果使用半导体激光,则检测装置可以小型化,因此这种激光适合用于POC分析等。需要聚光透镜以使激励光和探测光都聚焦在毛细管反应道的附近。
通过光电二极管、CCD摄像仪和光电倍增管感测探测光的变化。此外,光电二极管适合于使检测装置的小型化。
在另一方面,通过断续器等将激励光变换为大约1到10毫秒的脉冲光,通过应用断续器调谐的锁定放大器等仅检测在探测光中的变化。应用单一功能的半导体元件等可以简化锁定放大器。此外,为将激励光改变成脉冲光,可以电地调制半导体激光。
此外,在检测探测光时,通常应用锁定放大器,但还可以采用这样的装置,该装置应用屏蔽遮板屏蔽在泵激光和探测光的光轴附近的光束以应用在日本专利公开No.9-229883中公开的暗视场型光热转换光谱分析装置的方法来仅检测由热透镜所发射探测光。可替换的是,可以应用具有能够固定激励光的脉冲的功能的LSI替换该装置。
对检测目标并没有限制,只要它吸收激励光即可,但检测目标应该与在试样中的其它的物质分离,特别是吸收激励光的物质、吸收探测光的物质或具有实施光热转换检测之前具有探测光的波长的荧光的物质。对于吸收激励光的等级,在灵敏度方面比较可取的是克分子吸收率大约在从1000到100,000的范围内。
通过应用带有检测目标的酶作为基片相结合的反应,将不吸收或吸收很少激励光的检测目标转换到要测量的吸收激励光的物质(可见光色素)中。可替换的是,应用检测目标的抗体,将抗体或继发性抗体标记以吸收激励光的物质或通过反应生产吸收激励光的物质的酶,从而测量直接产生的或作为酶反应结果产生的吸收激励光的物质。
例如,在将生物材料作为检测目标检测的情况下,通过结合应用检测目标作为基片的酶反应,通过过氧化氢将该材料最终转换为如下的物质(Aoyama,N.Clinical Examination,411014(1997))。
即,这些物质是这样的吸收激励光的物质,这些吸收激光的物质是如下的冷凝物4-氨基安替比林带有N-乙基-N-(3-甲基苯基)-N′-乙酰基乙二胺(EMAE)、N-乙基-N-(3-甲基苯基)-N′-丁二酰乙二胺(EMSE)、N-乙基-N-(3-磺基丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAPS)、N-(3-磺基丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(HDAPS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(DAOS)、N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(HDAOS)、N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3,5-二甲氧基苯胺(HSDA)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3-甲基苯胺(TOPS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3-甲基苯胺(TOOS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3,5-二甲基苯胺(MAPS)、N-乙基-N-(2-羟基-3-磺基丙基)-3,5-二甲基苯胺(MAOS)、N、N-二(4-磺基丁基)-3,5-二甲基苯胺(MADB)、N、N-二(4-磺基丁基)-3,5-二甲氧基苯胺(DADB)等,或者吸收激励光的物质比如二{4-[N-3′-磺基-n-丙基-N-乙基]氨基-2,6-二甲基苯基}甲烷(二-MAPS-C2)、二{4-[N-3′-磺基-n-丙基-N-丙基]氨基-2,6-二甲基苯基}甲烷(二-MAPS-C2)、二{4-[N-3′-磺基-n-丙基-N-丁基]氨基-2,6-二甲基苯基}甲烷(二-MAPS-C4)。
现在应用在附图9中所示的概念性视图描述本发明的分析盒2和液体输送控制装置3。然而,为简化解释没有示出某些部件。
分析盒2包括如下的部件。即,它们是在低部表面上具有槽的平面部件741、连接到平面部件741的低部表面的盖板(未示)、用于血浆、全血液等的试样存储容器710、试样稀释剂存储容器709、试样测量导管711、试样溶解液存储容器707、稀释和混合导管712、用于测量项目1(例如总胆固醇)的第一试剂存储容器704、用于测量项目1的第二试剂存储容器703、用于测量项目2(葡萄糖)的第一试剂存储容器706、用于测量项目2的第二试剂存储容器705、废液存储容器701、702和708以及在容器之间连通的毛细管(以实线示出)。
此外,液体输送控制装置3包括如下的部件。即,它们是连接到容器的连接器721到727、三通阀731到737、气压泵751和连接上述相应的部件的管(以实线示出)。
容器701到709和稀释和混合容器712每个都包括平面部件741的通孔、连接到平面部件741的低部表面的盖板(未示)和连接到平面部件的上部表面的憎水排气膜,以预定的体积形成这些部件。以干燥的形式将预定量的非液体试剂(未示)固定到在每个试剂存储容器703到706中。
以试剂溶解液(测量项目1和2的公共缓冲剂,表面活性剂的水溶液等)填充试剂溶解液存储容器707。通过在附图3中所示的系统从在其中封装有试剂溶解液的部分包装中以溶液填充该容器,该系统的机构既没有描述也没有在附图9中示出。
类似地,从在其中封装有试样稀释剂的部分包装中以试样稀释剂(在其中加入表面活性剂的缓冲剂或与试剂溶解试剂具有几乎相同的成分的缓冲剂)填充试样稀释剂存储容器709。通过通孔形成试样存储容器710,从分析盒2的外部将血浆引入到该通孔中(可以通过血浆分离膜加入全血液)。
试样测量导管711不是一种通孔(它可以是一种通孔,但不是优选的,就消除死空间而言它不是一种通孔),而是这样的一种槽在深度方面与其它的反应道相同但具有更大的宽度。此外,形成该容器以使延伸到连接到废液存储容器708的侧面的反应道的接点的面积具有预定的体积,例如0.7微升。如前文所述,通过使标准溶液通过与试样所通过的测量容器和反应道相同的测量容器和反应道可以校正这种体积和反应道的误差。
连接器721至727从憎水排气膜之上连接到容器701至710和稀释和混合容器712。在附图9中,为解释的方便,所示的液体输送装置3与分析盒2分离,但在分析的同时,通过适合的组装等将分析盒2和液体输送控制装置3的连接器721至727彼此连接在一起。
通过管子经过能够对外打开的三通阀731至737将连接器721至727彼此连接到气压泵751。此外,气压泵751可以是真空泵。此外,在下文中当说这些三通阀731至737“关闭”时,意味着在连接器侧的管子关闭。
根据在芯片中记录的信息、在磁带中记录的信息等通过分析装置的主体计算机控制气压泵751和三通阀731至737。
下文按时间顺序描述操作。
三通阀731至737都关闭。然后,三通阀732对外打开,三通阀733打开以将来自气压泵751的压力传递到用于试剂溶解液存储容器707的连接器723(下文中描述为在气压泵751和连接器723之间的部分打开)。因此,将试剂溶解液体输送到每个试剂存储容器703至706中。将在中部反应道和试剂容器703至706中的空气通过排气孔排放到外部,但通过排气孔阻塞试剂溶解液体。换句话说,将固定体积的试剂溶解液体输送到每个试剂容器703至706中。在每个试剂容器703至706中以冻干的形式固定的非液体试剂立即溶解以形成均匀的试剂溶液。然后,三通阀732和733都关闭。
然后,当切换三通阀736以使在气压泵751和连接器726之间的部分打开,三通阀734对外打开,在试样存储容器710中的试样通过试样测量导管711流入废液存储容器708。输送液体足够长的时间以使试样测量导管711填满血浆,此后三通阀734和736都关闭。然后,当在气压泵751和连接器725之间的部分通过三通阀735打开时,三通阀737对外打开,在试样稀释剂存储容器709中的试样稀释剂流入到稀释和混合容器712中同时带走并与在试样测量导管711中的血浆混合。
将在反应道的中部的空气通过排气孔排放到外部,在以混合物(经稀释的试样)填充稀释和混合容器712时,因为通过排气孔阻塞了化合物,所以混合物的流入自动停止。已经设定了稀释和混合容器712与试样测量导管711的体积比,因此可以以预定的稀释比来稀释试样。这样,在稀释和混合容器712中收集以预定的稀释比稀释的试样。然后,所有的三通阀731至737都临时地关闭。
此后,当三通阀732和737都打开以将来自气压泵751的压力传递到连接器722和727时,三通阀731对外打开,稀释的试样和相应的试剂溶液流向废液存储容器701和702。通过槽的压力损失(取决于槽的横截面积和长度和每种液体的粘度)、在每个连接器中的气压等将在这时的流量设定到预定值。
通过这种流量的比率唯一地确定稀释试样和每种试剂溶液的混合比率。换句话说,通过流量的比率确定预定的混合比率。从第一试剂溶液和稀释的试样的汇合处延伸到与第二试剂溶液的汇合处的范围对应于第一试剂溶液的反应时间,而从与第二试剂溶液的汇合处延伸到分析检测点(未示)的范围对应于第二试剂溶液的反应时间。通过给反应道的长度和流量设定预定值可以调整这种反应时间。
对于检测方法并没有特别限制,只要它适合于分析在细微槽中的液体即可,比如热透镜检测法(光热转换检测法)和荧光测定法。对于光学检测法,优选在没有以连接器覆盖的反应道中实施检测。即,在附图9中,优选在第二试剂溶液与稀释的试样和第一试剂溶液的混合物的汇合处的点和废液存储容器之间并在没有以连接器722和721覆盖的反应道中实施检测。
(实验性实例1憎水膜的反水压力的测量)以各种材料的憎水膜的每种平均孔尺寸测量反水压力。对于进行测量的实验室用的装置,在其中设置具有膜800的可拆卸的过滤器支架810的装置连接到内径为5毫米的注射器820的端头。膜800的有效直径是3毫米。此外,在附图10中的附图(b)显示了过滤器支架810和注射器820的端头的剖视图。
为测量反水压力,注射器820首先放置在测试溶液830中,对着刻度盘840推注射器820同时注射器820保持直立,它的端头朝上,由此进行测量。在注射器820中的空气通过膜800推到外部,通过进一步推注射器以逐渐增加压力,测试溶液开始830通过膜800渗透,读取通过刻度盘840所指示的值。对于每项进行十次测量,将测量所得的平均值定义为反水压力值。
对于测试溶液830,对净化水(Japanese Pharmcopeia)和包含有表面活性剂的总胆固醇检测成套试剂溶液(商标名由Wako Pure ChemicalIndustry,Ltd.生产的Cholesterol E-HA Test Wako)进行测量。此外,膜800是一种PTFE膜和一种厚度为150微米的醋酸纤维素膜,对于PTFE膜和醋酸纤维素膜两种膜,在膜800上形成的孔的平均尺寸为0.5微米和0.1微米。在表1中示出了测量的结果。
不论膜800的材料和平均孔尺寸如何,与水相比,包含表面活性剂的试剂溶液的反水压力低得多。此外,平均孔尺寸越小,反水压力越高。
在另一方面,关于材料,PTFE显示,即使在试剂溶液的情况下,在每种平均孔尺寸下具有较高的反水压力,并且作为排气膜具有足够的性能。与这一点相反,醋酸纤维素显示具有较低的反水压力(憎水性不够),因此作为包含表面活性剂的试剂溶液的排气膜不可取。
(表1)
1)单位微米 2)单位克/厘米2(实验2试剂溶解添加剂)应用在商业上可购买的用于血液成分诊断分析的成套试剂来检验试剂的溶解时间。在厚度为2毫米的PMMA板上钻直径为2毫米的许多孔,以如在下文中描述的方式将PTFE多孔膜粘接到PMMA板的一个表面上,在孔中放入2微升的每种试剂溶液,随后使该试剂溶液空气干燥2小时。所使用的成套试剂如下GOT,GPTTA-LN Kainos(Kainos Co.,Ltd.)。
ALPALP Kainos(Kainos Co.,Ltd.)。
γGTPEspaγGTP(N)(Nipro Co.,Ltd.)和Aquaauto KainosγGTP(Kainos Co.,Ltd.)。
t-BilHA Test Wako(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)。
T.CholHA Test Wako(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)。
TGHA Test Wako(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)和Aquaauto KainosγGTP(Kainos Co.,Ltd.)。
LDHLDH Kainos(Kainos Co.,Ltd.)。
GlucDeterminer GL-E(Kyowa Medix Co.,Ltd.)。
TPMicro TP Test Wako(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)和Kainos Auto Series TP(Kainos Co.,Ltd.)。
ALBALB-A(Iternational Reagent Corporation)。
CreDeterminer-L(Kyowa Medix Co.,Ltd.)和L Type Wako(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)。
HDL-CholDeterminer L(Kyowa Medix Co.,Ltd.)。
LDL-CholChole Test LDL(Daiichi Pure Chemicals Co.,Ltd.)。
在显微镜的检验下在每种上述孔中加入2微升的纯水,并静止放置以观察溶解的状态。在几分钟内几乎所有的试剂都均匀地溶解了,但No.1的葡萄糖试剂溶液(Determiner GL-E)等没有完全溶解,剩下少量不可溶解的物质,或者虽然它们溶解了但观察到它们的非均匀的浓度。
然后,在No.1的葡萄糖试剂溶液(Determiner GL-E)中加入聚乙二醇PEG 6000以使浓度为1.8mg/100ml,并以如上文所描述的相同的方式进行注射、空气干燥和这些物质的再溶解的操作。然而,再次剩下不可溶解的物质。在No.1的试剂溶液中加入牛白蛋白以使浓度为2.1mg/100ml,但得到了类似的结果。
然而,当在No.1的试剂溶液中加入甘油以使浓度为0.1%和10%并以如上文所描述的相同的方式进行注射、空气干燥和再溶解的操作时,在任何浓度下在几分钟内均匀地溶解了No.1的试剂溶液。
(实例1)下文将描述一个实例,在该实例中应用在其中封装的两种总胆固醇检测成套试剂(商标名由Wako Pure Chemical Industry,Ltd.生产的Cholesterol E-HA Test Wako)、试剂溶解液和稀释剂的分析盒实施在血清种的总胆固醇的定量分析,并应用标准的血清(Kyowa Medix Co.,Ltd.制造的Determiner for Measurement of Standard Serum Lipid)作为校正溶液以校正分析的结果。此外,对于输送液体的方法,使用通过施加电压应用电渗流的方法。
下文将参考附图4描述所使用的分析盒4和分析操作。附图11所示为平面部件900的反应道模型,附图12所示为附图11的平面部件900的背面(对着没有槽的表面)。以及,附图13所示为沿着附图12的a-a’线剖的平面部件900的试剂存储容器910的部分剖视图,示出了每个容器的结构的实例。因此,其它的容器具有几乎相同的结构。
以基于丙烯的双面胶带(由Nitto Denko Co.,Ltd.生产的MC2030)通过将由厚度为0.3毫米的PMMA制成的盖板930连接到具有槽的平面部件900制造分析盒4。此外,平面部件900是由PMMA树脂通过注塑成型而制成的厚度为2毫米的平面部件。
槽a至m在宽度和深度上都是50微米,测量导管A的直径为2毫米,深50微米。此外,容器901至912每个都包括直径为2毫米的通孔。
在容器901至912的相应的开口913至924中,开口914、916、918、919和921至924都以PTFE多孔膜940覆盖,PTFE多孔膜构成了排气孔。应用由Advantec Toyo Co.,Ltd.生产的孔尺寸为0.1微米的PTFE多孔膜(产品序号T010A047A)作为PTFE多孔膜940,应用双面胶带(由Nitto Denko Co.,Ltd.生产的硅橡胶粘接用的双面胶带No.5302A)将多孔膜粘接到平面部件900。
此外,连接器960连接到在上文所描述的排气孔的周边上的连接器固定架962。在连接器固定架962上提供的O-环963在连接器960和连接器固定架962之间,由此连接器960与架之间气密地保持恒定。三通阀(未示)通过管子961连接到每个连接器960。此外,通过管子(未示)每个三通阀都连接到压力泵(未示)。
此外,如在附图12和13中所示,因为通过电渗流输送液体,所以还通过导电膏的丝网印刷形成施加电压的引线970。通过通孔印刷还将引线970印刷在试剂存储容器910的内壁上。通孔印刷是最近发展的一种用于在多层电路板的背面和前面之间提供导电性的一种印刷工艺,本实施例的平面部件900也要求这种技术。
通过将总胆固醇检测成套试剂A和B干燥成固体所获得的物质950被固定在试剂存储容器910和911的PTFE多孔膜膜940中。对于将固体试剂950固定在PTFE多孔膜膜940中的方法,采用如下的一种方法,在该方法中通过不中止的(dispausing)装置(例如由BioDot Co.,Ltd.生产的Pixsys3000)将在适合量的溶剂中溶解的试剂的适合的溶液剂量滴定到PTFE多孔膜膜940上并干燥。制备试剂溶液使其浓度符合总胆固醇检测设备中所附的规程,但更为可取的是,将该浓度乘以2至3的系数以减少液体的剂量。
将在其中封装有用于稀释试样并校正溶液(例如,0.1wt%的Triton(三硝基甲苯)X-100溶液或含0.1wt%的Triton X-100磷酸缓冲液PBS的溶液)的大约100微升的缓冲剂的枕形包装(未示)插入到容器901中,将在其中封装有标准的血清作为校正溶液的枕形包装(未示)插入到容器903中。
此外,将在其中封装有用于溶解固体试剂950的大约100微升的试剂的枕形包装(未示)插入到容器908中。在分析时,通过安装在其中上安装有分析盒4的分析装置中的活塞(未示)使上述枕形包装破裂以将所包含的液体流入到容器902,904和909中。
将用于分离试样的血细胞的过滤器(未示)(由Whatman Co.,td.生产的GF-D,大约200毫米长和5毫米宽)连接到容器905上。在分析时,将所采集的试样滴定到容器905中,通过压力泵挤压容器905,由此在滤去血细胞之后的血浆流入到测量导管A中。
下文描述分析过程。
1)采样从目标中采集50微升的试样(血液)并滴定到容器905中。
2)分析盒4的设置将分析盒4安装在具有执行检测装置和分析盒4的各种操作的功能的分析装置上。
3)打开容器909的三通阀,而关闭容器902,904至907和910至912的三通阀,应用分析装置的活塞使包含容器908的试剂溶解液体的枕形包装破裂以将试剂溶解液体流入到容器909中。
试剂溶液的制备容器910和911的三通阀都打开,给容器909施加压力以应用试剂溶解液体将容器910和911填满以溶解固态试剂950。同时,通过PTFE多孔膜膜940将在容器910和911中的空气排放,但防止试剂溶解液体从憎水PTFE多孔膜膜940泄漏到外面。结果,将一定量的试剂溶解液体引入到容器中,因此制备了一定浓度的试剂溶液。最后,为了接通电,轻微打开容器912的三通阀,以液体湿润槽m。
5)校正溶液的测量关闭容器909至912的三通阀,而打开容器904的三通阀,应用分析装置的活塞使包含容器903的校正溶液的枕形包装破裂以将校正溶液流入到容器904中。容器906的三通阀打开,给容器904施加压力以将测量导管A填充以校正溶液以测量并收集0.157微升的溶液。将过量的校正溶液存储在废液存储容器906中(在废液存储容器906中,可以提供吸水垫)。
6)校正溶液的稀释关闭容器904和906的三通阀,而打开容器902的三通阀,应用分析装置的活塞使包含容器901的稀释剂(缓冲剂)的枕形包装破裂以将稀释剂流入到容器902中。打开稀释导管907的三通阀,给容器902施加压力以将稀释剂与测量导管A的校正溶液一起流入到体积为6.28微升的稀释导管907中。同时将在稀释导管907中的空气通过PTFE多孔膜膜940排放到外面,但防止校正溶液和稀释剂从憎水PTFE多孔膜膜940中泄漏到外面。
这样,0.157微升的校正溶液和6.126微升的稀释剂引入到稀释导管907中,由此制备了稀释40倍的的稀释的校正溶液。最后,为通电,轻微打开容器909的三通阀,以液体湿润槽f。当通过气压或重力实施液体的输送时,不需要这种操作。
7)输送稀释的校正溶液和试剂溶液、反应以及检测关闭容器902的三通阀,打开容器907和910至912的三通阀,给每个容器施加电压,并应用所得的电渗流输送、混合并使每种溶液反应。调整每种所施加的电压以获得对应于经稀释的校正溶液和两种试剂溶液的预定混合比的流量。通过安装在分析装置中的热透镜检测装置的检测部分D定量地检测反应产物。在完成反应之后的废液存储在废液存储容器912中,而不排放到分析盒4的外部。
8)测量导管A和稀释导管907的清洁容器910至912的三通阀关闭,给容器902施加压力以将稀释剂输送到测量导管A中。由此应用稀释剂清洁测量导管A,在清洁之后将稀释剂存储在稀释剂导管907中。关闭容器902,容器912打开,给稀释导管907施加压力以将在清洁之后的稀释剂输送到容器912中。执行上述操作三次以清洗测量导管A和稀释导管907。
试样的过滤和测量容器902,904,907和909至912的三通阀关闭,容器906的三通阀打开,给容器905施加压力以试样填充测量导管A同时滤去试样的血细胞,测量并收集0.157微升的试样。过量的试样存储在废液存储容器906中。
10)试样的稀释关闭容器905和906的三通阀,而打开稀释导管907的三通阀,给容器902施加压力以将稀释剂与测量导管A的校正溶液一起流入到体积为6.28微升的稀释导管907中。同时将在稀释导管907中的空气通过PTFE多孔膜膜940排放到外面,但防止校正溶液和稀释剂从憎水PTFE多孔膜膜940中泄漏到外面。这样,0.157微升的试样和6.126微升的稀释剂引入到了稀释导管907中,由此制备了稀释40倍的稀释的试样。
11)输送经稀释的试样和试剂溶液、反应和检测关闭容器902的三通阀,打开容器907和910至912的三通阀,给每个容器施加电压,并应用所得的电渗流输送、混合并使每种溶液反应。调整每种所施加的电压以获得对应于经稀释的校正溶液和两种试剂溶液的预定混合比的流量(在经稀释的校正溶液的情况下)。通过安装在分析装置中的热透镜检测装置的检测部分D定量地检测反应产物。在完成反应之后的废液存储在废液存储容器912中,而不排放到分析盒4的外部。
12)计算分析所测量的值基于通过总胆固醇的值为已知的校正溶液的分析所测量的值绘制校正曲线,由此从通过分析试样中所测量的值中确定总胆固醇值。至于检测方法,可以采用在由本发明人所提交的国际专利公开WO/64846中所公开的方法等方法。作为本实例的结果,总胆固醇的浓度是98mg/dl。在另一方面,作为直接通过“手工方法”分析试样的结果,该浓度为104mg/dl,这种手工方法通常应用在临床实验中。
(实例2)现在描述应用与在实例1中的分析盒相同的分析盒实施的对在血清中的总胆固醇的定量分析的另一实例。然而,在本实例中,应用气压方法作为输送液体的方法。
至于分析盒5,除了没有提供电极和引线以外,应用与附图11,12和13(实例1)中所使用的分析盒相同的分析盒,因此将应用附图11,12和13描述本实例。此外,各种操作和过程也几乎与实例1中的操作和过程相同,因此下文中仅描述相对于实例1不同的分析过程。
至3)该过程与实例的过程相同。
4)试剂溶液的制备该过程与实例的过程相同,但不实施湿润槽m的操作。
试样的过滤和测量该过程与实例1的过程相同。
试样的稀释该过程与实例的过程相同,但不实施湿润槽f的操作。
7)液体的输送、反应和检测关闭容器902的三通阀,打开容器912的三通阀,给容器907,910和911的三通阀施加预定的气压以输送、以预定的比率混合并使该液体反应。通过施加压力调整每种混合比。通过安装在分析装置中安装的热透镜检测装置的检测部分D定量地检测反应产物。在完成反应之后的废液存储在废液存储容器912中,而不排放到分析盒5的外部。此外,在废液存储容器912中可以提供吸水垫。
(实例3)下文详细地描述制造如上文所描述的分析盒4的方法和溶解在分析盒4中的试剂的方法。
平面部件900的描述实施应用PMMA树脂的注入成型以形成构成分析盒4的平面部件900。这种平面部件900厚2毫米,具有如附图1所示的槽的模型。槽a至m的宽度和深度都为50微米。以及,它包括直径为2毫米深度为50微米的凹井,该凹井构成了测量导管A。此外,它还具有其直径每个都为2毫米的通孔,该通孔构成了容器901至912。
2)挤压排气膜应用外径4毫米内径3毫米(宽1毫米)的环状模具,挤压PTFE多孔膜膜940以去除所挤压部分的多孔性。根据在平面部件900中的通孔(容器901至912)的位置实施挤压以使通过挤压去除了多孔性的部分包围着每个通孔。至于挤压条件,温度为20℃和压力为176兆帕。
被挤压的部分是非气体可渗透部分,因此在PTFE多孔膜膜940中,气体部分横向地通过。
此外,对于PTFE多孔膜膜940,应用由Advantec Toyo Co.,Ltd.生产的孔尺寸为0.1微米的PTFE(产品编号T010A047A)。
3)排气膜的粘接应用双面胶带将如上所描述的受挤压的PTFE多孔膜膜940粘接到平面部件900上。对于双面胶带,可以使用由Nitto Denko Co.,Ltd.生产的硅橡胶粘接用的双面胶带No.5302A。然而,在与平面部件900的每个通孔相对应的双面胶带上的位置上形成直径为2毫米的圆形孔。
4)试剂溶液的分配将试剂溶液分配到在其上粘接有排气膜的平面部件900的容器910和911中。应用由BiboDot Co.,Ltd.制造的的分配装置Pixsys3000,从平面部件900的侧面将试剂溶液点在PTFE多孔膜膜940上。此外,在以试剂溶解液体填充每个容器时设定试剂溶液的浓度和注入量以使在试剂溶解液体中的试剂浓度是预定的浓度。
干燥试剂溶液在其中分配有试剂溶液的平面部件900静立大约2小时和30%RH,由此使水汽化以使溶液干燥以将试剂固定在PTFE多孔膜膜940上。如果在减少的压力下干燥溶液,可以在大约10分钟内干燥它,但要求谨慎以防止碰撞试剂溶液。
6)安装部分包装制备在其中封装用于溶解每种试剂的大约10微升的试剂溶解液的部分包装,并安装在平面部件900的容器908的位置中。对于试剂溶解液,使用通过将TritonX100以1wt%的浓度溶解在蒸馏水中所获得的溶液。
7)盖板930的粘接将厚度为300微米的由PMMA制成的盖板930粘接到如上文所描述进行处理的平面部件900以完成分析盒4。应用基于丙烯的双面胶带(由Nitto Denko Co.,Ltd.生产的MC2030)将盖板930和平面部件900粘接在一起。
此外,制造能够分析许多项目的分析盒的过程与前述的过程相同(参见附图7)。应用上述分配装置(Pixsys3000)甚至可以一次注射大量的试剂,生产比较有效率。
8)稀释剂的输送和试剂溶解将分析盒4安装在具有活塞的分析装置上以挤压部分包装,给排气孔施加压力的连接器连接到容器909。应用上文所描述的活塞挤压容器908的部分包装以使试剂溶解液流入到试剂溶解液滴定容器909中。随后应用连接器挤压容器909的排气孔以将试剂溶解液体输送到容器910和911中。然后,清除在容器910和911中的空气,以试剂溶解液体填充容器910和911以溶解在容器910和911的试剂,由此制备了预定的浓度的试剂溶液。
(实例4)参考附图14和15详细地描述这样的实例,在该实例中给包围容器的开口的排气膜的部分施加压力,由此防止空气在横向方向上从排气膜中通过,从而以较高的精度控制在分析盒中的液体的输送。
有PMMA制成的厚度为2毫米的平面部件1000通过注模成型形成。这种平面部件1000具有三个通孔,每个通孔的直径为2毫米,这些通孔通过宽度为100微米深度为50微米的槽101彼此连通。
将厚度为0.3毫米的由PMMA制成的盖板1003粘接到具有槽1001的平面部件1000的表面上。此外,应用双面胶带(由Nitto Denko Co.,Ltd.生产的No.5302A)将排气膜1002连接到另一表面。然后,将重要的连接器104连接到平面部件1000的上述其它表面以覆盖由上述通孔所构成的容器A、B和C的开口以制备分析盒。
对于排气膜1002,应用孔尺寸为0.1微米的PTFE多孔膜(由AdvantecToyo Co.,Ltd.生产的,产品序号T010A047A)。以及,在20℃时在176兆帕的压力下已经挤压包围容器B和C的开口的排气膜1002的环形部分1005,因此消除了环形部分1005的多孔性(参见附图15)。
容器B的阀打开,同时关闭容器C的阀,给在容器A中的TritonX100的1%的水溶液1006(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)施加压力,由此从容器A将水溶液1006输送到容器B。因为已经去除了包围容器B和C的开口的排气膜1002的环形部分1005的多孔性,所以空气不能在横向上从排气膜1002中通过。因此,空气不能通过膜1002从容器C的开口中泄漏到容器B的连接器104。结果,容器B填充了水溶液1006而没有水溶液1006泄漏到容器C中(参见附图14)。此外,在附图14中,通过箭头示出了空气的流动。
(比较实例)以如上文所描述的实例4相同的方式制备分析盒。但是没有挤压排气膜1002,因此空气可以在排气膜1002中在横向方向上通过。
打开容器B的阀,而关闭容器C的阀,给在容器A中的TritonX100的1%的水溶液1006(Wako Pure Chemical Industry,Ltd.)施加压力,由此从容器A将水溶液1006输送到容器B。因为空气能够在横向上从排气膜1002中通过,所以如箭头所示空气通过排气膜1002从容器C泄漏到容器B的连接器1004。结果,尽管关闭了容器C的阀,水溶液1006还是输送到了容器C中(参见附图16)。
工业实用性如上文所述,如果应用本发明的分析盒,可以在较短的时间内低廉地方便地以非常少量的试样和试剂实施POC分析等。此外,减轻了在分析时分析员要进行的保养和试剂管理。此外,对检测反应几乎没有限制,一次可以实施大量项目的分析。
此外,根据本发明的液体输送控制装置,可以以较高的精度控制在上述分析盒中的液体比如试样和试剂溶液的输送,而且还可以低廉地制造该液体输送控制装置。
权利要求
1.一种分析盒,这种分析盒具有许多容器和用于在这些容器之间连通的毛细管,其特征在于至少一个所说的容器具有通向分析盒的外部的开口,至少一个开口被气体可渗透的/液体不能渗透的排气孔覆盖,而且在该分析盒中还具有在分析中使用的试剂。
2.根据权利要求1所述的分析盒,其特征在于在具有所说的开口的至少一个容器中提供所说的试剂,以所说的排气孔覆盖的所说的开口。
3.根据权利要求1或2所述的分析盒,其特征在于消除至少所说的一部分试剂的流动性。
4.根据权利要求1至3中任一权利要求所述的分析盒,其特征在于所说的排气孔由具有孔的憎水部件构成。
5.根据权利要求4所述的分析盒,其特征在于带有孔的憎水部件是憎水多孔膜。
6.根据权利要求5所述的分析盒,其特征在于以公共憎水多孔膜覆盖许多容器的所说开口以形成相应的排气孔,对于所说的憎水多孔膜,消除在容器之间的部分的多孔性。
7.根据权利要求6所述的分析盒,其特征在于,对于所说的憎水多孔膜,通过给在容器之间的该部分施加压力来消除该部分的多孔性。
8.根据权利要求1-7中任一权利要求所述的分析盒,其特征在于所说的分析盒包括存储液体试样的试样存储容器、存储用于稀释所说的试样的稀释剂的稀释剂存储容器、测量所说的试样的测量容器和使所说的稀释剂与所说的测量试样混合以稀释该测量试样的稀释容器,以及连接所说的毛细管以分别在所说的测量容器和所说的试样存储容器、所说的稀释剂存储容器和所说的稀释容器之间连通。
9.根据权利要求1-7中任一权利要求所述的分析盒,其特征在于所说的分析盒包括存储用于校正分析结果的校正溶液的校正溶液存储容器、存储液体试样的试样存储容器、存储用于稀释所说的校正溶液和所说的试样的稀释剂的稀释剂存储容器、测量所说的校正溶液和所说的试样的测量容器和使所说的测量校正溶液或所说的稀释剂与所说的测量试样混合以稀释该校正溶液或测量试样的稀释容器,以及连接所说的毛细管以分别在所说的测量容器和所说的校正溶液存储容器、所说的试样存储容器、所说的稀释剂存储容器和所说的稀释容器之间连通。
10.一种制造根据权利要求1-9中任一权利要求所述的分析盒的方法,其特征在于包括在对应于平面部件的所说的容器的位置上形成通孔并在对于该平面部件的一个平板面的所说的毛细管的位置上形成槽的平板处理步骤;以所说的排气孔覆盖没有所说的槽的所说的平面部件的平板面的排气孔形成步骤;从具有所说的槽的所说的平面部件的平板面上将所说的试剂引入到与用于存储所说的试剂的试剂存储容器对应的所说的通孔中的试剂引入步骤;以及以盖板覆盖具有所说的槽的所说的平面部件的平板面以形成所说的容器和所说的毛细管的覆盖步骤。
11.一种制造根据权利要求4或5所述的分析盒的方法,其特征在于包括在对应于平面部件的所说的容器的位置上形成通孔并在对于该平面部件的一个平板面的所说的毛细管的位置上形成槽的平板处理步骤;以具有孔的所说的憎水部件或所说的憎水多孔膜覆盖没有所说的槽的所说的平面部件的平板面的排气孔形成步骤;从具有所说的槽的所说的平面部件的平板面上将上所说的试剂引入到与用于存储所说的试剂的试剂存储容器对应的所说的通孔中的试剂引入步骤;以及以盖板覆盖具有所说的槽的所说的平面部件的平板面以形成所说的容器和所说的毛细管的覆盖步骤。
12.一种制造根据权利要求3所述的分析盒的方法,其特征在于在将所说的试剂溶液存储在具有所说的排气孔的所说的的容器中之后,通过使所说的试剂溶液干燥来使其失去流动性。
13.一种制造根据权利要求12所述的分析盒的方法,其特征在于包括在对应于平面部件的所说的容器的位置上形成通孔并在对于该平面部件的一个平板面的所说的毛细管的位置上形成槽的平板处理步骤;以具有孔的所说的憎水部件或所说的憎水多孔膜覆盖没有所说的槽的所说的平面部件的平板面的排气孔形成步骤;从具有所说的槽的所说的平面部件的平板面上将上所说的试剂引入到与用于存储所说的试剂的试剂存储容器对应的所说的通孔中并通过干燥该试剂溶液以使其失去流动性的试剂引入步骤;以及以盖板覆盖具有所说的槽的所说的平面部件的平板面以形成所说的容器和所说的毛细管的覆盖步骤。
14.一种液体输送控制装置,该液体输送控制装置连接到根据 1至9中任一权利要求的分析盒并控制通过毛细管在所说的任何容器之间液体的输送,其特征在于允许或调节气体通过所说的排气孔的进入/排出,由此通过所说的毛细管使所说的液体流进所说的容器或从所说的容器流出。
15.根据权利要求14所述的液体输送控制装置,其特征在于包括设置在与在其间有所说的排气孔的所说的容器相对的位置中的阀,通过该阀允许或调节气体通过所说的排气孔的进入/排出。
16.根据权利要求14所述的液体输送控制装置,其特征在于包括放置在与在其间具有所说的排气孔的所说的容器相对的位置中并连接到所说的排气孔以便覆盖所说的开口的连接器、耦合到所说的连接器的泵和放置在所说的连接器和所说的泵之间的阀,其中通过所说的泵或所说的阀中至少一个允许或调节气体通过所说的排气孔的进入/排出。
17.根据权利要求14至16中任一权利要求所述的液体输送控制装置,其特征在于允许或调节其开口没有以所说的排气孔覆盖的所说的容器的气体的进入/排出,由此控制所说的液体通过所说的毛细管从所说的容器中流出。
18.一种应用根据权利要求3的分析盒分析试样的方法,其特征在于包括在分析之前立即通过所说的毛细管从试剂溶解液存储容器将试剂溶解液体输送到试剂存储容器并溶解所说的非液体试剂以制备试剂溶液的试剂溶解步骤,在该试剂溶解液存储容器中存储有用于溶解所说的非液体试剂的所说的试剂溶解液体,在该试剂存储容器中存储有所说的非液体试剂。
19.根据权利要求18的方法,其特征在于包括应用所说的毛细管使是液体的所说的试样和在所说的试剂存储容器中的所说的试剂溶液一起混合并反应的混合/反应步骤。
20.一种应用根据权利要求8所述的分析盒分析试样的方法,其特征在于包括通过将所说的试样从所说的试样存储容器输送到所说的测量容器中测量所说的试样的试样测量步骤;以及从所说的稀释剂存储容器将所说的稀释剂输送到所说的测量容器中由此将在所说的测量容器中的所说的稀释剂和所说的试样输送到所说的稀释容器中以使所说的试样和所说的稀释剂混合在一起以稀释所说的试样的试样稀释步骤。
21.一种应用根据权利要求9所述的分析盒分析试样的方法,其特征在于包括通过将所说的校正溶液从所说的校正溶液存储容器输送到所说的测量容器中测量所说的校正溶液的校正溶液测量步骤;从所说的稀释剂存储容器将所说的稀释剂输送到所说的测量容器中由此将在所说的测量容器中的所说的稀释剂和所说的校正溶液输送到所说的稀释容器中以使所说的校正溶液和所说的稀释剂混合在一起以稀释所说的校正溶液的校正溶液稀释步骤;使所说的经稀释的校正溶液与所说的试剂反应以获得通过所说的经稀释的校正溶液的分析所测量的值的校正溶液分析步骤;通过将所说的试样从所说的试样存储容器输送到所说的测量容器中测量所说的试样的试样测量步骤;从所说的稀释剂存储容器将所说的稀释剂输送到所说的测量容器中由此将在所说的测量容器中的所说的稀释剂和所说的试样输送到所说的稀释容器中以使所说的试样和所说的稀释剂混合在一起以稀释所说的试样的试样稀释步骤使所说的经稀释的试样与所说的试剂反应以获得通过所说的经稀释的试样的分析所测量的值的试样分析步骤;应用通过所说的校正溶液的分析所测量的值校正通过所说的试样的分析所测量的值的校正步骤。
全文摘要
本发明的分析盒具有许多容器和用于在这些容器之间连通的连接的毛细管。此外,在该分析盒中有用于分析的试剂,该容器具有通向该分析盒的外部的开口,其中以排气孔膜覆盖该开口,每个排气孔膜都由气体可渗透的/液体不能渗透的憎水性的多孔膜组成。该分析盒仅要求少量的试样和试剂,不需保养,并且适合于POC分析等。此外,在该分析盒中在具有排气孔的容器中提供有非液体试剂,因此在进行分析之前立即通过给该容器中注入试剂溶解液能够在该分析盒中制备非常少量的试剂溶液。此外,液体输送控制装置连接到该分析盒,允许或调节气体通过排气孔的进入/排出,由此控制液体通过毛细管在任何容器之间的输送。
文档编号G01N33/49GK1370278SQ00811648
公开日2002年9月18日 申请日期2000年8月11日 优先权日1999年8月11日
发明者北口畅哉, 木口昌 申请人:旭化成株式会社