专利名称：一种用于蛋白质免疫印迹的装置的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及蛋白质免疫印迹技术，尤其涉及一种用于蛋白质免疫印迹的装置。
背景技术：
蛋白质免疫印迹技术(Western blot,WB)是一种在生命科学领域被广泛应用的蛋白质鉴定技术，传统的WB主要由电泳、转印和检测三部分组成，电泳用于将蛋白质按照分子量的大小进行分离，转印则是将前者分离后的蛋白质转移到高分子膜上，检测部分则是利用抗体的特异性识别技术，对转移至高分子膜上的不同的蛋白质进行检测。为了在降低抗体用量的同时提高检测的通量，可行的办法是在转印后的高分子膜上、在与电泳分离方 向相垂直的方向上盖上一个微流通道盖，通过微流通道的限制作用，使得单一泳道中分离的多个蛋白质同时被多个抗体识别、显色。在上述技术的实施中，极为重要的一个方面在于，高分子膜与微流通道盖之间必须具有良好的贴合度，否则，抗体溶液容易从一个通道渗入另外一个通道，造成交叉污染。为了避免这种情况发生，技术人员曾经故意将微流通道片体做不完全固化，利用未固化的片体具有一定黏性的特点，增强其与高分子膜之间的结合强度。但是，这种处理方式必须将微流通道之间的间距做得比较大，以减小污染的风险，进而因为间距的增大使得有限空间内的检测通量降低；此外，这种处理方式需要人为精确地控制固化时间，其可操作性及可重复性都不强，且片体的固化通常在常温下也可以缓慢地进行，因此由此制备的片体，其保质期也是非常有限的。

实用新型内容本实用新型的目的在于针对现有技术中存在的上述问题及需求，提供一种用于蛋白质免疫印迹的装置，其可以有效提高检测效率和准确度。为实现上述目的，本实用新型提供的用于蛋白质免疫印迹的装置具有如下结构一种用于蛋白质免疫印迹的装置，包括反应芯片和芯片夹具，该反应芯片由一片载有待测蛋白质的聚合物膜和一个片体叠置组成，其中该片体的一个表面上设有微流凹槽，该微流凹槽与所述聚合物膜共同形成供抗体流通的微流通道，在该片体的另一个表面上对应于该微流通道的两个端口的位置处分别设有穿孔以形成该微流通道的通道入口和通道出口，该芯片夹具包括相互叠置并被固定在一起的上夹板和下夹板，所述反应芯片被夹紧于所述上夹板和下夹板之间，其中所述上夹板在与所述通道入口和通道出口的对应位置分别设有用于将抗体滴入微流通道的第一通孔和第二通孔。使用上述装置可以增强聚合物膜和片体的贴合紧密度，使得二者之间的封合牢固可靠，抗体在微流通道里流动的过程中不会出现渗漏。同时该封合是可逆的，便于对聚合物膜单独进行后续的各种处理。此外，片体材料的选择首先考虑到了其生物相容性，所用的材料充分固化后(例如聚二甲基硅氧烷、聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯等)，对生物样品没有毒性；此外，片体与高分子膜的贴合、上下夹板的夹合都是在常温常压下进行的，也对生物样品没有任何损伤。同时，此夹具对反应芯片的厚度没有要求，可适应多种厚度，减小了制备微流通道片体的难度。片体上微流凹槽的深度至少为几百微米，当被上下夹板夹持时，凹槽即使有少许形变，也不会完全塌陷下来导致通道堵塞。实践证明，即使是聚二甲基硅氧烷这样的弹性体，也不会发生通道堵塞，对于聚苯乙烯、聚甲基丙烯酸甲酯这样硬质材料而言，其形变就更不明显。本实用新型可以保证在充分夹紧的状态下，微流通道保持畅通。优选地，所述微流凹槽至少为两条从而形成至少两条微流通道。所述上夹板和下夹板设有多个螺孔，螺孔中拧紧有螺丝以将上夹板和下夹板固定在一起。所述螺孔以两两相对的方式平均分布在一个圆周上。优选地，所述聚合物膜为聚偏氟乙烯膜、硝酸纤维素膜或尼龙膜。所述设有微流管道的片体为聚二甲基硅氧烷片体。
本文将结合以下附图对本实用新型的具体实施方式
进行详细说明，其中图I为根据本实用新型的一种用于蛋白质免疫印迹的装置的纵向截面示意图；图2为图I所示装置的俯视示意图，其中的螺栓已被除去以更好地显示该装置的内部结构；图3为图I所示装置中的反应芯片I的示意图。图中所用的附图标记分别为I-反应芯片11-微流通道12-通道入口13-通道出口3-上夹板32-第一通孔33-第二通孔34-螺孔4-下夹板5-螺丝
具体实施方式
参见图1，该用于蛋白质免疫印迹的装置由上夹板3和下夹板4以及夹紧于该上夹板3和下夹板4之间的反应芯片I组成。该上夹板3和下夹板4通过螺丝5得以紧密固定。反应完毕后，将该螺丝5松开即可将上夹板和下夹板分离并取出反应芯片I。参见图3，该反应芯片I由一片载有待测蛋白质的聚合物膜和一片片体叠置组成，其中该片体的一个表面上设有多条微流凹槽，该微流凹槽与所述聚合物膜结合形成供抗体流通的多条微流通道11，在该片体的另一个表面上对应于每条微流通道11的两个端口的位置处分别设有穿孔以形成该微流通道11的通道入口 12和通道出口 13。所述聚合物膜为聚偏氟乙烯膜或硝酸纤维素膜，所述片体可以由聚二甲基硅氧烷制成。所述反应芯片I被夹紧于所述上夹板3和下夹板4之间，如图2所示，所述上夹板3在与所述通道入口 12和通道出口 13的对应位置分别设有用于将抗体滴入微流通道11的第一通孔32和第二通孔33。此外，所述上夹板3和下夹板4的对应位置处设有四个螺孔34，螺孔34中拧紧有螺丝5以将上夹板3和下夹板4固定在一起。所述螺孔34平均分布在一个圆周上。在使用时，将染有分离后的蛋白质的聚合物膜和片体凹槽叠置形成反应芯片I放置于下夹板4上，其然后将上夹板3覆盖于所述反应芯片I上面，并保持上夹板3上的第一通孔32和第二通孔33分别对准反应芯片I上的通道入口 12和通道出口 13。然后将螺丝5拧紧于上夹3板和下夹板4上，以将两者固定并夹紧反应芯片I于中间。组装时，在相对的两个螺孔34处同时拧上螺丝5，从而保证反应芯片I受力均匀。组装完成后，从上夹具3的第一通孔32处向微流通道11内注入抗体，抗体在微流通道11内与载于聚合物膜上的蛋白质进行完所需的反应后，从第二通孔33处被引出或抽出。反应完成后，按照相反的顺序 拆卸夹具。首先拧下螺丝5，使上下夹具分离开，然后用扁头镊子或手将片体与聚合物膜分离开，聚合物膜可以拿去做下一步的各种处理，例如二抗的孵育、免疫荧光染色等。上述过程都在室温下进行，组装与拆卸所需的操作时间都很短，并且可适用于聚偏氟乙烯/聚二甲基硅氧烷(PVDF/PDMS)、硝酸纤维素/聚二甲基硅氧烷(NC/PDMS)、尼龙/聚二甲基硅氧烷(Nylon/PDMS)等组合，适用于蛋白质印迹、核酸印迹等所有常规的生物检测体系。
权利要求1.一种用于蛋白质免疫印迹的装置，包括反应芯片和芯片夹具，其特征在于， 该反应芯片由一片载有待测蛋白质的聚合物膜和一个片体叠置组成，其中该片体的一个表面上设有微流凹槽，该微流凹槽与所述聚合物膜共同形成供抗体流通的微流通道，在该片体的另一个表面上对应于该微流通道的两个端口的位置处分别设有穿孔以形成该微流通道的通道入口和通道出口， 该芯片夹具包括相互叠置并被固定在一起的上夹板和下夹板，所述反应芯片被夹紧于所述上夹板和下夹板之间，其中所述上夹板在与所述通道入口和通道出口的对应位置分别设有用于将抗体滴入微流通道的第一通孔和第二通孔。
2.根据权利要求I所述的用于蛋白质免疫印迹的装置，其特征在于，所述微流凹槽至少为两条从而形成至少两条微流通道。
3.根据权利要求I所述的用于蛋白质免疫印迹的装置，其特征在于，所述上夹板和下 夹板设有多个螺孔，螺孔中拧紧有螺丝以将上夹板和下夹板固定在一起。
4.根据权利要求3所述的用于蛋白质免疫印迹的装置，其特征在于，所述螺孔以两两相对的方式平均分布在一个圆周上。
5.根据权利要求I所述的用于蛋白质免疫印迹的装置，其特征在于，所述聚合物膜为聚偏氟乙烯膜、硝酸纤维素膜或尼龙膜。
6.根据权利要求I所述的用于蛋白质免疫印迹的装置，其特征在于，所述设有微流管道的片体为聚二甲基硅氧烷片体。
专利摘要本实用新型涉及一种用于蛋白质免疫印迹的装置，包括反应芯片和芯片夹具，该反应芯片由一片载有待测蛋白质的聚合物膜和一个片体叠置组成，其中该片体的一个表面上设有微流凹槽，该微流凹槽与所述聚合物膜共同形成供抗体流通的微流通道，在该片体的另一个表面上对应于该微流通道的两个端口的位置处分别设有穿孔以形成该微流通道的通道入口和通道出口，该芯片夹具包括相互叠置并被固定在一起的上夹板和下夹板，所述反应芯片被夹紧于所述上夹板和下夹板之间，其中所述上夹板在与所述通道入口和通道出口的对应位置分别设有用于将抗体滴入微流通道的第一通孔和第二通孔。使用上述装置可以有效防止抗体在微流通道里出现渗漏。
文档编号G01N33/68GK202512120SQ201120570260
公开日2012年10月31日 申请日期2011年12月30日 优先权日2011年12月30日
发明者何沙, 张翼, 蒋兴宇 申请人:国家纳米科学中心