专利名称:一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法
—种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAIc的多通道毛细管电泳检测方法技术领域
本项发明涉及一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法。
背景技术:
目前对糖化血红蛋白的检测一直都存在检测通量低,成本高或者准确度低的情况。
例如免疫法的准确度较差,成本也比较高;离子交换色谱方法准确度很高,但是没有办法实现高通量测试,而且实验成本也很高,普通病人难以接受。本发明旨在建立一套高通量,高速度,能够同时检测多个样品的阵列毛细管电泳方法,以满足糖化血红蛋白检测的要求。
多通道毛细管电泳技术已经成功应用于DNA测序系统,但是将多通道毛细管电泳系统用于糖化血红蛋白ffiAlc指标检测在国内尚无报道;目前国内,已有将单根毛细管电泳方法用于糖化血红蛋白ffiAlc检测的报道,但此方法通量过低,无法满足大量样本检测的要求。本方法将科研工作中使用的多通道毛细管电泳技术与单道毛细管电泳糖化血红蛋白检测技术结合在一起,既解决了糖化血红蛋白ffiAlc检测的难题,又大大提高了检测的通量与速度,满足了检测实验室的要求。发明内容
本发明用于糖化血红蛋白HbAlc相对含量测定高通量及快速测定。本发明使用多根毛细管的阵列作为分离通道可以同时对多个血液样品中的糖化血红蛋白HbAlc进行分析和检测,并自动对结果进行分析,生成报告。
本发明提供一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,使用阵列毛细管和光阵列检测装置同时对多个样品进行糖化血红蛋白 HbAlc检测。
优选的,所述检测方法包括以下步骤
I)将分离缓冲液充入阵列毛细管中的各毛细管中作为分离环境;
2)将各样品同时加入到阵列毛细管中的各毛细管的前端;
3)当样品进入毛细管阵列中的各毛细管前端后,将阵列毛细管的两端更换为分离缓冲液;
4)在毛细管两端施加电压作为分离驱动力;
5)通过检测光源和光阵列检测器对毛细管中的样品进行糖化血红蛋白HbAlc检测;
6)根据步骤5)所得检测数据计算得出各样品中的糖化血红蛋白HbAlc的含量。
更优选的,所述毛细管阵列中毛细管内径20-100微米,有效分离长度10-50厘米。
更优选的,所述毛细管阵列中毛细管的数量为4-48根,所述毛细管为无涂层石英毛细管或内壁有涂层的中性石英毛细管。
更优选的,所述毛细管每根的内径和长度均保持一致。
进一步的,所述4-48根毛细管构成毛细管阵列作为分离通道,可以对4-48个样品同时进样进行电泳分离和检测。
更优选的,所述各毛细管的前部互相平行,末端集合到一处。
更优选的,在步骤I)前,在构成所述阵列毛细管的毛细管内壁制备涂层。
更优选的,所述涂层为聚阳离子涂层和聚阴离子涂层所构成的双层涂层。
更优选的,制备所述双层涂层的方法为先用聚阳离子溶液冲洗毛细管,再用聚阴离子溶液冲洗毛细管。
更优选的,在制备涂层前,使用强酸和/或强碱溶液对阵列毛细管中的毛细管进行处理。
更优选的,所述强酸和/或强碱溶液对阵列毛细管中的毛细管进行处理、聚阳离子和聚阴离子溶液冲洗毛细管、分离缓冲液充入毛细管的过程均通过压力完成,所述强酸和强碱溶液、聚阳离子和聚阴离子溶液、分离缓冲液均从毛细管阵列的末端进入,从前端排出到废液池。
更优选的,所述强酸溶液选自盐酸缓冲液或硝酸缓冲液,所述强酸溶液的浓度为0.01—lmol/L。
更优选的,所述强碱溶液选自氢氧化钠水溶液或氢氧化锂水溶液,所述强碱溶液的浓度为0. 01-lmol/L。
更优选的,所述聚阳离子溶液为含有聚阳离子的水溶液,选自聚凝胺水溶液、聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液、白蛋白水溶液,其浓度为0. OOl-Iwt%。
更优选的,所述聚阴离子溶液为含有聚阴离子的水溶液,选自聚丙烯酸水溶液、聚苯乙烯磺酸钠水溶液、硫酸软骨素水溶液,其浓度为0. 001-lwt%。
由于无涂层的毛细管会将样品吸附到毛细管的内表面,通常不能够分离出糖化血红蛋白HbAlc的峰,从而不会出峰。所以本发明在无涂层毛细管管壁上使用聚阴离子涂层和聚阳离子涂层以达到控制血液样品中的蛋白在毛细管内壁吸附,并加快糖化血红蛋白的出峰速度的目的。本发明所涉及的多通道毛细管电泳系统使用无涂层毛细管组成的毛细管阵列作为分离通道,以达到降低测试成本,同时保持毛细管的较长使用寿命的目的。但本发明所涉及的多通道毛细管电泳系统也可以直接使用内壁有涂层的毛细管阵列作为分离通道(例如可选用聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、聚吡咯烷酮等涂层的毛细管),也可在内壁有涂层的毛细管上再使用聚阴离子涂层或聚阳离子涂层。
更优选的,所述分离缓冲液的pH值为3-5。
更优选的,所述步骤2)中的各样品中含有电渗流标记物。
更优选的,以所述电渗流标记物的出峰时间为基准,得出糖化血红蛋白及非糖化血红蛋白所对应的峰,对峰值进行积分得到样品中糖化血红蛋白的含量。
更优选的,以所述电渗流标记物的出峰时间为基准,得出糖化血红蛋白及非糖化血红蛋白所对应的峰,对糖化血红蛋白及非糖化血红蛋白所对应的峰的峰值进行积分并计算后得到样品中糖化血红蛋白的含量。CN 102539512 A
更优选的,所述计算的公式为糖化血红蛋白(mol% )含量=糖化血红蛋白峰值/ (糖化血红蛋白峰值+非糖化血红蛋白峰值)*100 %。
更优选的,所述步骤3)中电渗流标记物为二甲亚砜;所述二甲亚砜与样品的体积比为 I : 1-30。
更优选的,所述步骤3)中的样品包括血样和溶血剂,所述血样与溶血剂的体积比为I : 1-3,所述溶血剂可以为市场上可买到的商品化溶血剂。
更优选的,所述步骤3)中各样品同时加入到毛细管阵列中的各毛细管的前端的方法为电压方式或压力方式。
更优选的,所述样品的进样量为l-100nL。
更优选的,所述步骤4)中施加电压的方式为将电极插入毛细管两端的分离缓冲液中或直接接在毛细管两端。
更优选的,所述步骤4)中所施加的电压为恒定直流电,且U = 10_30kV。
更优选的,所述步骤5)中的光源是波长为180_600nm的紫外或可见光源。
更优选的,所述紫外或可见光源是卤素灯或LED光源,所述光阵列检测器包括多个光检测器,并且所述光检测器与毛细管一一匹配,所述光阵列检测器为PMT或CCD检测器所组成的光阵列检测器。
更有选的,所述峰值为紫外吸收峰值。
由于毛细管阵列的两端施加了高直流电压(10_30kV),在高直流电压作用下,每根毛细管中的血液蛋白会在电场力作用下开始电泳,但是由于电泳速度差异,糖化血红蛋白 HbAlc会与其他种类蛋白质分开。所述毛细管阵列中毛细管的平行段的尾部设有透明检测窗口,所述有效分离长度为毛细管入口到检测窗口之间的距离。由于各毛细管的有效分离长度均相等,所以各样品的电泳条件基本相同,也就是说各样品中相同组分到达透明检测窗口的时间基本相同。检测光源发出的光信号垂直于检测窗口,并通过检测窗口到达与该检测窗口对应的光检测器,当电渗流标记物、糖化血红蛋白HbAlc和其他种类蛋白通过透明检测窗口的时候,与该检测窗口对应的光阵列检测器中的光检测器会记录下各组分的响应值并将检测数据发送至信号分析单元,信号分析单元将所得数据处理后得出各组分的吸收峰峰值。
图I为本发明原理示意图(以单根毛细管为例)
图2为本发明检测结果示意图(以单根毛细管为例)具体实施方式
本发明所涉及的多通道毛细管电泳系统可使用无涂层毛细管组成的毛细管阵列作为分离通道,以达到降低测试成本,同时保持毛细管的较长使用寿命的目的。所述毛细管阵列包括4-48根弹性石英毛细管(无涂层,内径20-100微米,长度10-50cm),各毛细管的前部互相平行,末端集合到一处。本发明还同时在毛细管内壁形成聚阳离子和聚阴离子涂层,以加快糖化血红蛋白的出峰速度。所述样品中各组分的含量通过紫外/可见光光阵列检测器检测。
本发明原理的原理如图I所示(以单根毛细管为例)。如图I所示本发明原理示意图,包括进样单元、光学检测单元和信号分析单元8,所述进样单元与所述光学检测单元相配合,所述光学检测单元与信号分析单元8电连接。
进一步的,所述光学检测单元包括检测光源7、光阵列检测器3和阵列毛细管束, 所述阵列毛细管束与所述进样单元相配合,检测光源7和光阵列检测器3与所述阵列毛细管束相配合。
进一步的,构成所述阵列毛细管束的毛细管9的内壁上设有聚阳离子涂层和聚阴离子涂层。
进一步的,所述阵列毛细管束由4-48根毛细管9构成。
进一步的,所述构成阵列毛细管束的毛细管9之间相互平行,毛细管9的一端为前端I、另一端为末端2 ;且末端2汇集至一处。
进一步的,所述构成阵列毛细管束的毛细管9上设有透明检测窗口 10,透明检测窗口 10位于毛细管9的平行部分,透明窗口 10的位置与检测光源7相配合。
进一步的,所述构成阵列毛细管束的毛细管9为内径20-100微米。
下面结合具体实施例进一步阐述本发明,应理解,这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的保护范围。
实施例I :
选用10根弹性石英毛细管(内径20微米,长30cm)和金属电极构成毛细管阵列。 在毛细管阵列后部设有透明检测窗口,使用紫外光对毛细管中分离得到的蛋白质组分进行定性和定量检测。
弹性石英毛细管0. lmol/L NaOH水溶液处理后,再先后用聚阳离子(聚二烯丙基二甲基氯化铵,0. 5wt% )和聚阴离子(硫酸软骨素,0. 5wt% )水溶液冲洗毛细管,得到双层涂层。随后将PH = 4的柠檬酸溶液充入毛细管作为分离环境。以上毛细管的各个冲洗、 涂层过程均通过压力完成,并从毛细管阵列的末端进入(出口端,相对于进样口的一端), 从前端排出到废液池,所述NaOH水溶液、聚阳离子水溶液、聚阴离子水溶液和柠檬酸溶液的溶液槽由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
将毛细管阵列的毛细管的入口端一一对应的插入阵列样品槽中,将50nL样品以电压或压力方式同时进入毛细管阵列中毛细管的前端,所述样品的调配体积比为血样 溶血剂二甲亚砜=1:3:3。
将毛细管两端接通为分离缓冲液系统并在毛细管上加10_30kV的恒定直流电压作为分离驱动力,以驱动样品中的各种蛋白以不同速度通过检测窗口位置。所述阵列样品槽和分离缓冲液系统由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
毛细管中流过的各蛋白组分通过紫外光阵列检测器进行检测,形成检测图谱,并记录于软件中。
将二甲亚砜作为电渗流的标记物,其他的各个峰的出峰时间与二甲亚砜作为参考,来确认各峰所代表的蛋白质组分,其检测结果如图2所示(以单根毛细管为例)。将糖化血红蛋白HbAlc及非糖化血红蛋白HbAO的峰值进行积分,得到糖化血红蛋白HbAlc的百分比例。
实施例2
选用4根弹性石英毛细管(内径50微米,长50cm)和金属电极构成毛细管阵列。 在毛细管阵列后部设有透明检测窗口,使用紫外光对毛细管中分离得到的蛋白质组分进行定性和定量检测。
弹性石英毛细管lmol/L KOH水溶液处理后,再先后用聚阳离子(聚凝胺水溶液, Iwt% )和聚阴离子(聚丙烯酸水溶液,0. 001wt% )水溶液冲洗毛细管,得到双层涂层。随后将PH = 5的柠檬酸溶液充入毛细管作为分离环境。以上毛细管的各个冲洗、涂层过程均通过压力完成,并从毛细管阵列的末端进入(出口端,相对于进样口的一端),从前端排出到废液池,所述NaOH水溶液、聚阳离子水溶液、聚阴离子水溶液和柠檬酸溶液的溶液槽由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
将毛细管阵列的毛细管的入口端一一对应的插入阵列样品槽中,将IOOnL样品以电压或压力方式同时进入毛细管阵列中毛细管的前端,所述样品的调配体积比为血样 溶血剂二甲亚砜=I : 9 : 21。
将毛细管两端接通为分离缓冲液系统并在毛细管上加10_30kV的恒定直流电压作为分离驱动力,以驱动样品中的各种蛋白以不同速度通过检测窗口位置。所述阵列样品槽和分离缓冲液系统由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
毛细管中流过的各蛋白组分通过紫外光阵列检测器进行检测,形成检测图谱,并记录于软件中。
将二甲亚砜作为电渗流的标记物,其他的各个峰的出峰时间与二甲亚砜作为参考,来确认各峰所代表的蛋白质组分。将糖化血红蛋白ffiAlc及非糖化血红蛋白HbAO的峰值进行积分,得到糖化血红蛋白ffiAlc的百分比例与实施例I基本相同。
实施例3
选用30根弹性石英毛细管(内径75微米,长IOcm)和金属电极构成毛细管阵列。 在毛细管阵列后部设有透明检测窗口,使用可见光对毛细管中分离得到的蛋白质组分进行定性和定量检测。
弹性石英毛细管0. lmol/L KOH水溶液处理后,再先后用聚阳离子(白蛋白水溶液,0. Iwt% )和聚阴离子(硫酸软骨素,0. 05wt% )水溶液冲洗毛细管,得到双层涂层。随后将PH = 3的柠檬酸溶液充入毛细管作为分离环境。以上毛细管的各个冲洗、涂层过程均通过压力完成,并从毛细管阵列的末端进入(出口端,相对于进样口的一端),从前端排出到废液池,所述NaOH水溶液、聚阳离子水溶液、聚阴离子水溶液和柠檬酸溶液的溶液槽由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
将毛细管阵列的毛细管的入口端一一对应的插入阵列样品槽中,将IOnL样品以电压或压力方式同时进入毛细管阵列中毛细管的前端,所述样品的调配体积比为血样 溶血剂二甲亚砜=I 10 10。
将毛细管两端接通为分离缓冲液系统并在毛细管上加10_30kV的恒定直流电压作为分离驱动力,以驱动样品中的各种蛋白以不同速度通过检测窗口位置。所述阵列样品槽和分离缓冲液系统由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
毛细管中流过的各蛋白组分通过可见光光阵列检测器进行检测,形成检测图谱, 并记录于软件中。
将二甲亚砜作为电渗流的标记物,其他的各个峰的出峰时间与二甲亚砜作为参考,来确认各峰所代表的蛋白质组分。将糖化血红蛋白ffiAlc及非糖化血红蛋白HbAO的峰值进行积分,得到糖化血红蛋白ffiAlc的百分比例与实施例I基本相同。
实施例4
选用48根弹性石英毛细管(内径100微米,长40cm)和金属电极构成毛细管阵列。 在毛细管阵列后部设有透明检测窗口,使用紫外光对毛细管中分离得到的蛋白质组分进行定性和定量检测。
弹性石英毛细管0. 01mol/L NaOH水溶液处理后,再先后用聚阳离子(聚二烯丙基二甲基氯化铵,0. 001wt% )和聚阴离子(聚苯乙烯磺酸钠水溶液,Iwt% )水溶液冲洗毛细管,得到双层涂层。随后将PH =5的柠檬酸溶液充入毛细管作为分离环境。以上毛细管的各个冲洗、涂层过程均通过压力完成,并从毛细管阵列的末端进入(出口端,相对于进样口的一端),从前端排出到废液池,所述NaOH水溶液、聚阳离子水溶液、聚阴离子水溶液和柠檬酸溶液的溶液槽由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
将毛细管阵列的毛细管的入口端一一对应的插入阵列样品槽中,将2nL样品以电压或压力方式同时进入毛细管阵列中毛细管的前端,所述样品的调配体积比为血样溶血剂二甲亚砜=1:3:7。
将毛细管两端接通为分离缓冲液系统并在毛细管上加10_30kV的恒定直流电压作为分离驱动力,以驱动样品中的各种蛋白以不同速度通过检测窗口位置。所述阵列样品槽和分离缓冲液系统由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
毛细管中流过的各蛋白组分通过紫外光阵列检测器进行检测,形成检测图谱,并记录于软件中。
将二甲亚砜作为电渗流的标记物,其他的各个峰的出峰时间与二甲亚砜作为参考,来确认各峰所代表的蛋白质组分。将糖化血红蛋白ffiAlc及非糖化血红蛋白HbAO的峰值进行积分,得到糖化血红蛋白ffiAlc的百分比例与实施例I基本相同。
实施例5
选用10根内壁有聚丙烯酰胺涂层的弹性石英毛细管(内径20微米,长30cm)和金属电极构成毛细管阵列。在毛细管阵列后部设有透明检测窗口,使用紫外/可见光对毛细管中分离得到的蛋白质组分进行定性和定量检测。
将毛细管阵列的毛细管的入口端一一对应的插入阵列样品槽中,将50nL样品以电压或压力方式同时进入毛细管阵列中毛细管的前端,所述样品的调配体积比为血样 溶血剂二甲亚砜=1:3:3。
将毛细管两端接通为分离缓冲液系统并在毛细管上加10_30kV的恒定直流电压作为分离驱动力,以驱动样品中的各种蛋白以不同速度通过检测窗口位置。所述阵列样品槽和分离缓冲液系统由连有控制元件的机械臂自动控制,也可通过手动控制。
毛细管中流过的各蛋白组分通过光阵列检测器进行检测,形成检测图谱,并记录于软件中。
将二甲亚砜作为电渗流的标记物,其他的各个峰的出峰时间与二甲亚砜作为参考,来确认各峰所代表的蛋白质组分。将糖化血红蛋白ffiAlc及非糖化血红蛋白HbAO的峰值进行积分,得到糖化血红蛋白ffiAlc的百分比例与实施例I基本相同。
如实施例I与实施例5所示,将本发明所提供的无涂层毛细管组成的毛细管阵列作为分离通道,在使用聚阴离子涂层和聚阳离子涂层后,其检测结果与直接使用内壁有涂层的毛细管阵列作为分离通道的检测结果基本相同。
权利要求
1.一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法, 其特征在于,使用阵列毛细管和光阵列检测装置同时对多个样品进行糖化血红蛋白HbAlc 检测。
2.如权利要求I所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,包括以下步骤a)将分离缓冲液充入阵列毛细管中的各毛细管中作为分离环境;b)将各样品同时加入到阵列毛细管中的各毛细管的前端;c)当样品进入毛细管阵列中的各毛细管前端后,将阵列毛细管的两端更换为分离缓冲液;d)在毛细管两端施加电压作为分离驱动力;e)通过检测光源和光阵列检测器对毛细管中的样品进行糖化血红蛋白HbAlc检测;f)根据步骤5)所得检测数据计算得出各样品中的糖化血红蛋白HbAlc的含量。
3.如权利要求2所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述毛细管阵列中毛细管内径20-100微米,有效分离长度10-50厘米。
4.如权利要求3所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述毛细管阵列中毛细管的数量为4-48根,所述毛细管为无涂层石英毛细管或内壁有涂层的中性石英毛细管。
5.如权利要求4所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述各毛细管的前部互相平行,末端集合到一处。
6.如权利要求2-5所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,在步骤I)前,在构成所述阵列毛细管的毛细管内壁制备涂层。
7.如权利要求6所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述涂层为聚阳离子涂层和聚阴离子涂层所构成的双层涂层。
8.如权利要求7所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,制备所述双层涂层的方法为使用聚阳离子溶液和聚阴离子溶液冲洗毛细管。
9.如权利要求8所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述聚阳离子溶液为含有聚阳离子的水溶液,选自聚凝胺水溶液、聚二烯丙基二甲基氯化铵水溶液、白蛋白水溶液,其浓度为0. OOl-Iwt%。
10.如权利要求8所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述聚阴离子溶液为含有聚阴离子的水溶液,选自聚丙烯酸水溶液、聚苯乙烯磺酸钠水溶液、硫酸软骨素水溶液,其浓度为0.001-lwt%。
11.如权利要求8所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,在制备涂层前,使用强酸和/或强碱溶液对阵列毛细管中的毛细管进行处理。
12.如权利要求11所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述强酸和/或强碱溶液对阵列毛细管中的毛细管进行处理、聚阳离子和聚阴离子溶液冲洗毛细管、分离缓冲液充入毛细管的过程均通过压力完成,所述强酸和强碱溶液、聚阳离子和聚阴离子溶液、分离缓冲液均从毛细管阵列的末端进入,从前端排出到废液池。
13.如权利要求12所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述强酸溶液选自盐酸缓冲液或硝酸缓冲液,所述强酸溶液的浓度为0. 01-lmol/L,所述强碱溶液选自氢氧化钠水溶液或氢氧化锂水溶液,所述强碱溶液的浓度为0. 01-lmol/L。
14.如权利要求2-5或7-13任一权利要求所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述分离缓冲液的pH值为3-5。
15.如权利要求2-5或7-13任一权利要求所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述步骤2)中的各样品中含有电渗流标记物。
16.如权利要求15所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,以所述电渗流标记物的出峰时间为基准,得出糖化血红蛋白及非糖化血红蛋白所对应的峰,对糖化血红蛋白及非糖化血红蛋白所对应的峰的峰值进行积分并计算后得到样品中糖化血红蛋白的含量。
17.如权利要求16所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述计算的公式为糖化血红蛋白)含量=糖化血红蛋白峰值/ (糖化血红蛋白峰值+非糖化血红蛋白峰值)*100 %。
18.如权利要求17所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述电渗流标记物为二甲亚砜;所述二甲亚砜与样品的体积比为I : 1_30。
19.如权利要求18所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述样品包括血样和溶血剂,所述血样与溶血剂的体积比为I : 1-3。
20.如权利要求19所述的种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述各样品同时加入到毛细管阵列中的各毛细管的前端的方法为电压方式或压力方式。
21.如权利要求2-5或7-13任一权利要求所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述步骤4)中的分离驱动力为恒定直流电,其电压为10-30kV。
22.如权利要求2-5或7-13任一权利要求所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述步骤5)中的光源是波长为 180-600nm的紫外或可见光源。
23.如权利要求22所述的一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法,其特征在于,所述紫外或可见光源是卤素灯或LED光源,所述光阵列检测器为PMT或CCD检测器所组成的光阵列检测器。
全文摘要
本发明涉及一种用于同时检测多个样品中糖化血红蛋白HbAlc的多通道毛细管电泳检测方法。所述多通道毛细管电泳检测方法使用阵列毛细管和光阵列检测装置同时对多个样品进行糖化血红蛋白HbAlc检测。本发明可以同时对多个血液样品中的糖化血红蛋白HbA1c进行分析和检测,并自动对结果进行分析,生成报告。
文档编号G01N27/447GK102539512SQ20121003029
公开日2012年7月4日 申请日期2012年2月10日 优先权日2012年2月10日
发明者宁小檬 申请人:上海康盈生物科技有限公司