专利名称：用于泌尿道感染的分子标记物的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于测定作为诊断标记物的血浆和尿中的降钙素原水平以鉴定患有泌尿道感染的患者的体外方法、用于执行所述测定的体外方法、用于诊断患有泌尿道感染的患者的试剂盒、以及降钙素原在诊断泌尿道感染中的有用性。
背景技术：
泌尿道感染(UTI)是一个非常常见的问题，往往与尿导管的使用相关(Hooton TM 等.Clin Infect Dis. 2010Mar 1，50 (5) : 625-63)，并且通常是由肠和外生殖器中的腐生菌引起的，而在不太常见的情况下是由真菌和病毒引起的。这些有机体在某些条件下可以经由尿道定植到泌尿道中，直至到达膀胱。在临床上，泌尿系感染表现有发热、排尿困难、痛性尿淋浙、尿频、尿急、和中度下背痛。
所述临床症状未必足以提供诊断，尤其是在重症监护病房中，在重症监护病房中， 患者往往无法交流他们的症状,并且各种合并症往往会掩盖感染的准确起源。
因此，对于分离所涉及的病原体以及评估任何并发症并鉴定出特异性疗法两者来说，都需要实验室检测。
用于诊断泌尿道感染的可选技术的代表为尿培养。该检测使得能够分离引起感染的细菌，并通过抗菌谱评估对抗生素的敏感性或抗性。获得尿培养结果所需要的时间取决于所涉及的微生物种类，在24至48小时之间不等。
在等待结果期间，往往执行仅根据临床观察结果的经验性治疗，这会导致抗生素疗法的不恰当使用，以及进行了完全没有必要的(阴性的)尿培养的患者。
因此，非常重要的是需要鉴定出用于UTI早期诊断的新工具，所述新工具能够预测可能的并发症并改善结果，尤其是在某些“棘手”的情况下，例如在危重新生儿或患者中。发明内容
本发明涉及用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法和试剂盒。本文所述发明是基于这一发现，即患者尿样品中的降钙素原浓度具有用于诊断泌尿道感染的预测性数值。此外，本发明人还观察到，在患有泌尿道感染的患者中，尿中的降钙素原浓度大于血浆的降钙素原浓度，而在未受泌尿道感染影响的患者中，尿中的降钙素原浓度低于血浆的降钙素原浓度。测定尿中的降钙素原浓度可用于诊断泌尿道感染的存在，所述诊断是通过将患者尿中的浓度值与标准值进行比较和/或根据血浆降钙素原浓度与尿中的降钙素原浓度之间的比例关系。
因此，本发明的主题是用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法，所述方法包括这样的阶段，即其中测定患者的尿样品中的降钙素原浓度。
本发明的主题还是上述方法，所述方法还包括这样的阶段，即其中还测定了所述患者的血浆降钙素原的浓度。
本发明的主题也是用于泌尿道感染的体外诊断和/或监测和/或严重性评估的试剂盒，所述试剂盒包含用于测定尿样品和任选的血浆样品中的降钙素原浓度所必需的试剂的等分试样。
本发明的主题也是降钙素原用于诊断和/或监测泌尿道感染的应用。
本发明具有的优点是，能够使用非常简单的非侵入性方法以及比在被称为尿培养的技术中使用的那些方法更快的方法来诊断和/或监测患有泌尿道感染的患者。根据以下对某些实施方式的详细描述，本发明的优点、特点和使用方法是显而易见的，所述实施方式是作为实施例，而不是限制性的。


图I.尿培养阳性的人群。该图显示了 10名患有泌尿道感染的患者的PCTur (尿的降钙素原)和PCTpl (血浆的降钙素原)的值。
图2.尿培养阴性的人群。该图显示了 10名无泌尿道感染的患者的PCTur (尿的降钙素原)和PCTpl (血浆的降钙素原)的值。
图I和2显示，在尿培养阳性的人群中，10例中有9例的PCTur值大于PCTpl值， 而在属于尿培养阴性人群的患者中，没有I例患者的PCTur值大于PCTpl值。
发明详述
本说明书提供了用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法。本发明的方法使得有可能诊断和/或监测泌尿道感染。本发明的方法使得有可能诊断泌尿道感染的存在或不存在、根据单次测定来评估(诊断)感染的严重性(即，降钙素原的浓度越高，感染就越严重， 第一次测定时的风险分级)、以及在治疗感染的过程中监测感染的进展。
本说明书中的术语“泌尿道感染”是指大量微生物(细菌、真菌和/或病毒)入侵正常情况下为无菌的泌尿道，如此决定了泌尿道上皮的炎性反应。
可引起泌尿道感染的微生物的实例是大肠埃希杆菌(E.Coli)、奇异变形杆菌(Proteus Mirabilis)、幾肠球菌(Ε· Faecalis)、Saprophyticus、葡萄球菌属 (Staphylococcus)、肠球菌属(Enterococcus)、克雷伯氏菌属(Klebsiella)、假单胞菌属 (Pseudomonas)、白色念珠菌(Candida albicans)等。流行病学数据表明，在三分之一的病例中，泌尿道感染与尿导管的使用相关。本发明可适用于带有永久性或临时性泌尿医疗装置(导管、肾造瘘、膀胱造瘘)的患者和没有这些装置的所有年龄的患者两种。
本发明的方法包括这样的阶段，即其中测定患者的尿样品中的降钙素原浓度。降钙素原(PCT)是降钙素的前体，降钙素是由甲状腺的髓质神经内分泌C细胞产生的、负责钙稳态的激素。
有利的是，本发明的方法还包括这样的阶段，即在此期间，还测定了所述患者的血浆样品中的降钙素原浓度。不仅测定了尿中的降钙素原，而且还测定了血浆中的降钙素原， 这可以在已对其尿和血浆进行分析的患者中更准确地诊断泌尿道感染的存在或不存在。事实上，由本发明人执行的临床研究已经表明，在患有泌尿道感染的所有患者中，尿中的降钙素原的值大于血浆中的降钙素原的值，而在阴性患者中，该值是较低的。该实施方式可用于，例如其尿降钙素原的值不足以给出关于泌尿道感染存在或不存在的明确指征的患者， 或者呈现出复杂的临床情况(例如，可能存在泌尿道感染和全身感染两种)的患者。
一般来说，为了测定尿和/或血浆中的降钙素原的浓度，本领域专家公知的、能够用于测定生物流体中的降钙素原浓度的任何方法，均可以被认为适合于本说明书的目的。 例如，定量和半定量的商品化的免疫分析，例如LUMItest PCT化学发光、LIAISON BRAHMS PCT 、TRACE: KRYPTOR 、BRAHMS PCT、PCT -Q。可以修改分析条件，以避免由尿基质的组分造成的可能干扰。
测定待检测的尿和/或血浆样品中的降钙素原的浓度是通过将样品与对降钙素原特异性的一级抗体在适当的温度下孵育适当长的时间，所述一级抗体以合适的浓度悬浮在适当的缓冲液中。本说明书中的术语抗体是指完整的抗体或抗体的片段；抗体片段包括但不限于片段？(&13’)2和？&13’或单链抗体。
对于本说明书的目的而言，术语“对降钙素原特异性的一级抗体”是指能够与降钙素原的任何部分选择性结合的任何抗体。
目前，特定蛋白质的选择性抗体的开发是使用实验室手册中教导的常规技术来执行的，并且许多公司还提供了开发所述抗体的服务。因此，没有必要在本说明书中提供关于抗体的产生的更多详情，所述抗体还可以订购自合适的公司。
因此，为了产生对降钙素原特异性的一级抗体，任何标准技术将足以用于开发多克隆和单克隆两种抗体。此外，对降钙素原特异性的抗体还可以在市场上获得(例如商业抗体，可以使用的商业抗体是Abcam公司的代码为ab53897 (兔多克隆)、ab90489 (小鼠单克隆)、ab24454 (连接了 HRP的小鼠单克隆)、abl4817 (连接了 HRP的小鼠单克隆)的商业抗体)，并且可以用于本发明的目的，而无需在本说明书 中提供更多的详情。关于一级抗体孵育方案的详情是本领域技术人员公知的，并且如果使用商业抗体，则供应商的说明书中给出了详情。这些孵育方案包括使用合适的缓冲液，例如PBS (磷酸盐缓冲盐溶液)或者如果使用商业抗体，则为制造商特别推荐的缓冲液。
为了检测一级抗体，一级抗体可以标记有选自以下的在抗体标记中常用的任何化合物，并且在特定情况下，可以使用荧光团羟基香豆素、氨基香豆素、甲氧基香豆素、铕、 钐、FITC、Cy3、Cy5、Cy2、Cy7、XL665或酶例如碱性磷酸酶或过氧化物酶。
可选地，如果使用了未直接标记的一级抗体，则可以使用任何标记的第二抗体来检测一级抗体，第二抗体选择性地识别所述一级抗体。正如在文献中已知的，第二抗体是对一级抗体的恒定区、也称为Fe部分特异性的，而恒定区又取决于开发一级抗体本身时所用的动物的类型。换言之，正是用所涉及的表位(一级抗体)免疫时所用的动物的类型限定了第二抗体的性质，因此，例如，如果一级抗体是从兔中获得的，那么第二抗体就是抗兔的；如果被免疫的动物是羊，那么第二抗体就是抗羊的；如果一级抗体是在小鼠中开发出来的，那么第二抗体就是抗小鼠的第二抗体；等等。
第二抗体可以标记有选自以下的在抗体标记中常用的任何化合物，并且在特定情况下，可以使用荧光团羟基香豆素、氨基香豆素、甲氧基香豆素、铕、钐、FITC、Cy3, Cy5, Cy2、Cy7、XL665或酶例如碱性磷酸酶或过氧化物酶。
在一个实施方式中，可以使用抗降钙素原的一级抗体和抗降钙素原的第二抗体来测定降钙素原的浓度，所述抗降钙素原的一级抗体例如与荧光标记物如铕连接的多克隆抗体，所述抗降钙素原的第二抗体识别与一级抗体识别的表位不同的表位，例如与荧光标记物如XL665连接的单克隆抗体。
可以通过手动执行本发明的方法，或者可以使用本领域技术人员已知的能够自动执行所述方法的任何仪器例如实验室仪器如KryptorBRAHMS来执行本发明的方法，或者，可以使用用于测定血浆降钙素原的其它方法(例如 LUMItest PCT-LIAISON 、BRAHMS PCT -Q)。
在一个实施方式中，将尿中的降钙素原浓度的值与指示泌尿道感染存在或不存在的一个或多个值比较，因为小于O. 05ng/mL的浓度预测不存在泌尿道感染，和/或大于O.3ng/mL的浓度预测存在泌尿道感染。
在一个实施方式中，本发明的方法可以包括这样的附加步骤，即其中将尿中的降钙素原浓度的值与血浆中的降钙素原浓度的值比较，因为尿中的降钙素原浓度与血浆中的降钙素原浓度之比大于I预测存在泌尿道感染。
本发明的主题也是用于体外诊断和/或预测泌尿道感染的试剂盒，所述试剂盒包含用于测定尿样品和任选的血浆样品中的降钙素原浓度所必需的试剂的等分试样。
因此，第一次提供了可用于鉴定患有泌尿系感染的患者和/或从特定治疗方案的角度监测感染过程的快速工具。
试剂盒在其最简单的形式中含有特异性的抗降钙素抗体的一个或多个等分试样以及随附的活页，所述活页例如含有关于对诊断结果的解释、以及任选的用于收集和储存尿和/或血浆样品的方法的说明。对于本说明书的目的来说，可以在本文要求保护的试剂盒中包含可以与降钙素原选择性结合的任何抗体。具体来说，试剂盒可含有一种或多种抗降钙素原的抗体，所述抗体是各自针对例如蛋白质的不同表位开发的，并且所述抗体有可能可以与常见抗体标记物例如荧光团或酶连接。在适当的情况下，试剂盒可包括使用市场上的单克隆和/或多克隆的抗降钙素原的抗体。试剂盒还可以含有随附的活页。这些活页可以指示试剂盒的组分和推荐的方案。此外，说明书还可以含有关于对所分析的尿和血浆样品所获得的降钙素原值的解释的信息，并且更具体地，如上所述，小于O. 05ng/mL的尿降钙素原浓度预测不存在泌尿道感染，大于O. 3ng/mL的浓度预测存在泌尿道感染，并且 PCTur/PCTpl之比>1预测存在泌尿道感染，其中PCTur是患者的尿降钙素原，而PCTpl是血浆降钙素原。
试剂盒还可以含有对一级抗体特异性的第二抗体的一个或多个等分试样。如本领域技术人员已知的，并且如上所述，第二抗体必须能够特异性识别所用一级抗体的恒定部分；因此，选择要使用的第二抗体，将取决于用相关表位所免疫的动物。第二抗体可以标记有抗体标记中常用的任何化合物。
试剂盒还可以含有阴性和/或阳性对照的一个或多个等分试样。阴性对照是指没有泌尿道感染的患者的任何尿或血浆样品。在一个具体实施方式
中，阴性对照可以用降钙素原浓度小于O. 05ng/mL的尿样品代表。
阳性对照能够用于检验所执行的程序的正确性和所用方法的可能的有效性，因为它可以含有患有泌尿道感染的患者的血浆或尿样品。具体来说，最适合的、但本发明不受此限制的阳性对照是降钙素原浓度大于O. 3ng/mL的尿样品。
试剂盒还可以含有用于检测尿和/或血浆中的降钙素原的试剂的一个或多个等分试样。这些试剂由可用于执行各种不同步骤的任何溶液组成，所述步骤导致鉴定出分析样品中的降钙素原浓度的值。具体来说，可以使用缓冲溶液，例如但不限于PBS (磷酸盐缓冲盐溶液)；封闭液，例如补充有牛血清白蛋白的PBS。
本发明的主题也是降钙素原在泌尿道感染的诊断、监测、和严重性评估中的应用， 所述泌尿道感染例如与尿导管的使用相关的感染。
下面所报告的是用于阐述包含在本说明书中的报告的实验结果和实施例不能将这些实施例认为是对上述说明和权利要求的限制。
关于在怀疑患有泌尿道感染的患者的临床研究中使用的人群的说明
将住在I⑶的、怀疑患有泌尿道感染的患者招募在临床研究中。各患者冋时接受以下检测
标准的尿分析(化学和物理检查)和尿培养；
血浆PCT ；
尿PCT。
根据尿培养结果，接收了 10名尿培养阳性的对象和10名尿培养阴性的对象。
接收了共20名患者(9名女性和11名男性)，平均年龄为70岁。所选择的患者的年龄从33到91岁不等。
每个患者必须表现出以下纳入标准中的至少一项
-发热或体温过低；
-白细胞增多/白细胞减少；
-下背痛和/或排尿困难；
-其他无法解释的SIRS体征；
-FUO ；
_ 复发的 UTI。
排除标准包括
I.少尿/无尿；
2.存在输尿管乙状结肠吻合术；
3.阻碍获得足够尿样品的肾功能异常；
4.肝功能衰竭。
如果不超过两种的微生物具有105CFU/mL的发展(在14_30%的情况下为多种微生物的病因)，则认为尿培养是阳性的。在念珠菌(Candida spp.)的情况下,认为显著性阈值为104CFU/mL。对于革兰氏阳性菌(特别是凝固酶阴性的肠球菌和葡萄球菌)来说也是如此， 而在抗菌治疗的情况下，倾向于认为小于105CFU/mL的计数是显著性的。_4] 临床研究的结果
尿培养阳性的人群显示出，在10例中有9例的尿PCT高于血浆PCT (图I)。
尿PCT平均值为I. 4ng/mL,而血浆PCT平均值为O. 4ng/mL。尿PCT的范围在O. 36 和2. 54ng/mL之间，而血浆PCT的范围在O. 06和I. 22ng/mL之间。
尿PCT值的中值为I. 25ng/mL,而血浆PCT值的中值为O. 24ng/mL。
尿PCT与血浆PCT之比具有在O. 8和25. 33ng/mL之间的值，平均值为7. 32ng/mL， 中值为 4. 86ng/mL。
对象的平均温度为37. 02°C，其中I名患者的温度<35°C，3名患者彡36 °C并 <37°C，4名患者彡37°C并<38°C，以及彡2名患者38°C。
白血细胞值(正常值4. 50至10. 00X IO3/μ L)的范围在5. 37和22. 12X IO3/μ L之间，其中平均值为12. 22X 103/yL，中值为11. 55X IO3/μ L。
嗜中性粒细胞百分数(正常值40. O至75. 0%)在67. 3至88. 4%的范围内，平均值为 78. 8%ο
对象的肌酐(正常值O. 50至O. 90mg/dL)范围从最小的O. 3到最大的2. 85mg/dL, 平均值为O. 78mg/dL。
为了计算肌酐清除率的值,使用以下Cockcroft-Gault公式
男性[(140-年龄)X体重(kg) / (血清肌酐X 72)]
女性[(140-年龄)X体重(kg) X O. 85/ (血清肌酐 X 72) ]
在研究对象中，清除率在27至226. 8ml/分钟的范围内，其中平均值为129. 16ml/ 分钟，中值为115. 4ml/分钟。
尿培养阴性的人群显示，在所有患者中，尿PCT低于血浆PCT。
尿PCT平均值为O. 6ng/mL，而血浆PCT平均值为4. 44ng/mL。尿PCT的范围在O. 13 和I. 38ng/mL之间，而血浆PCT的范围在O. 35和25. 72ng/mL之间。
尿PCT值的中值为O. 36ng/mL,而血浆PCT值的中值为I. 36ng/mL。
尿PCT和血浆PCT之比具有在O. 03和O. 9ng/mL之间的值，平均值为O. 40ng/mL, 中值为 O. 37ng/mL。
对象的平均温度为37. 7°C，其中I名患者的温度彡36°C并<37°C，I名患者彡37°C 并<38°C，以及8名患者彡38°C。
白血细胞值的范围在4. 27和39. 2 X IO3/μ L之间，其中平均值为12. 86 X IO3/μ L， 中值为 8. 61 X IO3/μ Lo
嗜中性粒细胞百分数的范围在65. 5和93. 9%之间，平均值为85. 5%。
对象的肌酐范围从最小的O. 55到最大的I. 61mg/dL,平均值为O. 97mg/dL。
使用Cockcroft-Gault公式,肌酐清除率在38. 4至169. 4ml/分钟的范围内，其中平均值为78. 72ml/分钟，中值为76. Iml/分钟。
在尿培养阴性患者的人群中，在尿培养阴性人群中的所有10名患者中均观察到PCTur值低于PCTpl值，而在尿培养阳性的人群中，只有I例患者的PCTur值低于 PCTpl值(图2)。后者是所接收的唯一一名具有严重肾功能障碍的对象，该患者表现出，用 Cockcroft-Gault公式估算的肌酐清除率值为27ml/分钟。因此，有可能的是，在患有严重肾功能障碍的对象中，PCT蓄积在血浆中，而没有适当地排泄到尿中，这导致尽管培养阳性， 但PCTpl值大于PCTur值。
在尿培养阳性的人群中，PCTur值的中值为I. 25ng/mL，而在尿培养阴性的人群中，该值为O. 36ng/mL，这显示了两组之间的明显差异。
PCTpl的中值也显示出显著性差异在尿培养阳性的人群中，该值(O. 24ng/mL)表示大多数对象没有任何其他感染；而在尿培养阴性的人群中，该值(I. 36ng/mL)表示大多数患者具有细菌感染(图24)。
为了评估PCT测定的准确性是否受到尿用作样品基质的影响，将不能检测到PCT 的健康个体的尿和血清样品各5份掺入重组的PCT，并在KRYPTOR PCT分析中进行测定。尿中PCT的回收比血清中PCT的回收低20-30%。因此，尿中回收降低的程度是相对小的，并且，即使尿和血清中的回收不相同，上面所得出的结论仍然有效。在本发明临床样品中测得8的尿PCT值可以通过将它们乘以I. 25进行校正，以计入尿基质中降低的回收。
统计分析
将从临床研究结果推算出的数据进行统计分析，以评估是否PCTur/PCTpl比率>1 能够以一定的灵敏度和特异性诊断泌尿道感染。
患有感染的患者无感染的患者合计检测+AbA+b检测+CdC+d合计A+cB+d
患有感染的患者无感染的患者合计检测+9O9检测+I1011合计101020
灵敏度是感染的患者对检测呈阳性的概率，在我们的实例中
灵敏度=a/a+c=9/(9+1) =0. 9,即 90%。
另一方面，特异性是健康对象对检测呈阴性的概率，在我们的实例中
特异性=d/b+d=10/(0+10) =1，即 100%
我们还可以计算阳性预测值(PPV)，PPV相当于患有感染并因此被正确诊断为感染的检测呈阳性的对象的比例
PPV=a/a+b 的=9/ (9+0) =1，即 100%。
实施例I测定血■浆的降钙素原
使用BRAHMS PCT灵敏KRYPTOR从患者收集用于分析的血液样品，BRAHMS PCT灵敏KRYPTOR是为人血清或血浆样品(EDTA，肝素)的自动免疫荧光分析中的降钙素原剂量设计的试剂盒。该定量方法使用连接了荧光标记物的抗降钙素原的羊多克隆抗体、铕穴状化合物和其他物质例如包含牛血清白蛋白、未免疫小鼠的免疫球蛋白、和氟化钾的缓冲液；也连接了荧光标记物XL665的抗降钙素的小鼠单克隆抗体，以及缓冲液、牛血清白蛋白、小鼠免疫球蛋白、氟化钾；最后，准备使用时，可利用由人血清、Kathon、EDTA形成的稀释液。
该分析中的PCT测定是基于TRACE技术(时间分辨扩增争夺发射(Time-Resolved Amplifed scramble Emission)),所述技术测定从免疫复合物延时发射出的信号。用氮激光器在337nm处激发样品，供体(穴状化合物)发射出620nm的长寿命的在毫秒范围内的荧光信号，而受体(XL665)产生665nm的短寿命的在纳秒范围内的信号。如果形成了免疫复合物，则在665nm处同时出现受体信号的信号放大和寿命延长，并且可以以微秒测定该信号。
PCT分子被夹在两种抗体之间，通过测定信号长度，获得了 PCT值，PCT值与信号的9发射时间成正比。
实施例2测定尿的降钙素原
在夹紧流出口并消毒后，用注射器从尿导管的适当引流位置取出尿样品。将约4mL 尿转移到合适的管中，并运送到分析实验室。一旦取出样品后，就根据如实施例I所述为血浆PCT提供的方案执行尿PCT的测定。_6] 参考文献
Hooton TM等.美国传染病学会的2009年国际临床实践指南与尿导管相关的成人泌尿道感染的诊断、预防、和治疗(Diagnosis, prevention, and treatment of catheter-associated urinary tract infection in adults:2009International Clinical Practice Guidelines from the Infectious Diseases Society of America). Clin Infect Dis. 2010Mar I;50 (5):625-63。
权利要求
1.用于诊断和/或监测泌尿道感染的体外方法，其包括测定患者尿样品中降钙素原浓度的步骤。
2.权利要求I的方法，其还包括测定所述患者血浆中降钙素原浓度的步骤。
3.权利要求I或2的方法，其中通过对降钙素原特异性的一级抗体来测定降钙素原浓度。
4.权利要求3的方法，其中所述一级抗体用选自以下的荧光染料直接标记羟基香豆素、氨基香豆素、甲氧基香豆素、铕、钐、FITC、Cy3、Cy5、Cy2、Cy7、XL665。
5.权利要求3的方法，其中通过用选自以下的化合物标记的第二抗体来测定降钙素原浓度轻基香豆素、氨基香豆素、甲氧基香豆素、铕、衫、FITC、Cy3、Cy5、Cy2、Cy7、XL665。
6.权利要求5的方法，其中所述第二抗体是对所述一级抗体特异性的。
7.权利要求1-6任一项的方法，其中所述泌尿道感染与尿导管的使用相关。
8.权利要求1-7任一项的方法，其还包括将尿中的所述降钙素原浓度与一个或多个值进行比较的步骤，由此，低于O. 05ng/ml的浓度预测不存在泌尿道感染，和/或大于O. 3ng/ ml的浓度预测存在泌尿道感染。
9.权利要求2-8任一项的方法，其还包括将尿中的所述降钙素原浓度的值与血浆中的所述降钙素原浓度的值进行比较的步骤，由此，尿中的所述降钙素原浓度与血浆中的所述降钙素原浓度之间的比大于I预测存在泌尿道感染。
10.用于体外诊断和/或监测泌尿道感染的试剂盒，其包含用于测定尿样品和任选的血浆样品中降钙素原浓度所需要的试剂的等分试样。
11.权利要求10的试剂盒，其包含对降钙素原特异性的一级抗体的一个或多个等分试样。
12.权利要求11的试剂盒，其中所述一级抗体是用选自以下的化合物直接标记的抗体轻基香豆素、氨基香豆素、甲氧基香豆素、铕、衫、FITC、Cy3、Cy5、Cy2、Cy7、XL665。
13.权利要求12的试剂盒，其还包含用选自以下的化合物的标记的第二抗体的一个或多个等分试样羟基香豆素、氨基香豆素、甲氧基香豆素、铕、钐、FITC、Cy3, Cy5, Cy2, Cy7, XL665。
14.权利要求10-13任一项的试剂盒，其中所述试剂包括缓冲溶液的一个或多个等分试样和/或结合溶液的一个或多个等分试样和/或用于检测标记的抗体的试剂的一个或多个等分试样。
15.权利要求10-14任一项的试剂盒，其还包含阴性对照的一个或多个等分试样和/或阳性对照的一个或多个等分试样。
16.权利要求15的试剂盒，其中所述阴性对照是降钙素原浓度低于O.05ng/ml的尿样品，并且所述阳性对照是降钙素原浓度大于O. 3ng/ml的尿样品。
17.降钙素原用于诊断和/或监测泌尿道感染的应用。
18.权利要求17的降钙素原的应用，其中所述泌尿道感染与尿导管的使用相关。
全文摘要
本发明涉及用于测定作为诊断标记物的血浆和尿中的降钙素原水平以鉴定患有泌尿道感染的患者的体外方法、用于执行所述测定的体外方法、用于诊断患有泌尿道感染的患者的试剂盒、以及降钙素原在诊断泌尿道感染中的有用性。
文档编号G01N33/569GK102939542SQ201180014501
公开日2013年2月20日 申请日期2011年3月15日 优先权日2010年3月18日
发明者弗朗切斯科·琼塔, 弗朗切斯科·福尔弗里, 加达·瑟里 申请人:B.R.A.H.M.S 有限公司