专利名称：一种简便快速检测面粉中过氧化苯甲酰含量的方法
技术领域：
本发明涉及一种简便快速检测面粉中过氧化苯甲酰含量的方法，属于荧光检测技术领域。过氧化苯甲酰(Benzoyl Peroxide，简称BPO或BP)作为增白剂已被广泛应用于小麦面粉的漂白。其基本原理是过氧化苯甲酰能使小麦粉中类胡萝卜素的共轭双键被氧化而破坏，从而使小麦粉的色泽得以提高和改善。然而，过量添加过氧化苯甲酰，不仅影响了面粉制品的口感，同时也产生大量过氧化苯甲酰的分解产物，不利于人体健康。自2011年 5月1日起，中华人民共和国卫生部禁止在面粉生产中添加过氧化苯甲酰。目前各种检测面粉中过氧化苯甲酰含量的方法主要有高效液相色谱法，气相色谱法，质谱和色谱连用法，离子色谱法，化学发光和电化学分析法，碘量法和分光光度法等。这些方法样品前处理繁琐耗时，成本高，不易推广使用。碘量法和分光光度法虽然简便快速， 但灵敏度低。因此，有必要建立一种能灵敏快速检测面粉中过氧化苯甲酰含量的新方法，为基层质检部门提供技术支持。荧光分析方法不但具有灵敏度高、选择性好、反应时间快以及能够实现可视化检测等特点，且因预处理简单、成本低而受到普遍重视。但是，目前很少有荧光法检测面粉中过氧化苯甲酰的报道。

发明内容
本发明的目的是提供一种检测过氧化苯甲酰含量的方法。本发明提供的一种检测样品中过氧化苯甲酰含量的方法，包括如下步骤(1)分别将不同量的过氧化苯甲酰加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中进行反应得到反应液，用波长为515nm的激发光照射所述反应液，测定所述反应液在波长为555nm处的荧光强度，则得到所述混合溶液中过氧化苯甲酰的浓度与所述反应液的荧光强度变化值之间的线性方程，所述反应液的荧光强度变化值为所述反应液的荧光强度与所述混合溶液的荧光强度的差值；
(I )式I中，当X为H时，Y为C2H5 ；当X为CH3时，Y为H ；(2)将待检测的含有过氧化苯甲酰的样品加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中进行反应得到反应液a，用波长为515nm的激发光照射所述反应液a，测定所述反应液a在波长为555nm处的荧光强度，则得到所述反应液a的荧光强度，
背景技术：
N
ι
Y
N
ι
Y进而得到所述反应液a的荧光强度与所述混合溶液的荧光强度的差值，根据所述线性方程即得所述混合溶液中过氧化苯甲酰的浓度，进而得到待测样品中过氧化苯甲酰的含量。上述的方法中，步骤(1)和步骤(2)中所述反应的温度均可为25°c-60°c，如40°C; 所述反应的时间均可为5分钟-50分钟，如30分钟。上述的方法中，步骤(1)和步骤(2)所述混合溶液中式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺的浓度均可为ι μ M-IO μ Μ，如5 μ M ；骤(1)和步骤(2)所述混合溶液中氯化亚铁的浓度均可为10 μ Μ-200 μ Μ,如30 μ Mo上述的方法中，步骤(1)所述混合溶液中过氧化苯甲酰的质量体积浓度可为 0-50 μ g/mL,但不为 0，如 0· 2μ g/mL、0. 4μ g/mL、0. 8μ g/mL、l. 2μ g/mL、2. 0μ g/mL、 2. 4 μ g/mL、2. 8 μ g/mL 或 3. 2 μ g/mL。上述的方法中，步骤(1)和步骤( 所述混合溶液的溶剂可为乙腈、乙醇、甲醇、四氢呋喃、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷和石油醚中至少一种与水的混合物，所述混合溶液中式 (I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁均溶解完全。上述的方法中，步骤O)中所述待检测样品可用乙腈、乙醇、甲醇、四氢呋喃、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷和石油醚中至少一种溶解后加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中。上述的方法中，所述待检测样品可为面粉；进行测试前，可先将面粉加入无水乙醇，超声提取2-15min，静置I-IOmin后，取上层清液用0. 45 μ m的微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液。本发明提供的方法利用过氧化苯甲酰能使亚铁离子氧化成铁离子，以及具有氧肟酸结构片段的式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺荧光试剂对铁离子有很好的选择性识别功能的原理，设计了一种基于连续化学反应的荧光检测体系来检测样品中过氧化苯甲酰的含量。本发明在一定范围内测量的准确度高，具有操作简便，成本低，快速高效灵敏等优点， 易于推广和应用。


图1为实施例1中的氧化苯甲酰的浓度和荧光强度变化值之间的标准曲线。
具体实施例方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中所用的N-甲氧基罗丹明6G内酰胺是按照以下方法制备的将甲氧胺盐酸盐(0. 5g，6mmol)、罗丹明6G(如式(II)所示，2. 4g，5mmol)、三乙胺(2. 55mL, 18mmol)依次加入到50mL乙醇中，搅拌，将反应液回流48h，反应完毕，浓缩溶剂得到粗产品，用石油醚(60-90°C )/乙酸乙酯(1 l,v/v)作洗脱液，柱层析提纯粗产品得到微红色粉末N-甲氧基罗丹明6G内酰胺(0. 44g，收率20% )。
权利要求
1. 一种检测样品中过氧化苯甲酰含量的方法，包括如下步骤 (1)分别将不同量的过氧化苯甲酰加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中进行反应得到反应液，用波长为515nm的激发光照射所述反应液，测定所述反应液在波长为555nm处的荧光强度，则得到所述混合溶液中过氧化苯甲酰的浓度与所述反应液的荧光强度变化值之间的线性方程，所述反应液的荧光强度变化值为所述反应液的荧光强度与所述混合溶液的荧光强度的差值；
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤⑴和步骤(2)中所述反应的温度为25°C -60°C ；所述反应的时间为5分钟-50分钟。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于步骤(1)和步骤( 所述混合溶液中式⑴所示N-甲氧基罗丹明内酰胺的浓度均为1 μ M-IO μ M ；骤⑴和步骤⑵所述混合溶液中氯化亚铁的浓度均为10 μ Μ-200 μ Μ。
4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于步骤(1)所述混合溶液中过氧化苯甲酰的质量体积浓度为0-50μ g/mL，但不为零。
5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于步骤(1)和步骤( 所述混合溶液的溶剂为乙腈、乙醇、甲醇、四氢呋喃、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷和石油醚中至少一种与水的混合物。
6.根据权利要求1-5中任一所述的方法，其特征在于步骤O)中所述待检测样品用乙腈、乙醇、甲醇、四氢呋喃、丙酮、二氯甲烷、三氯甲烷和石油醚中至少一种溶解后加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中。
7.根据权利要求1-6中任一所述的方法，其特征在于所述待检测样品为面粉。
全文摘要
本发明提供了一种检测样品中过氧化苯甲酰含量的方法。该方法包括如下步骤(1)分别将不同量的过氧化苯甲酰加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中进行反应得到反应液，用波长为515nm的激发光照射所述反应液，测定所述反应液在波长为555nm处的荧光强度，则得到所述混合溶液中过氧化苯甲酰的浓度与所述反应液的荧光强度变化值之间的线性方程，所述反应液的荧光强度变化值为所述反应液的荧光强度与所述混合溶液的荧光强度的差值；(2)将待检测的含有过氧化苯甲酰的样品加入至式(I)所示N-甲氧基罗丹明内酰胺和氯化亚铁的混合溶液中进行反应得到反应液a，用波长为515nm的激发光照射所述反应液a，测定所述反应液a在波长为555nm处的荧光强度，则得到所述反应液a的荧光强度，进而得到所述反应液a的荧光强度与所述混合溶液的荧光强度的差值，根据所述线性方程即得所述混合溶液中过氧化苯甲酰的浓度，进而得到待测样品中过氧化苯甲酰的含量。本发明在一定范围内测量的准确度高，具有操作简便，成本低，快速高效等优点，易于推广和应用。
文档编号G01N21/64GK102253019SQ20111011140
公开日2011年11月23日 申请日期2011年4月29日 优先权日2011年4月29日
发明者刘洋, 刘清珺, 史文, 张经华, 李照, 陈巍, 马会民 申请人:中国科学院化学研究所, 北京市理化分析测试中心