专利名称：同时测定鸡肝中磺胺类、喹诺酮类、苯并咪唑类药物及其代谢物残留的分析方法
技术领域：
本发明涉及一种QuEChERS-UPLC-MS/MS同时测定鸡肝中磺胺类、喹诺酮类、苯并 咪唑类药物及其代谢物残留的分析方法。
背景技术：
磺胺类(Sulifonamides，SAs)和喹诺酮类(quinolones，QNs)药物为广谱抑菌 药，因其具有抗菌谱广、高效、低毒、价格低廉等特点，在畜牧、水产等养殖生产中广泛使用。 但过量使用有可能在人体内蓄积，蓄积浓度超过一定值时对人体有害，并导致病原体产生 耐药性。特别是磺胺二甲基嘧啶等磺胺类药物可能导致致癌、致畸、致突变；奈啶酸已经 被证实有干扰繁殖系统，影响光敏感性、致癌和致突变作用等。因此，国际食品法典委员会 (CAC)、美国、欧盟、日本及我国都规定，食品中磺胺类药物总量以及磺胺二甲基嘧啶等单个 磺胺的最大残留限量(MRLs)为100μ g/kg ；根据不同品种、组织和药物种类，食品中喹诺酮 药物的最大残留限量(MRLs)为10 6000 μ g/kg。苯并咪唑(Benzimidazoles，BMZs)是一类在农业和水产养殖中广泛使用的兽药， 主要用于防治寄生虫感染。有些苯并咪唑可用作采前和采后杀菌剂，用于控制田间作物、贮 藏水果和蔬菜的真菌感染。研究表明苯并咪唑类药物在实验动物中显示致畸与致突变作 用，因此中国、美国、欧盟、日本等国家或地区将苯并咪唑类药物列入限制使用的药物和动 物源性食品残留检测的监控对象，并制订了最大残留限量(MRLs)。苯并咪唑类药物在肝脏 中最大残留限量(MRLs)为50 1000 μ g/kg。测定磺胺类药物、喹诺酮类药物及苯并咪唑类药物及其代谢物的检测方法主要有 液相色谱法(HPLC)和液相色谱法-质谱/质谱法(HPLC-MS/MQ。HPLC的灵敏度较低且无 法提供结构信息，一般常作为筛选方法，HPLC-MS/MS灵敏度高，选择性和特异性好，抗干扰 能力强，能够对低浓度的样品进行很好的定性确认，是目前较为先进和常用的动物源性食 品中药物残留检测方法。同时测定鸡肝中磺胺类药物、喹诺酮类药物及苯并咪唑类药物及 其代谢物残留的的检测方法未见报道。2003年，美国农业部农业研究服务中心的Anastassiades等开发了一种快速 (Quick)、简单 asy)、廉价(Cheap)、高效(Effective)、耐用(Rugged)、安全(Safe)的样 品前处理方法(简称QuChERQ，已被许多国家和美国公职分析化学家协会等多个国际农药 残留分析机构广泛采纳。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种同时测定鸡肝中磺胺类、喹诺酮类、苯并 咪唑类药物及其代谢物残留的分析方法。本发明技术方案如下一种同时测定鸡肝中磺胺类、喹诺酮类、苯并咪唑类药物及其代谢物残留的分析方法，待测样品用乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附剂净化，正己烷脱脂；然后用Kromasil Eternity C-18色谱柱分离，以0. 1 %甲酸和甲醇作为流动相进行梯度洗脱，电喷雾正离子 模式电离，多反应监测模式检测，内标法定量。所述的分析方法，所述色谱柱的色谱条件为Kromasil Eternity C-18色谱柱为 10(toimX2. 1 讓，2. 5μπι ；柱温:35°C;样品室温度7°C;进样量5μ L ；流速为 0. 25mL/min ；流 动相A :0. 甲酸；流动相B 甲醇；磺胺类药物和苯并咪唑类药物梯度洗脱程序见表1，喹 诺酮药物梯度洗脱程序见表2。表1磺胺类药物和苯并咪唑类药物梯度洗脱程序
权利要求
1.一种同时测定鸡肝中磺胺类、喹诺酮类、苯并咪唑类药物及其代谢物残留的分析方 法，其特征在于，待测样品用乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附剂净化，正己烷脱脂；然后用 Kromasil Eternity C-18色谱柱分离，以0. 1 %甲酸和甲醇作为流动相进行梯度洗脱，电喷 雾正离子模式电离，多反应监测模式检测，内标法定量。
2.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述色谱柱的色谱条件为=Kromasil Eternity C-18色谱柱为10(toimX2. 1讓，2. 5μπι;柱温35°C ；样品室温度7°C ；进样量 5 μ L ；流速为0. 25mL/min ；流动相A :0. 甲酸；流动相B 甲醇；磺胺类药物和苯并咪唑类 药物梯度洗脱程序见表1，喹诺酮药物梯度洗脱程序见表2。表1磺胺类药物和苯并咪唑类药物梯度洗脱程序
3.根据权利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述质谱条件为电喷雾离子源(ESI+)；毛细管电压为3. 2kV ；萃取电压为4. OV ；预六极杆电压为0. IV ；源温为120°C ；脱溶 剂温度为380°C ；脱溶剂气速为800L/h ；锥孔反吹气速为60L/h ；采用多反应监测(MRM)模 式，其他质谱分析参数见表3。表全文摘要
本发明公开了一种QuEChERS提取净化-超高效液相色谱-串联质谱法(QuEChERS-UPLC-MS/MS)同时测定鸡肝中12种磺胺类，19种喹诺酮类和8种苯并咪唑类药物及其代谢物残留的分析方法。样品用1％乙酸-乙腈溶液提取，NH2吸附剂净化，正己烷脱脂。然后用Kromasil Eternity C18色谱柱(100mm×2.1mm，2.5μm)分离，以0.1％甲酸和甲醇作为流动相进行梯度洗脱，电喷雾正离子(ESI+)模式电离，多反应监测(MRM)模式检测，内标法定量。39种药物在5～100μg/kg的空白添加浓度范围内线性良好(r＞0.98)，在10～50μg/kg的添加水平范围内，平均回收率为72％～121％，相对标准偏差(RSD)为1.5％～23.4％，39种药物的检出限(LOD)为5μg/kg，测定低限(LOQ)为10μg/kg。该方法简便、快速、灵敏、准确、耐用，适合鸡肝中磺胺类、喹诺酮类和苯并咪唑类药物残留的确证和定量测定。
文档编号G01N30/02GK102128891SQ201010595298
公开日2011年7月20日 申请日期2010年12月20日 优先权日2010年12月20日
发明者姚伟琴, 张万权, 张红霞, 李晓岩, 李锋格, 窦辉, 苏敏 申请人:新疆出入境检验检疫局检验检疫技术中心