专利名称：猪的胰蛋白酶(try)elisa检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及生物技术领域，尤其涉及一种用于检测猪胰蛋白酶的试剂盒。
背景技术：
酶联免疫吸附测定法(enzymelinked immunosorbent assay, ELISA)是将抗原、 抗体免疫反应的特异性和酶的高效催化作用原理有机地结合起来的一种敏感性高、特异性 强、重复性好的实验诊断方法，可敏感地检测体液中微量的特异性蛋白。猪胰蛋白酶是猪胰腺分泌的一种水解酶。能水解由肽链相连的氨基酸类化合物， 具有酯酶活性。正常猪血清中含量甚微。人和猪的急性胰腺炎的发病机理都是由于胰腺因 胰蛋白酶的自身消化作用，对其周围组织的消化，从而继发一系列的器官的功能障碍。在正 常情况下，胰液内的胰蛋白酶原无活性，待其流入十二指肠，受到胆汁和肠液中的肠激酶的 激活作用后乃变为有活性的胰蛋白酶，方具有消化蛋白质的作用。通过对实验模型猪的观 察，大多数患急性胰腺炎的猪胰蛋白酶明显增高，因此测定猪血清胰蛋白酶对诊断猪急性 胰腺炎有重要意义。目前，对于胰蛋白酶的检测主要是测定其活性，方法主要有放射免疫分 析法(RIA)和以苯甲酰-L-精氨酸乙酯(简称BAEE)，对甲苯磺酰-L-精氨酸甲酯(简称 TAME)，苯甲酰-L-精氨酸-对硝基苯胺(简称ΒΑΡΑ)和苯甲酰-L-精氨酸-β -萘酰胺(简 称ΒΑΝΑ)等为底物，用紫外吸收法测定的方法。RIA技术极其敏感而又极其特异，但其却需 要具备尖端复杂的设备，且成本也不低。同时，RIA还需要特殊的预防措施，因为其要用到 放射性物质。因此，如今RIA在很大程度上已经被ELISA所取代。采用BAEE、TAME等为底 物，用紫外吸收法测定的方法，由于血清中还有其他蛋白酶也能水解试剂中的底物，同时还 有蛋白酶的抑制物存在，这些都会影响测定结果，并且由于实验操作繁琐，不能定量，其应 用意义不大。因此，有必要选用一种快速、简便能够定量且灵敏度、准确度和特异性高的方 法来进行胰蛋白酶的检测。

实用新型内容本实用新型要解决的技术问题是提供一种检测猪胰蛋白酶的ELISA试剂盒，其 操作简便，成本低，稳定性好，适合于血液及其它生物液体中胰蛋白酶的检测。为了解决上述技术问题，本实用新型所采用的技术方案是一种猪的胰蛋白酶 (TRY)ELISA检测试剂盒，包括酶标板，所述酶标板包括固相载体和包被层，固相载体上设置 有多个微孔，包被层附着在固相载体的微孔表面，包被层是由小鼠抗猪胰蛋白酶单克隆抗 体和牛血清白蛋白依次涂布在微孔上形成的复合层。本实用新型采用ELISA方法的试剂盒可以定量检测血液或其它生物液体中胰蛋 白酶含量，显著提高了胰蛋白酶检测结果的准确度；并且灵敏度高，即使少量或痕量酶也能 够检测出；特异性高，几乎不受体液中其他物质，如酶抑制利、激活剂等的影响，不受药物的 干扰，且操作简单，省时省力，特别适用于胰蛋白酶的检测。
权利要求一种猪的胰蛋白酶(TRY)ELISA检测试剂盒，包括酶标板，所述酶标板包括固相载体和包被层，其特征在于所述固相载体上设置有多个微孔，所述包被层附着在所述固相载体的微孔表面，所述包被层是由小鼠抗猪胰蛋白酶单克隆抗体和牛血清白蛋白依次涂布在所述固相载体的微孔表面上形成的复合层。
专利摘要本实用新型涉及检测猪胰蛋白酶的生物技术领域，具体提供了一种猪的胰蛋白酶(TRY)ELISA检测试剂盒，包括酶标板，其中酶标板又包括固相载体和包被层，固相载体上设置有多个微孔，包被层附着在固相载体的微孔表面，包被层是由小鼠抗猪胰蛋白酶单克隆抗体和牛血清白蛋白依次涂布在微孔上形成的复合层。本实用新型操作简便，成本低，稳定性好，适合于血液及其它生物液体中胰蛋白酶的检测。
文档编号G01N33/577GK201716317SQ201020245770
公开日2011年1月19日 申请日期2010年7月2日 优先权日2010年7月2日
发明者丛旭霞, 何峰容, 汪景, 章秀波, 童晓玲, 马云芳 申请人:武汉优尔生科技股份有限公司