专利名称：一种血液制品及其制备方法
技术领域：
本发明涉及一种血液制品以及这种血液制品的制备方法。更详细地，本发明涉及一种质控血清以及这种质控血清的制备方法。
背景技术：
质量控制(Quality Control)是实施医学检验质量保证中的一部分。临床实验室要获得可靠的测定结果，需要建立一个全面的质量管理体系。在全面质量管理体系中，实验室质量控制是一个重要的环节。它控制着自吸取样本至获得测定结果并对结果进行分析的整个测定过程，是保证高质量操作的必要措施，向患者提供报告的所有定量测定项目的实验室必须开展室内质量控制和参加室间质量评价。质控血清是开展治疗药物监测质量控制必不可少的、重要的基本物质。一般来说，会配制一系列不同浓度的含药血清绘制工作曲线(工作曲线配制方法参见《中国药典(二部)》2010年版附录XIX B药物制剂人体生物利用度和生物等效性试验指导原则)，作为对服药患者的血清进行检测的标准。然而，由于检测方法的灵敏度、检测过程中的误操作或者检测仪器的系统误差等原因，在实际进行检测时，还需要配制一定药物浓度的血清作为质量控制检验物，这样的血清就是质控血清。质控血清通常会包括低、中、高三个浓度水平，能够覆盖大部分工作曲线范围。质控血清是已有参考靶值的血清，在每次的常规检验中加入一份或数份，通过所得结果与参考靶值比较，如偏差在质控规则所规定的范围内，则本批次检测结果判定为在控。如果出现超过质控规则允许误偏差范围的异常结果，则判定为该批次测定失控，同批次测定的所有结果都无效，必须依程序寻找引起该偏差的原因，待原因排除后重复以上步骤，质控在控后，才可测定样本。因此质控血清在质控工作中避免了在患者血清检测过程中出现检测物浓度假高或者假低，起到了非常重要的作用。然而，有些药物在人体内会产生与母药类似的代谢产物，由于这些代谢物结构与母药非常相似，因而对于非特异性或者灵敏度不高的检测方法，会无法将这些代谢产物与母药或者其他代谢产物完全分离，就会使母药或其它代谢物的测定结果与真实结果相比偏高，从而影响定量的准确性，导致使用常规质控血清的分析方法无法获得可靠的测定结果，甚至会造成质量控制体系整体失控。因而，迫切需要一种能够解决上述问题的质控血清。

发明内容
根据本发明人广泛和深入的研究，发现如果采用根据本发明的质控血清，将解决这个问题。本发明提供了一种质控血清，所述质控血清含有血清基质和药物及其一种或多种代谢产物。可以通过向血清基质中外源性添加药物及其一种或多种代谢产物来制备根据本发明的质控血清。血清基质可以是健康人血清或者牛血清。牛血清可以商购获得，例如BoMei生产的优级胎牛血清，需要注意的是，牛血清基质不适用于人牛差异大的检测项目，比如制备精神药物质控血清。健康人血清可以得自大型的健康体检机构,经被采集人知情同意后，采集血液并筛选出无甲肝、こ肝、丙肝、艾滋、梅毒等感染源的健康人血清。健康人血清是优选的血清基质。根据本发明，术语“药物”是指母药，S卩服入人体或通过注射、透皮给药等方式进入人体且尚未被代谢的药物。所述药物可以是传统抗精神病药，例如氯丙嗪、氟哌啶醇、奋乃静、氟奋乃静、三氟拉嗪、硫利达嗪、五氟利多、氯普噻吨、舒必利、硫必利；非典型抗精神病药，例如氯氮平、利培酮、奥氮平、喹硫平、洛沙平、阿立哌唑、齐拉西酮、氨磺必利；三环四环抗抑郁药，例如阿米替林、多塞平、氯米帕明、米帕明、马普替林；新型抗抑郁药，例如曲唑酮、氟西汀、氟伏沙明、帕罗西汀、舍曲林、西酞普兰、度洛西汀、瑞波西汀、文拉法辛、米氮平、米安色林、吗氯贝胺、噻奈普汀、安非他酮；抗焦虑药，例如地西泮、硝西泮、氯硝西泮、劳拉西泮、咪达唑仑、艾司唑仑、阿普唑仑；非苯ニ氮卓类促睡眠药，例如唑吡坦、佐匹克隆、扎来普隆、丁螺环酮、坦度螺酮；以及抗肿瘤药物，抗艾滋药物，免疫抑制剂等。根据本发明的血液制品中，可以只含有ー种药物，也可以含有两种以上的药物。但是由于有些药物在检测中会相互干扰检测结果，所以根据本发明优选只含有ー种药物的血液制品。在本发明中，所述药物的“代谢产物”是指母药经过人体代谢，例如通过肝药酶代谢后，存在于血清中的代谢产物。所述代谢产物例如氟哌啶醇代谢为产生的还原氟哌啶醇，氯氮平代谢产生的去甲氯氮平和N-O-去甲氯氮平，利培酮代谢产生的9-羟利培酮，阿米替林代谢产生的去甲替林，盐酸多塞平代谢产生的去甲多塞平，盐酸氯米帕明代谢产生的去甲氯米帕明，米帕明代谢产生的去甲米帕明，马普替林代谢产生的去甲马普替林，氟西汀代谢产生的去甲氟西汀，盐酸文拉法辛代谢产生的去甲文拉法辛，地西泮代谢去甲地西泮等。在根据本发明的质控血清中，母药与代谢药物的比例为I : 20到20 I之间。根据本发明的质控血清可以是高浓度质控血清，中浓度质控血清，或者低浓度质控血清。在本发明中，“高浓度质控血清”是指用来对高值药物(和/或其代谢产物)浓度进行检测的质控血清，该高浓度质控血清中的药物(和/或其代谢产物)浓度通常在药物(和/或其代谢产物)的阈浓度高限和中毒浓度之间。“低浓度质控血清”是指用来对低值药物(和/或其代谢产物)浓度进行检测的质控血清，该低浓度质控血清中的药物(和/或其代谢产物)浓度通常在最低检测限与药物(和/或其代谢产物)的最低有效浓度之间。“中浓度质控血清”是指用来对药物(和/或其代谢产物)有效治疗浓度进行控制的质控血清，其浓度介于高浓度质控血清与低浓度质控血清之间。通常将两个浓度水平以上的质控血清配合成套使用，例如用于质控使用的一个质控血清组包括一个高浓度质控血清、ー个中浓度质控血清和一个低浓度质控血清，或者一个质控血清组包括一个高浓度质控血清和一个中浓度质控血清。可以通过将外源性药物及其代谢产物添加入处理过的血清基质来制备根据本发明的质控血清。例如，将血清基质反复冻融3次，然后用3000转/分钟的离心机离心20分钟，将上层血清在60°C孵育10小时，弃去底层沉淀，再用5000转/分钟的高速冷冻离心机离心20分钟，使上层血清透过定性滤纸，使用布氏漏斗抽滤，再经过0. 45微米滤膜过滤和砂芯负压过滤，获得处理过的血清基质。然后将药物及其代谢产物按所需浓度加入血清基质，进行震荡使药物及其代谢产物充分溶解，获得质控血清。
根据本发明，优选药物及其一种或多种代谢产物本来就存在于血清中，而非外源性添加入血清。也就是说，根据本发明，优选质控血清是服药患者血清的混合血清。由于有些药物在人体内实际上会代谢为十几甚至几十种代谢产物，而这些代谢物中有些无药理活性，另一些则有部分药理活性。绝大多数代谢物都没有相应的标准品，难以通过外源性添力口，因而患者混合血清与外源添加药物及其代谢物的血清相比，最大的优点在于服药患者混合血清能够更好地覆盖全部主要的代谢产物，从而获得更真实的质量控制。个体差异在药物代谢过程中起着十分重要的作用，服用同等剂量药物的不同患者，母药和代谢物的浓度可能相差几十倍，在这些药物浓度下，一些患者治疗无效，而另一些患者则甚至可能出现中毒症状。所以药物和代谢物浓度范围相对较宽，质控血清浓度要 尽可能宽的覆盖这些浓度，以判断工作曲线范围内测定结果的质量是否合格。从统计学角度看，选取服药患者数量越多，越能避免单个患者因服药剂量、服药频率或个体差异等原因对混合血清的药物浓度形成的干扰。因而根据本发明，优选10个以上服药患者血清的混合血清，更优选50个以上服药患者血清的混合血清，还更优选100个以上服药患者血清的混合血清，最优选500个以上服药患者血清的混合血清。在本发明中，“服药患者血清”是指通过服药患者知情同意以后采集的血清。根据本发明，可以在患者末次服药后15分钟至7天内进行血清采集。如果出现以下情形，不能作为根据本发明的服药患者血清使用该患者传染病检测结果为阳性例如该患者甲型肝炎抗体检测结果为阳性，或该患者乙肝抗体或抗原检测结果为阳性，或该患者丙型肝炎抗体检测结果为阳性，或该患者梅毒抗体检测结果为阳性，或该患者艾滋病抗体检测结果为阳性；该患者血清为异常状态即该患者血清为乳糜状态，或该患者血清为溶血状态，或该患者血清为黄疸状态,或该患者血清为乳糜/溶血、乳糜/黄疸、溶血/黄疸和乳糜/溶血/黄疸的混合状态。采集以后经过诸如过滤-离心-孵育灭活等处理，以保证质控血清内药物和代谢物保持稳定。可以先将服药患者的血清混合以后再进行处理，或者将服药患者血清分别处理以后再混合。例如，将服药患者血清分别反复冻融3次，然后用2000转/分钟的离心机离心30分钟，将上层血清在53°C孵育10个小时，弃去底层沉淀，再用5000转/分钟的高温冷冻离心机离心20分钟，使上层血清透过定性滤纸，使用布氏漏斗抽滤，再经过O. 45微米水性滤膜过滤和砂芯负压过滤，然后混合，获得服药患者血清的混合血清。所述服药患者血清的混合血清属于中浓度质控血清，可以通过向该服药患者血清的混合血清中加入相应药物及其代谢物以获得高浓度质控血清，也可以通过向服药患者血清的混合血清中加入不含药物血清基质以获得低浓度质控血清。即，可以将所述服药患者血清的混合血清作为依据本发明的血清基质。本发明还公开了一种制备血液制品的方法，该方法包括以下步骤a.处理血清基质；b.向处理过的血清基质添加药物及其一种或多种代谢产物，所述药物与所述代谢产物的浓度比为I : 20到20 I之间。所述“处理”是指采用一定方法，保证血清基质的稳定性和均一性符合使用要求，处理一般包括去固、灭活和除杂的步骤。去固是指除去血清中残余的固形物，例如少量纤维蛋白及红细胞残片等；灭活是指消除可能残留的细菌和病毒的感染力；除杂是指进一步去除血清中的非液相杂质成分，例如滤除灭活过程后仍然存在的细菌等。根据本发明，通过反复冻融、离心、孵育、冷冻离心或者这些方法的组合处理血清基质，可以保证血清基质的稳定性和均一性符合使用要求。例如可以这样处理血清基质将血清基质反复冻融3次，然后用3500转/分钟的离心机离心15分钟，将上层血清在54°C孵育10个小时，弃去底层沉淀，再用5000转/分钟的高温冷冻离心机离心20分钟，使上层血清透过定性滤纸，使用布氏漏斗抽滤，再经过O. 45微米滤膜过滤和砂芯负压过滤。然后将药物及其代谢产物按所需浓度加入血清基质，所述药物与所述代谢产物的浓度比为I : 20到20 I之间，通过震荡等方式使药物及其代谢产物充分溶解，制得质控血清。例如向处理过的血清基质中加入氯氮平和去甲氯氮平，使氯氮平和去甲氯氮平的浓度均为 1600ng/ml。
本发明还公开了另一种制备血液制品的方法，该方法包括以下步骤a.收集若干个服药患者的血清；b.分别处理上述血清；c.将上述处理过的血清混合。所述“处理”和对患者血清的要求如前所述。例如在患者知情同意后，在服用氯氮平3个小时后采集他们的血清。根据本发明，在患者服药后15分钟至7天内均可采集血清。共采集16名服药患者的血清，分别处理这些患者的血清反复冻融3次，然后用3000转/分钟的离心机离心20分钟，将上层血清在56°C孵育7个小时，弃去底层沉淀，再用5000转/分钟的高温冷冻离心机离心20分钟，使上层血清透过定性滤纸，使用布氏漏斗抽滤，再经过O. 45微米滤膜过滤和砂芯负压过滤。然后将这些处理后的患者血清混合，得到根据本发明的血液制品。本发明还公开了又一种制备血液制品的方法，该方法包括以下步骤a.收集若干个服药患者的血清；b.将上述血清混合；c.处理上述混合血清。所述“处理”和对患者血清的要求如前所述。例如在患者知情同意后，在服用氯氮平I天后采集他们的血清。共16名患者，将这些患者的血清混合，然后进行处理反复冻融3次，然后用3000转/分钟的离心机离心20分钟，将上层血清在62°C孵育4个小时，弃去底层沉淀，再用5000转/分钟的高温冷冻离心机离心20分钟，使上层血清透过定性滤纸，使用布氏漏斗抽滤，再经过O. 45微米滤膜过滤和砂芯负压过滤。处理后可以得到根据本发明的血液制品。根据本发明制备的血液制品，除了可用作质控血清外，还能用于直接作为对照血清以判断服用药物的患者血液药物浓度和代谢物种类及其浓度是否正常。
具体实施例方式实施例I将健康人血清基质反复冻融3次(-20°C冷冻4小时，室温条件下化冻4小时，此为一个循环，如此重复三次)，然后用3000转/分钟的离心机离心20分钟，此步骤的目的是除去血清中残余的少量纤维蛋白及红细胞残片等。将上层血清在60°C恒温水浴中隔水孵育10小时灭活，以除去细菌和病毒的感染力，弃去底层沉淀，再用5000转/分钟的高温冷冻离心机离心20分钟，使上层血清透过定性滤纸，使用布氏漏斗抽滤，再经过0. 45微米滤膜过滤和砂芯负压过滤，进一步去除血清中的有形成分，滤除灭活过程中可能仍然存在的细菌等，获得处理过的血清基质。 然后将药物及其代谢产物按所需浓度加入血清基质，进行震荡使药物及其代谢产物充分溶解，制得根据本发明的质控血清QS001-QS053，每组质控血清有，相关浓度详见下表。在本申请的实例(包括实施例和对比例)中，每组质控血清中有三个浓度的，所含物质浓度最高的为高浓度血清，所含物质浓度最低的为低浓度血清，另一个为中浓度血清；每组质控血清中只有两个浓度的，所含物质浓度较高的为高浓度血清，所含物质浓度较低的为中浓度血清。
权利要求
1.一种血液制品，其特征在于所述血液制品含有血清基质、药物和所述药物的一种或多种代谢产物。
2.根据权利要求I所述的血液制品，其中所述药物包括传统抗精神病药、非典型抗精神病药、三环四环抗抑郁药、新型抗抑郁药、抗焦虑药、非苯二氮卓类促睡眠药，以及抗肿瘤药物、抗艾滋病药物、免疫抑制剂。
3.根据权利要求I所述的血液制品，其中所述药物与其代谢产物的浓度比为I: 10到20 I之间。
4.根据之前权利要求任一项所述的血液制品，其特征在于所述血液制品是服药患者血清的混合血清。
5.根据权利要求4的血液制品，其特征在于所述血液制品是10个以上服药患者血清的混合血清。
6.根据权利要求5的血液制品，其特征在于所述血液制品是100个以上服药患者血清的混合血清。
7.根据权利要求6的血液制品，其特征在于所述血液制品是1000个以上服药患者血清的混合血清。
8.一种制备血液制品的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤 a.处理血清基质； b.向处理过的血清基质添加药物及其一种或多种代谢产物，所述药物与所述代谢产物的浓度比为I : 10到20 I之间。
9.一种制备血液制品的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤 a.收集两个以上服药患者的血清； b.分别处理上述血清； c.将上述处理过的血清混合。
10.一种制备血液制品的方法，其特征在于所述方法包括以下步骤 a.收集两个以上服药患者的血清； b.将上述血清混合； c.处理上述混合血清。
全文摘要
本发明公开了一种血液制品，该血液制品含有血清基质和药物及其一种或多种代谢产物。
文档编号G01N33/96GK102621335SQ20111002919
公开日2012年8月1日 申请日期2011年1月27日 优先权日2011年1月27日
发明者果伟 申请人:首都医科大学附属北京安定医院