专利名称：甲胎蛋白胶体金检测试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及免疫胶体金检测试剂盒，具体涉及一种甲胎蛋白胶体金检测试剂盒。
背景技术：
甲胎蛋白(Alpha fetoprotein, AFP)是一种糖蛋白，主要来自胚胎肝细胞,胎儿
出生约两周后甲胎蛋白从血液中消失，因此正常人血清中甲胎蛋白的含量尚不到20微克/升。AFP主要用于胎儿的产前监测，当有神经管缺损、脊柱裂、无脑等情况出现时，AFP可由开放的神经管进入羊水而导致其在羊水中含量显著升高；当有胎儿宫腔内死亡、畸胎瘤等先天缺陷发生时，亦可使羊水中AFP增高；再者，AFP可经羊水部分进入母体血循环，因此，母体血浆AFP在妊娠16-18周异常升高也具有诊断胎儿发育异常的价值，但必须与临床经验结合，以免出现假阳性的错误。成人中，大约80%的肝癌患者、50%生殖细胞肿瘤患者存在血清中AFP升高的现象，其它肠胃管肿瘤如胰腺癌或肺癌及肝硬化等患者也会出现不同程度的升高。AFP还是原发性肝癌的特异性标记物。目前检测AFP的方法主要有⑴双向琼脂扩散，灵敏度3ug/ml，检测时间24_48小时；⑵对流免疫电泳，灵敏度0. 3ug/ml，检测时间1-2小时；(3)间接反相血凝，灵敏度50ng/ml,检测时间3-4小时；(4)放射免疫自显影,灵敏度50ng/ml,检测时间2-3天；(5)放射免疫测定，灵敏度5-10ng/ml，检测时间3-4天。以上方法检测步骤复杂，所需时间较长，不利于基层推广应用，急需一种操作简单、检测灵敏、快速的甲胎蛋白检测试剂盒。

实用新型内容本实用新型的目的在于克服现有技术的缺陷，提供一种甲胎蛋白胶体金检测试剂盒，实现甲胎蛋白的灵敏、特异、快速的检测。本实用新型公开了一种甲胎蛋白胶体金检测试剂盒，包括盒座、盒盖和试剂条，所述盒盖上设有加样孔与观察口，所述盒座上固定有所述试剂条，所述盒盖与盒座卡接；所述试剂条包括塑料薄片以及固定于所述塑料薄片上头尾依次衔接的滤样纸、免疫胶体金纸片、免疫硝酸纤维素膜和吸水纸；所述免疫胶体金纸片上包被有胶体金标记的抗人AFP单克隆抗体I (免疫胶体金)，所述免疫硝酸纤维素膜上设有包被有抗人AFP单克隆抗体II的检测线(T线)以及包被有羊抗鼠IgG的质控线(C线)。较优的，所述检测线靠近所述免疫胶体金纸片，所述质控线靠近所述吸水纸，所述检测线与所述质控线之间相互平行。较优的，所述滤样纸对应所述盒盖上的加样孔；所述免疫硝酸纤维素膜对应所述盒盖上的观察口，并且所述免疫硝酸纤维素膜上的检测线和质控线全部或者部分裸露于所述观察口。检测线对应盒盖上观察口一侧的标记“T”，质控线对应观察口一侧的标记“C”。[0010]较优的，所述加样孔为圆形，所述观察口为椭圆形。 较优的，所述加样孔和观察口为漏斗状开口，漏斗状开口的上口大，下口小。较优的，所述检测线和所述质控线的线宽为0. 7mm。本实用新型试剂盒的盒盖与盒座卡接是指，盒盖与盒座的边缘相匹配，可以通过盒盖与盒座上设有的对应的卡合或扣合连接部件，通过卡合或扣合连接。所述胶体金标记的抗人AFP单克隆抗体I (免疫胶体金)可采用现有技术，用胶体金来标记抗人AFP单克隆抗体I，获得免疫胶体金。使用时，在加样区滴加1-2滴(约50_80iil)全血或血清，再滴加2-3滴缓冲液，在滴加样品后10-15分钟后判读结果。如果血液中含有AFP，其将与固定在免疫胶体金纸片上 的抗AFP单克隆抗体I-胶体金复合物结合形成AFP-抗AFP单克隆抗体I-胶体金复合物， 通过毛细作用层析至硝酸纤维素膜，与硝酸纤维素膜上检测线上的抗AFP单克隆抗体II以及质控线上的羊抗鼠IgG结合，捕获到胶体金颗粒而呈现红色色带，为阳性结果。如果尿样中没有AFP抗原，则玻璃纤维素膜上的抗AFP单克隆抗体I-胶体金复合物与质控线上羊抗鼠IgG结合，质控线捕获到胶体金颗粒而呈现红色色带，为阴性结果。阴性在结果观察窗口内出现一条色带。即质控线(C线)位置出现一条红色线条。表不样品中无甲胎蛋白存在。阳性在结果观察窗口内出现两条色带。即检测线(T线)和质控线(C线)位置各出现一条红色线条，表示样品中有甲胎蛋白存在。无效质控线(C线)不出现。任何情况下，C线均应形成，表示加样和操作正确；C线未出现表明测试结果是不确定的，应重做。本实用新型的甲胎蛋白胶体金检测试剂盒敏感性较高，可达20ng/ml，特异性强、操作简便、检测时间为10-15分钟，十分适合现场使用，实现对AFP的即时检测。

图I :甲胎蛋白胶体金检测试剂盒示意图(I.盒座2.盒盖3.试剂条4.加样孔
5.观察口)图2 :去盒盖的甲胎蛋白胶体金检测试剂盒示意图(I.盒座3.试剂条6.滤样纸7.玻璃纤维垫片8.硝酸纤维素膜9.吸水纸10.检测线11.质控线)图3 甲胎蛋白胶体金检测试剂盒的试剂条侧视示意图(6.滤样纸7.玻璃纤维垫片8.硝酸纤维素膜9.吸水纸12.塑料薄片)
具体实施方式
如图1-3所示的甲胎蛋白(AFP)胶体金检测试剂盒，包括盒座I、盒盖2和试剂条3 ;盒盖2上设有加样孔4和观察口 5，盒座I上固定有试纸条3，盒座I可与盒盖2扣合；试剂条3包括塑料薄片12以及固定于塑料薄片12上头尾依次衔接的滤样纸6、玻璃纤维垫片7、硝酸纤维素膜8和吸水纸9 ;玻璃纤维垫片7上包被有胶体金标记的AFP ;硝酸纤维素膜8上设有包被有抗AFP单克隆抗体II的检测线10以及包被有羊抗鼠IgG的质控线11。盒盖2上的加样孔4为圆形，位于盒盖2 —端，用来加待测样品，且圆形加样孔为漏斗状开口，上口大，下口小，可有效防止样品溢出。盒盖2的中部开有椭圆形观察口 5，椭圆形观察口 5也为漏斗状开口，上口大，下口小。硝酸纤维素膜8上，检测线10和质控线11平行排列，检测线10靠近玻璃纤维垫片7，质控线11靠近吸水纸9。试剂条3上的滤样纸6对应盒盖2上的加样孔4，硝酸纤维素膜8对应盒盖2上的观察口 5，并且硝酸纤维素膜8上的检测线10和质控线11部分裸露于观察口 5。检测线10对应盒盖2上观察口 5 —侧的“T”，质控线11对应盒盖2上观察口 5 —侧的“C”，检测线和质控线的线宽均为0. 7mm，检测线和质控线上的试剂均采用喷点 方式固定在试剂条上面。
权利要求1.一种甲胎蛋白胶体金检测试剂盒，包括盒座、盒盖和试剂条，所述盒盖上设有加样孔与观察口，所述盒座上固定有所述试剂条，所述盒盖与盒座卡接；所述试剂条包括塑料薄片以及固定于所述塑料薄片上头尾依次衔接的滤样纸、免疫胶体金纸片、免疫硝酸纤维素膜和吸水纸，其特征在于，所述免疫胶体金纸片上包被有胶体金标记的抗人AFP单克隆抗体I，所述免疫硝酸纤维素膜上设有包被有抗人AFP单克隆抗体II的检测线以及包被有羊抗鼠IgG的质控线。
2.如权利要求I所述的试剂盒，其特征在于，所述检测线靠近所述免疫胶体金纸片，所述质控线靠近所述吸水纸，所述检测线与所述质控线之间相互平行。
3.如权利要求I所述的试剂盒，其特征在于，所述滤样纸对应所述盒盖上的加样孔；所述免疫硝酸纤维素膜对应所述盒盖上的观察口，并且所述免疫硝酸纤维素膜上的检测线和质控线全部或者部分裸露于所述观察口。
4.如权利要求I所述的试剂盒，其特征在于，所述加样孔为圆形，所述观察口为椭圆形。
5.如权利要求I所述的试剂盒，其特征在于，所述加样孔和观察口为漏斗状开口，漏斗状开口的上口大，下口小。
6.如权利要求I所述的试剂盒，其特征在于，所述检测线和所述质控线的线宽为·0. 7mm0
专利摘要本实用新型涉及胶体金检测试剂盒领域，具体公开了一种甲胎蛋白胶体金检测试剂盒，包括盒座、盒盖和试剂条，所述盒盖上设有加样孔与观察口，所述盒座上固定有所述试剂条，所述盒盖与盒座卡接；所述试剂条包括塑料薄片以及固定于所述塑料薄片上头尾依次衔接的滤样纸、免疫胶体金纸片、免疫硝酸纤维素膜和吸水纸；所述免疫胶体金纸片上包被有胶体金标记的抗人AFP单克隆抗体Ⅰ，所述免疫硝酸纤维素膜上设有包被有抗人AFP单克隆抗体Ⅱ的检测线以及包被有羊抗鼠IgG的质控线。本实用新型的甲胎蛋白胶体金试剂盒敏感性高、特异性强、操作简便省时，检测结果准确、稳定，适合定性及定量检测样本中的甲胎蛋白。
文档编号G01N33/68GK202471726SQ20122006376
公开日2012年10月3日 申请日期2012年2月24日 优先权日2012年2月24日
发明者张国华 申请人:上海凯创生物技术有限公司