专利名称：一种生物芯片的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种生物芯片，它适用于生物、生化领域，尤其用于生化、免疫和分子检测领域。
背景技术：
近年来，随着社会的发展和生物医学技术的进步，每年进行的生化、免疫和分子检测数量都在大幅度增加，不但对试剂反应杯处理速度要求越来越高，而且个性化快速检测的需求也日益迫切。现有技术中用于全自动免疫检测设备的试剂反应杯大都采用联排8孔 *12孔的结构，从试剂反应杯生产的角度来看，整板式结构确实有利于大规模生产反应杯， 同时试剂反应杯数量可以根据实验要求按8孔或12孔的整数倍自由组合，而且整板式结构有利于与目前实验室常见的洗板机、酶标仪等仪器配套使用；但由于生产整板式包被反应杯时，同一板试剂反应杯只能包被相同探针，不利于生物医学检测中多指标联合检测的要求，同时整板式试剂反应杯的结构特点使得自动化检测几乎没有实现的可能。该实用新型可广泛用于医用临床、卫生防疫站、中心血站等检验科检测甲、乙、丙、丁型肝炎，甲状腺、生殖、妊娠类激素、肿瘤标志物、病毒、艾滋病、自身免疫性疾病、寄生虫等疾病方面的医学检测。

实用新型内容本实用新型的目的是为解决上述技术问题，提供一种生物芯片，本实用新型为生化、免疫检测或分子检测的单指标或多指标并行和自动化检测提供全新的微孔板样式和检测模式，可使检测更为稳定，同时避免了样品相互污染问题。一种生物芯片，它包括边框式底座和反应杯，其特征在于所述反应杯包括杯体、 膜和内衬；所述内衬为一边框，该边框能嵌接在所述杯体的内部，所述膜通过所述内衬设置在所述杯体内。本实用新型在用于检测时，其反应的场所不同于微孔板，微孔板是在杯体里反应的，而本实用新型的反应是在膜上进行的；因此能够实现多指标并行、检测更为稳定等技术效果。作为上述技术方案的优选，所述边框式底座与所述反应杯为分体式结构，所述反应杯的杯底面小于或等于杯口面。作为上述技术方案的优选，所述反应杯为组合式结构，所述杯体包括上部体和下部体；所述内衬嵌接在下部体内。作为上述技术方案的优选，所述下部体的底部设置有固定体。作为上述技术方案的优选，所述下部体与上部体之间设置有卡口结构。作为上述技术方案的优选，所述反应杯还包括膜，所述膜通过所述内衬设置在下部体内。作为上述技术方案的优选，所述反应杯还包括密封环，通过该密封环使得所述上部体与下部体密封连接。作为上述技术方案的优选，所述上部体套接与所述下部体外。本实用新型具有以下技术效果1、本实用新型可与实验室常规的洗板机、酶标仪等配套使用，尤其用于生化、免疫和分子检测领域；2、本实用新型提供的一种新型反应杯，可根据实验和检测需要进行自由组合，可以是单人份检测，也可以任意人份数量进行组合，极大方便实验和检验的需求；3、本实用新型提供的一种全新的反应空间模式和后续处理模式，用于生物、生化领域的反应、检测或其它处理过程；4、本实用新型提供了一种全新的生物芯片，可根据实验和检测需要进行自由组合，可以是单人份检测，也可以任意人份数量进行组合，极大方便实验和检验的需求，有利于多指标、多样本的高通量的并行操作和检测，更有利于平面型生物芯片的自动化的实现。

图1 :96孔边框式底座的俯视图；图加一体式方形反应杯的剖面图；图2b 分体式方形反应杯的剖面图；图3 桥式方形反应杯板条的三维图；图4 方形反应杯内衬的三维图；图5 可自由组合式生物芯片的结构示意三维图；图6 可用于全自动化学发光免疫分析的生物芯片的结构示意三维图。
具体实施方式
以下结合附图对本实用新型作进一步详细说明。本具体实施例仅仅是对本实用新型的解释，其并不是对本实用新型的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本实用新型的权利要求范围内都受到专利法的保护。实施例一一种可自由组合式生物芯片一种可自由组合式生物芯片，此生物芯片由反应杯、点有阵列式生物探针的膜和内衬组成。桥式连接反应杯如图2a、图3所示，其内上口四等边长度为7. 5mm,内下底四等边长度为7. 3mm,四周壁厚为0. 6mm,底部壁厚为1mm，高为12mm。桥式连接反应杯可以12个为一条或8个一条；反应杯正面标有向上的箭头如图5 中M所示，以明确生物芯片的点阵方向。如图5中52所示，固定有阵列式生物探针膜的尺寸为7. 2 mmX 7. 2mm，点阵范围为 6.0 _X6. 0_，在左上角点有方向标识点。如图5中51所示，内衬的上口外四等边长度为7. 4mm，下口外四等边长度为 7. 3mm,高度为5_，四周壁厚为0. 2_。以上反应杯材料为聚苯乙烯，硬性、乳白色，内村材料为PVC，有一定软性、乳白色。反应杯和内衬均为一次注塑而成一体式结构。可自由组合式生物芯片的组装如图5所示，用镊子把固定有阵列式生物探针膜52 放入桥式连接反应杯底，再放入具一定软性的内衬51，用镊子往反应杯底推紧以压实固定探针膜，此即可自由组合式生物芯片。此可自由组合式生物芯片在检测的过程中可配合边框式底座使用如图Ia所示。实施例二 一种可用于全自动化学发光免疫分析的肿瘤蛋白芯片—种可用于化学发光全自动免疫分析的肿瘤蛋白芯片，此肿瘤蛋白芯片由组合式反应杯、点有阵列式肿瘤蛋白探针的PDMS膜和内衬组成。组合式反应杯如图2b所示，分为上部体M和下部体沈二部分。下部体沈的底下面有用于固定生物芯片的火柴棒头部形状的插入或嵌入的固定体27。上部体M的下端壁28为内壁缺口型，壁厚为0.7mm，下端缺口高为4mm;上端壁厚为1.4mm。下部体沈的中间偏上位置有内凹槽25，凹槽半径为0. 3mm，凹槽的四个角的内凹为圆弧倒角结构以便于放入密封圈时保持密封性，下部体的壁内、外高为5. 05mm,四边壁厚为0. 7mm，下部体沈的底壁厚为1. 4mm。(不包括下部体固定体27)组合式反应杯的内壁四边上下均相等，均为7. 5mm,内壁高为15mm。组合式反应杯的密封圈的截面直径为0. 4 ；内衬的上口壁外四等边长度为7. 5mm, 下口壁外四等边长度为7. 4mm,高度为5mm，四周壁厚为0. 2mm。反应杯材料为聚苯乙烯，硬性、黑色，内衬材料为PVC，有一定软性、黑色。反应杯和内衬均为一次注塑而成一体式结构。表面接枝并羧基化的PDMS膜厚度为2. 0mm。在PDMS膜上固定肿瘤蛋白探针阵列PDMS膜活化液的配制用去离子水配制0J89g/l^il EDC溶液，0. 3^g/15ml NHS溶液。PDMS膜的活化将表面接枝并羧基化的PDMS膜浸泡入按1 :1 (V/V)混合的 EDC-NHS溶液中震荡活化30分钟，然后用去离子水淋洗三次，氮气下吹干后立即用点样仪通过微量点样技术点制在活化后的PDMS膜上，点样体积为10nl，下列抗体按每种抗体点二个点(上下double点)，点阵为6X6 (共36个点)，其中二个点一个为低质控点，另一个为高质控点；阵列面积范围为6. 2 mmX6. 2mm，在每个阵列左上角点有方向标识点，每块芯片的阵列间距离与特制刀模相配。点样抗体(第一抗体)CA199、AFP、CEA、CA242、CA153、NSE、CA125、HCG、CA724、 C-PSA, f-PSA、SCC、CK19、CYFRA21-1、ProGRP、β 2-MG、TPA 十七种指标。将点样完毕的PDMS膜放入密封袋，过夜；然后用含10% (W/V)甘露醇和0. IM PH7. 2PB缓冲液的封闭液封闭30分钟，封闭结束后，经恒温度20度、湿度30%干燥3小时， 处理完后用特制的刀模压切成每块(固定有肿瘤蛋白阵列的)膜片为7. 4 mmX7. 4mm。芯片组装可用于化学发光全自动免疫分析的肿瘤蛋白芯片组装如图6，把密封圈套入下部体65的凹槽，用镊子把固定有肿瘤单克隆蛋白抗体阵列式探针PDMS膜63放入反应杯下部体65内底(膜正面朝上)，再放入具一定软性的内衬62，用镊子往反应杯底推紧以压实固定探针膜，套紧正面有箭头标识的上部体61并与PDMS膜片上的阵列方向一致，即完成此即此肿瘤蛋白芯片的组装。[0049]检测与分析将肿瘤蛋白芯片插入自动化生物芯片机器的转盘式芯片固定底座上，(以下操作为自动化)将样本IOOul加入反应杯中，在37度恒温装置中震荡温育20分钟，吸干孔内液体。向样品杯中加入ELISA洗液冲洗1分钟(与ELISA洗板机清洗原理一样短针头冲洗， 长针头吸液)，吸干反应杯内液体；再向反应杯中加入IOOul酶标工作液，37度震荡温育20 分钟，吸干反应杯内液体；向样品杯中加入ELISA洗液冲洗1分钟，吸干反应杯内液体；拔除反应杯的上部体，向探针PDMS膜中央(即阵列中央)加入Sul发光液A和Sul发光B的混合液，轻微震荡混勻，室温静置1分钟，由CCD阅读仪进行拍照，最后由分析软件对点阵光信号进行分析给出结果。
权利要求1.一种生物芯片，它包括边框式底座和反应杯，其特征在于所述反应杯包括杯体、膜和内衬；所述内衬为一边框，该边框能嵌接在所述杯体的内部，所述膜通过所述内衬设置在所述杯体内。
2.根据权利要求1所述的一种生物芯片，其特征在于所述边框式底座与所述反应杯为分体式结构，所述反应杯的杯底面小于或等于杯口面。
3.根据权利要求1所述的一种生物芯片，其特征在于所述反应杯为组合式结构，所述杯体包括上部体和下部体；所述内衬嵌接在下部体内。
4.根据权利要求3所述的一种生物芯片，其特征在于所述下部体的底部设置有固定体。
5.根据权利要求3所述的一种生物芯片，其特征在于所述下部体与上部体之间设置有卡口结构。
6.根据权利要求3所述的一种生物芯片，其特征在于所述反应杯还包括密封环，通过该密封环使得所述上部体与下部体密封连接。
7.根据权利要求5所述的一种生物芯片，其特征在于所述上部体套接与所述下部体外。
专利摘要本实用新型属于生物检测技术领域，涉及一种微型生化、免疫检测或分子检测用新型生物芯片。一种生物芯片，包括边框式底座和反应杯，所述反应杯包括杯体、膜和内衬；所述内衬为一边框，该边框能嵌接在所述杯体的内部，所述膜通过所述内衬设置在所述杯体内。本实用新型公开的微孔板为生化、免疫检测或分子检测的单份或多份并行检测提供全新的反应杯样式。
文档编号G01N35/00GK202189053SQ20112029529
公开日2012年4月11日 申请日期2011年8月12日 优先权日2011年8月12日
发明者张灿 申请人:张灿