专利名称：一种农药残留高灵敏度快速检测方法
技术领域：
本发明属于分析检测新方法与新原理，特别涉及利用荧光探针手段检测痕量农药残留的新原理。
背景技术：
有机磷农药和氨基甲酸脂类农药分别是我国第二代和第三代杀虫剂，第一代的有机氯农药在我国已经停止生产。据资料统计，1994年有机磷和氨基甲酸脂类杀虫剂占全球市场的57％，可见其用量之大。近年来，由于有机磷和氨基甲酸酯类农药的滥用或超量使用，因误食带有残留农药而发生急性中毒的事件时有发生。目前，各种类型的农药残留速测仪种类较多，但都存在灵敏度较低的问题，对含有残留农药的农产品难以有效控制。

发明内容
本发明的目的是提供一种高灵敏度的农药残留快速检测方法。
本发明提供了一种农药残留高灵敏度快速检测方法，其特征在于以荧光探针作为指示剂，指示有机磷农药和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶活性抑制程度，或者指示所述农药对有机磷水解酶水解反应的进程；通过荧光强度的变化测定农药残留量。
本发明农药残留高灵敏度快速检测方法中，所述酶最好选用乙酰胆碱脂酶(AChE)。
本发明农药残留高灵敏度快速检测方法的基本原理是有机磷农药和氨基甲酸脂类农药均为胆碱脂酶(ChE)的抑制剂，可以和胆碱脂酶活性中心丝氨酸上的羟基结合，使胆碱脂酶磷酰化或氨基甲酰化，阻止了乙酰胆碱和胆碱脂酶的结合，从而抑制酶活性，引起pH值的变化；通过与共存荧光探针反应，pH值变化能够引起荧光探针的荧光强度发生变化；根据荧光探针在不同PH下荧光强度发生变化的原理，利用荧光检测器检测荧光强度，进而测定农药残留量。
本发明的特点在于能够快速检测农药残留，具有较高的灵敏度。针对有机磷农药和氨基甲酸脂类农药，以呋喃丹为标准物质，检测限可以达到2μg/kg。


图1为呋喃丹农药的色谱图；图2为呋喃丹农药的校正曲线。
具体实施例方式本发明可以采用以下技术方案实现液相色谱系统包括Waters515液相色谱泵，手动针进样器，Waters474荧光检测器，激发波长340-430nm发射波长490-590nm，500mm×0.5mm的毛细管柱，色谱工作站。
本发明同样可以通过流动注射分析方法和荧光光度法实现液相色谱系统分析条件流速0.8ml/min温度恒温(25℃)
进样量10μL实施例1，呋喃丹农药的校正曲线以呋喃丹为标准物质，使用pH＝7的0.05M磷酸缓冲溶液配制不同浓度的呋喃丹标准溶液，按照批量进样法各取20μl与20μl酶混合后得最终浓度0.47μg/kg，0.94μg/kg，1.88μg/kg，4.7μg/kg，9.42μg/kg，18.84μg/kg，23.56μg/kg，31.2μg/kg，47.1μg/kg。依次进样获得峰形如附图1。
获得校正曲线如附图2。校正曲线R2＝0.999，方法检测限2ug/kg(以抑制10％计算)。
权利要求
1.一种农药残留高灵敏度快速检测方法，其特征在于以荧光探针作为指示剂，指示有机磷农药和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶活性抑制程度，或者指示所述农药对有机磷水解酶水解反应的进程；通过荧光强度的变化测定农药残留量。
2.按照权利要求1所述农药残留高灵敏度快速检测方法，其特征在于所述酶为乙酰胆碱脂酶。
全文摘要
一种农药残留高灵敏度快速检测方法，其特征在于以荧光探针作为指示剂，指示有机磷农药和氨基甲酸脂类农药对胆碱脂酶活性的抑制程度，或者指示所述农药对有机磷水解酶水解反应的进程；通过荧光强度的变化测定农药残留量。本发明提供的高灵敏度的农药残留检测的新方法对有机磷农药和氨基甲酸脂类农药的检测限，以呋喃丹为标准物质，检测限可以达到2μg/kg。
文档编号G01N21/76GK1632538SQ200310119499
公开日2005年6月29日 申请日期2003年12月25日 优先权日2003年12月25日
发明者陈吉平, 金盛烨, 倪余文, 郭荣波, 梁鑫淼 申请人:中国科学院大连化学物理研究所