专利名称：中和uu快检试纸的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种中和uu快检试纸，特别是一种大量临床用抗生素后的uu中和 快检试纸及其制备方法。其主要成分是蛋白胨、氯酚红、胰蛋白胨、复合生长因子、酵母 浸膏、马血清、氯化钠、尿素、半胱氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐、土温-80、卵磷酯、滤 纸条。该中和快检试纸能够检测大量临床用抗生素后的生殖道支原体阳性结果，具有指导临 床诊断和治疗的作用，为防止滥用抗菌药物也具有重要意义。非淋菌性尿道炎是由性接触传 染的一种尿道炎，uu是一群大小、结构复杂程度介于细菌与病毒之间，能在人工培养基上增 殖的原核微生物，主要存在人和动物的腔道黏膜上，uu与非淋性尿道炎的发生密切相关，正 常人的泌尿道中也可能有支原体寄生，故认为其致病性类似条件致病菌，其可通过性行为传 播，是非淋性尿道炎的主要病原菌。临床常见症状为非淋性尿道炎、盆腔炎、前列腺炎、阴 道炎、不育不孕症等，也有少数无症状携带者，是近年来越来越引起临床重视的病原体之一。 尤其是大量临床用抗生素后的mi检测十分难检，由于标本中含大量残余抗生素，在恢复培养 uu时继续受到残余抗生素的作用。因此，不釆用去除残余的抗生素措施的实验，应认为是在 设计上的严重失误，依据这样的实验得出的结果是不可靠的。该中和快检试纸采用优质的支 原体基础培养基，富含高营养物和其所需的基质(尿素)及特殊的抑菌剂、中和剂，并添加 氯酚红指示剂组成，可快速准确地检测出大量临床用抗生素后的im。
背景技术：
本发明的目的在于提供一种中和uu快检试纸，引起非淋菌性尿道炎的支原体有 uu、人型支原体和生殖支原体。不同的支原体使用不同的培养试剂。包括液体和固体培养基。 检测uu和人型支原体最可靠的方法是先接种于液体培养基，待有生长后(液体颜色发生改 变)，再接种于固体培养基上，72小时后，如无菌落生长可视为阴性。生殖支原体主要用于 液体培养基14天后无生长可视为阴性。尤其是大量临床用抗生素后的mi十分难检，由于标 本中含大量残余抗生素，在恢复培养uu时继续受到残余抗生素的作用。因此，不采用去除残 余的抗生素措施的实验，应认为是在设计上的严重失误，依据这样的实验得出的结果是不可 靠的。检测方法也复杂、时间长、准确性差。与传统的培养基比较.中和uu快检试纸是以布 氏肉汤为基础,并增加小牛血清含量;将解脲培养基中的酚红指示剂改为氯酚红.将传统培养 基中的固体琼脂粉改为滤纸条；将传统培养基中尤其是大量临床用抗生素后的营养改为增加
土温-80、卵磷酯中和剂；结果中和UU快检试纸与其它类试剂相比具备下列特点中和UU快
检试纸营养丰富、配制简单、选择性强和变色灵敏，与传统试剂比较，检出率高，污染小，临床
应用效果满意.接种样本24小时后，即能得到液体筛选增菌，又能达到固体观察菌落生长情 况，检测方法简单、时间短、准确性强，可快速准确地检测出大量临床用抗生素后的uu。
发明内容
本发明的要点在于选择合适的组分，并进行合理混配，经加温、溶解、混合、 冷却、分装、高温灭菌等工艺而成一种中和uu快检试纸。
本发明选择的培养基配方如下(克/每升蒸馏水)蛋白胨9.0-10;氯酚红0.05-0.06; 胰蛋白胨2. 5-6. 0;复合生长因子10. 0-20. 0;酵母浸膏2. 0-4. 0;无菌马血清80-100ml氯 化钠5.0-6.0; 尿素0.5-0.6;半胱氨酸盐酸盐0.1-0.2;精氨酸盐酸盐3.0-4.0; 土温-80 0.3-0.5;卵磷酯0.5-0.8;蒸馏水加至1000， p服.3±0. 3 ，滤纸条吸附。
中和快检试纸中含有蛋白胨、酵母抽提物、马血清、生长因子等营养物，并加有尿素、 精氨酸底物及酚红指示剂；当有Uu和Mh生长时，尿素和精氨酸被分解，生成的碱性物质引 起pH值上升，培养基由黄变红。中和快检试纸内加有混合抗生素，可抑制泌尿生殖道中G+、 G-细菌和真菌生长。中和快检试纸中不加葡萄糖，分别加入精氨酸及尿素，观察pH变化情 况。Mg不能水解精氨酸及尿素，因此不发生pH变化。脲原体产生的集落稍大而呈深棕色， 故甚易检出。土温-80、卵磷酯中和剂，能够祛除标本中含大量残余抗生素，在恢复培养uu 时继续受到残余抗生素的作用。uu和人型支原体将先接种于液体培养基，待有生长后(液体 颜色发生改变)，再接种于固体培养基上，72小时后，观察无菌落生长。而中和uu快检试纸， 是一种快检试纸条，将快检试纸条加入试管再接种样本24小时后，即能得到液体筛选增菌， 又能达到固体观察菌落生长情况，检测方法简单、时间短、准确性强。培养到的微生物需作 品种鉴定，而分离过程中常规测定的某些非特征，可能提拱线索。由生殖泌尿道分离到的标 本，产生碱性颜色改变而使含精氨酸的基质混浊，则以含人型支原体的可能性最大；在含脲 基质中产生类似改变，则几可肯定为脲原体。提高了试剂的灵敏度、特异性和稳定性。 本发明产品的制备方法是
1) 、将蛋白胨、胰蛋白胨、酵母浸膏、氯化钠、半胱氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐按比
例进行加温、溶解；
2) 、将复合生长因子、土温-80、卵磷酯按比例加热溶解于蒸馏水中，冷至54"C;
3) 、将溶解的l)混合液加入到溶解的2)溶液中，混合、冷却后调ra6. 1-6.3，加氯酚
红；压力蒸汽灭菌115。C， 20-30min，冷至50。C;
4) 、在无菌条件下加马血清、尿素，混合均匀；
5) 、将4号滤纸制成滤纸条，包装；压力蒸汽灭菌115'C， 20-30min,烘干；
6) 、在无菌条件下将滤纸条浸泡液体中，待吸附完全后，无菌条件下烘干；冷藏备用。
本发明具有以下优点(1)中和UU快检试纸营养丰富、配制简单；(2)临床应用效果满
意，解决了床边接种的困难，污染小；(3)检测方法简单、时间短、选择性强、变色灵敏、 检出率高；(4)接种样本24小时后，即能得到液体筛选增菌，又能达到固体观察菌落生长 情况，稳定性好。(5)对相应的临床用抗生素具有切实可靠的中和作用；(6)中和uu快检试 纸本身与抗生素反应的产物，对实验uu无杀灭或抑制其生长的作用。可快速准确地检测出大 量临床用抗生素后的uu。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明
按照下表所列数据(克/每升蒸馏水)及其所述步骤进行配置 配方一
蛋白月东9.0-10.0;氯酚红0.05-0.06;胰蛋白胨2.5-6.0;复合生长因子10.0-20.0; 酵母浸膏2.0-4.0;无菌马血清80-100ml氯化钠5.0-6.0;混合抗生素(万古霉素、氟康唑 与多粘菌素)10-15ml; 尿素0.5-0.6;半胱氨酸盐酸盐0. 1-0. 2;精氨酸盐酸盐3. 0-4. 0; 土温-80 0.3-0.5;卵磷酯0.5-0.8;蒸馏水加至1000， pH6. 3±0. 3 ，滤纸条吸附。配方二
蛋白胨 9.5-10.0; 氯酚红0.05-0.06; 胰蛋白胨4.5-6.0; 复合生长因子 15.0-20.0;酵母浸膏3.0-4.0;无菌马血清85-100ml氯化钠5.5-6.0;混合抗生素(万古 霉素、氟康唑与多粘菌素)12-15ml; 尿素0.5-0.6;半胱氨酸盐酸盐0.1-0.2;精氨酸 盐酸盐3. 5-4. 0; 土温-80 0. 4-0. 5;卵磷酯0. 6-0. 8;蒸馏水加至1000， pH6. 3±0. 3 ，滤纸
条吸附。
配方三
蛋白胨9. 0-9. 5;氯酚红0.05-0.06;胰蛋白胨4. 5-5. 5;复合生长因子10. 0-18. 0; 酵母浸膏2.0-3.0;无菌马血清80-90ml氯化钠5.0-5.5;混合抗生素(万古霉素、氟康唑 与多粘菌素)10-13ml; 尿素0. 5-0. 6;半胱氨酸盐酸盐0. 1-0. 2;精氨酸盐酸盐3. 0-3. 5; 土温-80 0.3—0.4;卵磷酯O. 5-0. 7;蒸馏水加至1000， p服.3±0. 3 ，滤纸条吸附。
权利要求
1、本发明涉及一种中和uu快检试纸，特别是一种大量临床用抗生素后的uu中和快检试纸及其制备方法，其特征在于具有如下配方(克/每升蒸馏水)蛋白胨9.0-10；氯酚红0.05-0.06；胰蛋白胨2.5-6.0；复合生长因子10.0-20.0；酵母浸膏2.0-4.0；无菌马血清80-100ml氯化钠5.0-6.0；尿素0.5-0.6；半胱氨酸盐酸盐0.1-0.2；精氨酸盐酸盐3.0-4.0；土温-800.3-0.5；卵磷酯0.5-0.8；蒸馏水加至1000，pH6.3±0.3，滤纸条吸附。
2、 一种权利要求1所述中和UU快检试纸的制备方法，其特征在于具有如下的步骤1) 、将蛋白胨、胰蛋白胨、酵母浸膏、氯化钠、半胱氨酸盐酸盐、精氨酸盐酸盐按比例进行加温、溶解；2) 、将复合生长因子、土温-80、卵磷酯按比例加热溶解于蒸馏水中，冷至54"C;3) 、将溶解的l)混合液加入到溶解的2)溶液中，混合、冷却后调PH6. 1-6.3，加氯酚红；压力蒸汽灭菌115。C， 20-30min，冷至5(TC;4) 、在无菌条件下加马血清、尿素，混合均匀；5) 、将4号滤纸制成滤纸条，包装；压力蒸汽灭菌115"C， 20-30min，烘干；6) 、在无菌条件下将滤纸条浸泡液体中，待吸附完全后，无菌条件下烘干；冷藏备用。
全文摘要
本发明涉及一种中和uu快检试纸，特别是一种大量临床用抗生素后的uu中和快检试纸及其制备方法。该中和快检试纸能够检测大量临床用抗生素后的生殖道支原体阳性结果，具有指导临床诊断和治疗的作用，为防止滥用抗菌药物也具有重要意义。本发明具有以下优点(1)中和uu快检试纸营养丰富、配制简单；(2)临床应用效果满意，解决了床边接种的困难，污染小；(3)检测方法简单、时间短、选择性强、变色灵敏、检出率高；(4)接种样本24小时后，既能得到液体筛选增菌，又能达到固体观察菌落生长情况，稳定性好；(5)对相应的临床用抗生素具有切实可靠的中和作用；(6)中和uu快检试纸本身与抗生素反应的产物，对实验uu无杀灭或抑制其生长的作用。可快速准确地检测出大量临床用抗生素后的uu。
文档编号G01N33/52GK101566620SQ200810093408
公开日2009年10月28日 申请日期2008年4月21日 优先权日2008年4月21日
发明者奕 曲 申请人:奕 曲