专利名称：一种毛细管电泳多维装置的制作方法
技术领域：
本发明涉及一种毛细管电泳多维装置。
背景技术：
毛细管电泳(CE)是一类简便、高效的分离、分析方法。与平板电泳方法相比，具有高效、快速、样品用量少、易于自动化等诸多优点，在蛋白质、抗体、临床样品等生命活性物质的分离分析方面已得到越来越广泛的应用。
尽管毛细管电泳方法具有较高的柱效，但一维分离模式，由于其应用电压的限制，制约了所采用的分离柱长度，因而也限制了实际柱效和可能达到的峰容量。此外，毛细管柱过细的内径使得其光谱检测光程过小，对检测灵敏度产生很大影响。这些限制和影响在复杂生化样品、环境样品分析中尤为突出。因此，发展具有高峰容量和高检测灵敏度的毛细管电泳方法和技术对于进一步拓宽其应用和研究领域具有十分重要意义。
Gidding等首先提出将两种分离模式结合构成多维体系用于复杂样品的分离的思想[Gidings J.C.，Unified Seperation Sciece，John Wiley&Sons，New York，1991]。采用多维分离技术可以极大地提高系统的峰容量，也可以更方便地与高灵敏检测器联用，更好地完成复杂样品的分离分析任务。目前，二维气相色谱仪已商品化，并成功地用于炼厂气等的分离，达到了非常好的效果。二维平板凝胶电泳(2D PAGE)是目前蛋白组研究中最常规的工具之一。近十年来，二维液相色谱(2D LC-LC)的应用研究也取得了较大的进展。根据毛细管中流体的输运特征，采用电切换的方法进行多维分离的技术在毛细管芯片分离中已有应用，尤其是在人类基因组研究中得到了较好的发展。尽管最近几年不少文献报道了在芯片上实现不同模式CE的组合[孙玉娥、关亚风分析化学，1997，25(7)，745-749]、[Rocklin，R.D.，Ramsey R.s.；J.M.Anal.chem.2000，72，5244-5249；]、[Gottschlich，N.；Jacobson，S.C.；Culbertson，C.T.；Ramsey，J.M.Anal.chem.，2001，73，2669-2674]、[Ramsey，J.D.；Jacobson，S.C.；Culbertson，C.T.；Ramsey，J.M.Anal.Chem.，2003，75，3758-3764；2-5]，但由于芯片的分离通道太短，并不能满足对于复杂样品峰容量的要求，同时这种方法也不适于大分子活性蛋白等样品，检测灵敏度较低也限制了其对痕量组分的分离分析。
近年来，CE实现了和其它分离模式间的联用，包括与液相色谱(LC)的联用[Hooker，T.F.；Jeffery，D.J.；Jorgenson，J.W，Chem.Anal.，1998，146，581-612]、[Moore，A.W.Jr.，Jorgenson，J.W.，Anal.Chem.1995，67，3456-3463]、[Liu，Z.Y；Lee，Milton L.J.Microcolumn Sep.，2000，12(4)，241-254]、[Manabe，Takashi，Electrophoresis，2000，21(6)，1116-1122]、[Neuhoff，Volker，Electrophoresis，2000，21(1)，3-11]、[Bushey，M.M.；Jorgenson，J.W.，Anal.Chem.，1990 62(10)，978-984]、[Tang，Q.；Harrata，A.K.；Lee，C.S.，Anal.Chem.，1997 69(16)，3177-3182]、[Chen，J.Z.；Balgley，B.M.；DeVoe，D.L.；Lee，C.S.Anal.Chem.，2003，75，3145-3152]，得到了与传统二维凝胶电泳谱图类似的结果。对于毛细管电泳-毛细管电泳的二维联用(2D CE-CE)也有人做了初步的尝试[Michels，D.A.；Hu，S.；Schoenherr，R.M.；Regine，M.；Eggertson，M.J.；Dovichi，N.J.，Molecular and Cellular Proteomics，2002，1，69-74]、[Sheng，L.；Pawliszyn，J.；Analyst，2002；127；1159-1163Chromatogr]、[Mohan，D.；Lee，C.S.，Electrophoresis，2002，23 3160-3167]、[Yang，C.；Liu，H.C.；Yang，Q.；Zhang，L.Y.；Zhang，W.B.；Zhang，Y.K.，Anal.Chem.，2003，75，215-218]、[Yang，C.；Zhang，L.Y.；Liu，H.C.；Zhang，W.B.；Zhang，Y.K.，J.Chromatogr.A，2003，1018，97-103]、[刘和春，田燕，杨春，张维冰，张玉奎，色谱，2003，21(5)446-450]、[刘和春，杨春，杨青，张维冰，张玉奎，分析化学，2004，32(3)273-277]，这些方法是借助于柱与柱之间的接口，基于柱间电动或机械切换实现样品由一根毛细管柱进入另一根毛细管柱，可以使峰容量得到较大的提高。2D CE-CE分离技术用于复杂生物样品分离、分析具有非常重要的意义，近来人们已逐渐注意到多维分离的优势，基于毛细管电泳的多维分离将成为分离科学中新的研究热点。
接口技术是实现多维分离的关键。由于毛细管柱进样量极小(ng级)，切换过程中极小的样品损失也将会给分析结果产生较大的影响。此外，柱外效应在毛细管电泳分离系统中对柱效的影响较一般柱分离系统更为显著，因此必须采用零(或尽可能小)死体积接口，并且尽可能避免切换系统中经过有小角度的流路，避免不必要的峰形展宽。
目前多维分离系统常用的接口有定时切换和连续置换两种，相对而言，前者的分离能力更强，操作更灵活，但对仪器条件的要求较高，以目前的微加工技术还难于达到毛细管柱对柱外死体积的要求，因此一般在细内径高效液相色谱/毛细管电泳、二维液相色谱等系统中采用。
至今所报道的二维或多维毛细管电泳联用接口(包括十字交叉的四通接口、阀/进样环以及微透析中空纤维膜接口)都无法克服过大的死体积导致过高的柱外效应，因而存在样品向接口池扩散，组分丢失、进样过程中样品稀释和堆积等现象，最终会大大地损失整个分离系统的分辨率和柱效，无法保证较好的重现性。另外，现有的接口基本存在结构比较复杂、价格昂贵、制作过程烦琐。尽管微透析中空纤维膜结构简单，然而它除了存在难以克服的较大柱外死体积外，还存在不耐用，易残留气泡、杂质，使用寿命短等缺点。
多维分离/分析技术的联用需要合适的接口。Jorgenson等人设计的凝胶色谱/液相色谱/毛细管电泳组成的多维分析，采用激光束控制技术进样，分析过程中样品连续通入电泳槽，在入口处将流入的样品用激光束分解掉。该接口技术不适于不同毛细管电泳模式的联用。
张祥民等设计了用于微柱液相色谱/毛细管电泳二维系统的接口，使用了一种套管技术，将液相毛细管柱和电泳柱固定在同轴线上，两端距离约150μm，并在液相色谱柱末端加一可移动的套管。在两根柱子连接点垂直方向通过电泳缓冲液，并保持有一定量的溶液通过两根柱子间的狭缝。当套管移动至狭缝，屏蔽溶液的流动，狭缝内液相色谱流出组分在电泳毛细管柱头开始堆积。加上电压便可以进行电泳进样。进样完毕，移动套管回原位，溶液重新通过狭缝带走液相流出物。因此，通过移动套管便可进行阅断电泳进样操作。这一进样技术有两方面优点减少样品的稀释作用提高灵敏度和重复性提高进样速度并易于自动控制。这些优点对提高两维分离接口的性能相当重要。但该接口技术仍末实现不同毛细管电泳模式的联用。
Hooker等开发了新的接口技术方法，采用透明材料和阀切换技术控制进样过程，该方法具有普适性，但是阀的使用会造成进样不连续，同时存在进样过程中样品稀释和堆集，需要流出液较多等问题。
Dovichi小组报道了一种全自动的CZE-CZE联用系统。该系统改进了Jorgenson的流动门接口，设计了一种十字交叉型接口，在两根毛细管柱连接点垂直方向通过电泳缓冲液，并保持有一定量的溶液通过两柱间的狭缝，通过切换缓冲溶液，可以实现在不同pH下的CZE二维分离。相对细内径的毛细管柱而言，十字交叉型接口存在死体积过大，柱外效应大，进样过程样品稀释，该接口技术不适于毛细管电泳模式的联用。
Deepa Mohan小组和我们的前期研究中，设计了微透析中空纤维膜接口，通过向接口内的中空纤维中添加/脱除含低分子量物质的缓冲溶液，在缓冲溶液连续地流经接口时实现动态冲洗，同时给正在分离的或已分离过的毛细管柱上同时施加电压，以调整从中空纤维中通过的生物大分子的带电性能从而实现CE/CE二维分离。由于中空纤维和毛细管柱的内径不匹配以及中空纤维和毛细管柱因无法衔接紧密而带来死角，因此，这类接口同样会存在较大死体积，柱切换过程中柱效损失较大等问题。
上述所有接口由于存在种种缺陷因而最终限制了其在毛细管电泳二维或多维联用系统中的应用。
由于多维CE分离系统对柱外死体积的要求很高，因而多维CE联用的接口技术一直来取得突破。

发明内容
本发明的目的在于提供一种基于毛细管电泳的多维联用装置(包括毛细管电泳不同模式间的联用(CE-CE)，毛细管电泳与质谱的联用(CE-MS)，以及利用本发明可以避免与电泳高压端直接接触的情况下毛细管电泳与电化学检测器微电极藕联)，该装置中的核心部分—接口，无任何死体积，因而使得多维系统的柱效和峰容量更高。
本发明的技术方案主要是在一根毛细管柱中某一位置处除去一小段聚酰亚胺涂层，这样一根毛细管柱被分为两部分，每部分各自充当一维。再用氢氟酸(HF)腐蚀除去涂层的石英毛细管壁，将管壁腐蚀到成多孔的玻璃膜基质，小分子离子在高压电场的作用下便能自由穿透管壁从而实现导电。利用这种多孔玻璃膜接口设计而成的毛细管电泳多维装置可以快速、简便地实现二维以及多维CE的在线联用。
本发明具有的效果1.具有不同毛细管电泳模式间联用的特点。本发明依据玻璃膜接口具有半通透性的性质，在截留大分子的同时，允许小分子物质自由通过，可以通过它向分离系统中添加小分子(包括酸、碱或盐)，从而方便各种CE模式的自由组合，即多种分离模式的便利连接。
2.柱效高。由于接口是在毛细管柱上原位蚀刻而成，毛细管柱内壁完好无损，因而二维、多维的柱与柱之间不存在任何死体积，使样品分子沿分离通道连续移动，而不向接口池扩散，无组分丢失现象、无进样过程中样品稀释和堆集问题。与现有的二维CE接口相比，本发明接口最大的优点是柱与柱之间实现了真正的零死体积连接，从而保证了系统的高柱效性。
3.结构简单、制作过程简易、成本低廉。本发明接口采用在毛细管柱上原位用HF蚀刻而成，制作过程非常简易，成本极其低廉。
4.寿命长、耐用。尽管多孔玻璃膜基质很脆，特别是在很薄时易断，但是一旦接口被固定在池体内，接口非常耐用。使用后的接口冲洗方便，无气泡、杂质残留。毛细管柱内壁的涂层一旦流失，可以直接在柱内再涂覆。因此，这种毛细管柱上原位接口可反复使用，实验表明本发明接口连续使用几周未见明显变化。
5.能满足和质谱联用的要求，为电泳(CE)或电色谱(CEC)和电喷雾质谱(ESI-MS)联用提供了一无鞘流液接口(sheathless interface)，大大地提高了质谱检测的灵敏度。本发明接口可实现CE-ESI-MS，CEC-ESI-MS等基于毛细管的微柱分离和质谱检测联用系统。设有溶剂置换的功能，能实现缓冲溶液的在线置换，在接口装置中可方便实现改变待分离组分的带电性能等操作，所以本发明接口可用于满足检测系统对缓冲溶液的需要；本发明接口的另一优点是为CE-ESI-MS或CEC-ESI-MS提供了一sheathless interface，对喷入MS的样品无任何稀释，因而使得MS的检测灵敏度显著提高。
6.实现在线毛细管电泳电化学检测。利用本发明接口可以隔离电化学检测器的微电极与电泳高压源高压端电极直接接触，从而屏蔽了电泳高压端所带来的电流噪声对信号测量的干扰。
7.能实现毛细管电泳在线收集。采用本发明接口可以在不断电的情况下实现在线连续收集CE的馏分，避免了频繁断电的离线收集所带来的麻烦。
8.操作方便。采用本发明进行毛细管电泳能够方便地通过维持第一维毛细管柱进样端、第二维毛细管柱出口端及接口处的压力，可以实现二维体系分别在0.001到10MPa的压力下运行；也可以在多维体系中分别实现压力驱动、电渗流驱动或压力、电渗流同时驱动。另外，由于接口密封并承受一定压力，能够抑制分离柱中产生气泡。本发明可采用单一电泳模式，也可在不同电泳模式间联用，还可采用电极共用技术及电渗流调整技术，仅使用一台高压电源即可实现二维、多维毛细管电泳分离。
9.重现性好。本发明接口具有密封性好，只允许小分子离子通过接口管壁而无液流穿过，能保证在压力驱动、电渗流驱动或压力、电渗流同时驱动下进样重现。
10.峰容量更高。本发明接口能够实现不同毛细管电泳模式的自由组合，因此不制约所采用的分离柱长度；另外，二维或多维毛细管电泳技术的实现，使得毛细管电泳一维模式不能完全处理的复杂组分可以通过多维毛细管电泳技术的联用来达到彻底分离与表征，包括二维毛细管柱以后的多维毛细管柱的进样，是以它前面的毛细管柱分离的每个谱峰为基础的，因此，柱效将得到很大提高，同时峰容量也可进一步提高。


图1为本发明接口装置结构示意图。
图2A为本发明多孔玻璃膜接口的横截面扫描电镜图，放大倍数为850×。
图2B为本发明多孔玻璃膜接口的外表面扫描电镜图，放大倍数为100,000×。
图3为以本发明接口为核心所构建的在线毛细管等电聚焦-毛细管区带电泳二维(2D CIEF-CZE)分离平台结构示意图。
图4为本发明一个实施例中细胞色素c的毛细管等电聚焦(CIEF)谱图。
图5为本发明一个实施例中细胞色素c的毛细管等电聚焦-毛细管区带电泳二维(2D CIEF-CZE)分离谱图。
图6为本发明一个实施例中肌球蛋白和血红蛋白混合物的毛细管等电聚焦(CIEF)谱图。
图7为本发明一个实施例中肌球蛋白和血红蛋白混合物的毛细管等电聚焦-毛细管区带电泳二维(2D CIEF-CZE)分离谱图。
具体实施例方式
下面结合实施例和附图对本发明作进一步详细说明。
毛细管柱(河北永年光导纤维厂，50μm I.D.，375μm O.D.)，载体两性电解质ampholyte(pH 3.0-10.0，BioChemika，Switzerland)，γ-甲基丙烯酰氧丙基三甲氧基硅烷(γ-MAPS，98％)，丙烯酰胺(Acrylamide)，N，N，N’，N’-四甲基乙烯基二胺(TEMED，98％)，过硫酸铵(APS，+98％)(美国，百灵威公司)，生物大分子组分为细胞色素c(Cytochrome c)，肌球蛋白(Myoglobin)和血红蛋白(Hemoglobin)(上海生化所产品)，其他试剂为分析纯。所有缓冲液及样品溶液在使用前均需用0.45μm微孔滤膜过滤，且在临用前超声脱气。
毛细管电泳仪为Unimicro Technologies的TriSepTM-2010GV型，包括一台Data Module可调波长紫外-可见检测器、一台CEC control module连续可调高压直流电源；数据采集和谱图处理采用大连依利特公司Echrom98工作站和Echrom98V2.0软件。
图1为实现本发明的接口，该接口整体设计在一个接口池体B上，接口池体为耐氢氟酸(HF)的材料制成，如有机玻璃、聚四氟乙烯等材料；池体内盛放缓冲液；池体口安有一盖，盖上设有电极插口4和缓冲液入口5；池体底部设有一缓冲液出口8；池体两侧中间位置水平地开有一贯穿孔；预先在一根毛细管柱中间位置处除去一段聚酰亚胺涂层，除去的宽度约小于池体内径即可，将上述处理的毛细管插入池体上的贯穿孔内，在池体两侧端各伸出有一毛细管1、2而形成多维毛细管电泳的第一维和第二维，而该毛细管中间除去聚酰亚胺涂层的部分处于池体内缓冲液中；为了稳固安装毛细管，还可以用聚四氟乙烯管(Teflon)7作保护衬托，再用螺栓6固定；用氢氟酸(HF)将除去涂层的石英毛细管壁腐蚀成多孔状(这时该处管壁的厚度一般小于20μm)，制成多孔玻璃膜接口3；请参见图2，为腐蚀的毛细管多孔玻璃膜接口的扫描电镜图，毛细管的内径为50μm，图2A是多孔玻璃膜接口的横截面扫描电镜图，放大倍数为850×；图2B是多孔玻璃膜接口的外表面扫描电镜图，放大倍数为100,000×。
图3为CIEF-CZE二维毛细管电泳装置示意图。多孔玻璃膜接口两端的毛细管分别作为二维分离平台的第一维CIEF(35cm)和第二维CZE(18cm)，在CZE毛细管距离出口端8cm处开一个检测窗口D，将其穿过紫外检器。将第一维毛细管入口端插入CIEF电解池A，第二维毛细管出口端插入CZE电解池C。整个二维系统使用一个高压源，引出两根地线分别插入CIEF电解池A和CZE电解池C并作为阴极，高压源的正极插入接口池B，B上的电极4作为二维公共阳极，电极插入接口池体内与多孔玻璃膜接口3之间留有距离。
本发明的多孔玻璃膜接口可以选择性保留生物大分子(DNA、蛋白质、多肽等)，确保生物大分子样品连续通过多维毛细管实现分离。而小分子离子在电场的作用下可自由穿透接口管壁，调节接口内环境的酸碱度，从而方便地改变生物大分子的电性能，满足不同分离模式的需要。因而，样品在第一维毛细管电泳分离完成后，被第一维初步分离的组分流经接口进入第二维毛细管被进一步分离，实现二维毛细管电泳分离操作。
所述生物大分子组分流经接口时在线向多孔玻璃膜接口添加/脱除含低分子量物质的缓冲溶液，在缓冲溶液连续地流经接口同时实现动态冲洗，同时给正在分离的或已分离过的毛细管柱上同时施加电压，以调整从多孔接口中通过的生物大分子的带电性能，满足不同分离模式的需要。
将通过上述处理的生物大分子组分通过下一接口进入下一维毛细管柱作进一步分离，从而实现多维毛细管电泳，同样小分子物质在外加电场作用下可以自由透过多孔玻璃膜接口，并在其内外达到平衡。
所述生物大分子组分流经膜接口时，在线向接口池内添加/脱除含低分子量物质的缓冲溶液，在缓冲溶液连续地流经膜接口时实现动态冲洗，同时给正在分离的或已分离过的毛细管柱上同时施加电压，以调整从接口中通过的生物大分子的带电性能。
所述的低分子量物质可以为酸、碱、或盐。
所述加压方式为在第一维毛细管电泳分离时只向第一维毛细管柱上施加电压，在第一、二维毛细管电泳分离时向第一、二维毛细管柱上同时施加电压，以此类推，即给予在分离的或分离过的毛细管柱上同时施加电压，所述施加的电压控制在5,000-30,000V范围内。
所述毛细管电泳分离模式分别可以是毛细管等电聚焦电泳(CIEF)、毛细管区带电泳(CZE)、毛细管电动力学色谱(MEKC)或毛细管电色谱(CEC)。
所述电渗流驱动的二维分离系统，通过第一维毛细管柱进样端电极、接口池电极和第二维毛细管柱的出口端电极构成三电极体系，维持二维毛细管柱中的电势梯度，达到优化的分离效果。
所述流体重力驱动的二维分离过程，只需要将第一维毛细管柱进口端抬高一定的高度5～10cm，使第一维被预分离的组分借助于自身的重力依次进入第二维毛细管柱。
所述压力驱动的二维分离，通过在第一维毛细管进样端附近再腐蚀一多孔玻璃膜接口，然后在第一维毛细管柱进口端施加0.001到10MPa的压力，使第一维被分离的组分进入第二维毛细管柱。
二维CIEF-CZE分离过程1.如图3所示。首先用注射器将第一维CIEF毛细管、第二维CZE毛细管以及接口池内灌满CZE分离缓冲液。再用注射器将配制好的蛋白溶液含2.0％Pharmalyte(pH3-10)从第一维注入直到接近接口。第一维的入口电解池装满碱缓冲液，第二维出口池和接口池分别注满酸缓冲液，将相应的电极插入池内。
2.给第一维毛细管柱上施加一定强度的电压，两性载体电解质和蛋白质开始聚焦，电流下降。当电流基本降到一个稳定值时，聚焦完成。
3.将第一维毛细管的入口端抬举一定高度或通过一微流泵在入口端施加0.01-0.1psi的压力并持续一定的时间，聚焦的蛋白区带被缓慢地送入第二维毛细管内，在第二维正高压的驱动下被CZE进一步分离，在波长为280nm下检测。
4.第二维CZE分离后，重复上述过程，直到第一维毛细管内的聚焦蛋白全部被送完。
在上述二维分离体系中，第一维CIEF采用了两步法，它将样品聚焦和检测分成两步，即先将样品聚焦，然后利用压力或电化学原理将聚焦的区带推入接口。CIEF采用两步法需要使用涂层毛细管，以抑制电渗和样品吸附。由于电渗受到抑制，完成聚焦的区带必须借助外力的驱动才能到达接口，压力或电化学力驱动是经常采用的方法。
第二维CZE分离体系以醋酸(HAc)缓冲溶液为分离介质，接口池和CZE毛细管内的分离介质为HAc缓冲溶液。由于多孔玻璃膜对小分子离子H+具有通透性。因此，当来自第一维的蛋白区带到达接口时，蛋白在其背景缓冲溶液的pH低于其pIs条件下带正电荷。由于在接口处施加正高压，且第二维的电场强度高于第一维的场强，接口通道内带正电荷的蛋白质只能向第二维泳动而不会流回第一维，从而避免了被第一维分离的区带再次混合，解决了二维CIEF-CZE系统中溶质的输运。被送入第二维的蛋白在正高压电场的驱动下依据其质荷比(m/z)的不同被进一步分离，实现CIEF-CZE二维毛细管电泳分离。
在所构建的二维分离体系中，第一维CIEF也可采用一步法，通过在缓冲溶液中加入一定浓度的甲基纤维素或其衍生物来动态改性毛细管内壁，利用pH梯度和EOF的共同作用，使蛋白在聚焦中迁移或在迁移中聚焦。通过合理选择高分子聚合物的浓度，确保溶质蛋白在迁移中充分聚焦，同时被聚焦的蛋白随EOF一起流向接口。
图4和图6分别为生物大分子蛋白质经一维毛细管等电聚焦电泳，按等电点不同分离结果的谱图。经过一维等电聚焦电泳初步分离后，以重力驱动，各个峰依次通过接口进入第二维毛细管，先后按照其质荷比(m/z)的不同被进一步分离，顺利实现了CIEF-CZE不同模式的联用分离(图5和图7所示)。因为CZE以CIEF分离的每个谱峰为基础进样的，因此，系统的分辨率、选择性和峰容量都得到很大的提高。
图4所示的谱图，其实验条件为毛细管涂壁，线性聚丙烯酰胺涂层，总长40cm，有效长33cm；阳极液，1.0％(v/v)HAc，阴极液，1.0％(v/v)NH3.H2O；电场强度，400V/cm；检测窗口距阳极池7cm，检测波长，280nm；试样，细胞色素c为1.0mg/mL溶于25mM NaH2PO4-Na2HPO4(pH6.8)，2.0％(v/v)Pharmalyte(pH3-10)，0.25％TEMED。
图5所示谱图，其实验条件CIEF毛细管长33cm，CZE毛细管总长18cm，有效长10cm；检测280nm；CZE运行电压为+11kV，其他条件同图4。
图6所示谱图，其实验条件CIEF毛细管长33cm，CZE毛细管总长18cm，有效长10cm；检测280nm；CZE运行电压为+11kV，其他条件同图4。
图7所示谱图，其实验条件CIEF毛细管长33cm，CZE毛细管总长18cm，有效长10cm；检测280nm；其他条件同图5和图6；A、B、C、D、E分别为经第一维CIEF分离后进入第二维被CZE进一步分离的结果，数据采集从第二维电泳开始。
权利要求
1.一种毛细管电泳多维装置，包括一池体，内部盛放电泳缓冲液和插设电极，池体两侧中间位置水平开有一贯穿孔；一毛细管，中间位置处除去一段聚酰亚胺涂层，用氢氟酸将除去涂层的石英毛细管壁腐蚀成多孔状，制成多孔玻璃膜接口；上述毛细管插设在该贯穿孔内，使池体两侧端各伸出有一段毛细管，以形成多维毛细管电泳的第一维和第二维，多孔玻璃膜接口处于池体内缓冲液中；第一维毛细管与一盛放碱缓冲液的入口电解池相连接；第二维毛细管与一盛放酸缓冲液的出口电解池相连接；一工作高压直流电源，其地线分别插入入口电解池和出口电解池的缓冲液中，正极插入接口池体的缓冲液中，与接口池体内的多孔玻璃膜接口之间有一间距。
2.权利要求1的装置，其特征在于，池体口上安装有一上盖，盖上设有电极插口和缓冲液入口，池体底部设有一缓冲液出口。
3.权利要求1的装置，其特征在于，池体为耐氢氟酸材料制成。
4.权利要求3的装置，其特征在于，耐氢氟酸材料为有机玻璃或聚四氟乙烯材料。
5.权利要求1的装置，其特征在于，毛细管与池体贯穿孔之间有聚四氟乙烯管为衬托。
6.权利要求5的装置，其特征在于，聚四氟乙烯管衬托用螺栓固定。
7.权利要求1的装置，其特征在于，第二维毛细管上开设一检测窗口。
8.权利要求1的装置，其特征在于，对于毛细管等电聚焦模式，池体内为酸或碱缓冲液。
全文摘要
一种毛细管电泳多维装置，包括一池体，内部盛放电泳缓冲液和插设电极；池体两侧中间位置水平开有一贯穿孔；一毛细管，中间位置处除去一段聚酰亚胺涂层，用氢氟酸将除去涂层的石英毛细管壁腐蚀成多孔状，制成多孔玻璃膜接口；上述毛细管插设在该贯穿孔内，使池体两侧端各伸出一段毛细管，以形成多维毛细管电泳的第一维和第二维，多孔玻璃膜接口处于池体内缓冲液中；第一维毛细管与一盛放碱缓冲液的入口电解池相连接；第二维毛细管与一盛放酸缓冲液的出口电解池相连接；一工作高压直流电源，其地线分别插入入口电解池和出口电解池的缓冲液中，正极插入接口池体的缓冲液中，并与接口池体内的多孔玻璃膜接口之间有一间距。
文档编号G01N27/447GK1719244SQ20041006279
公开日2006年1月11日 申请日期2004年7月9日 优先权日2004年7月9日
发明者张玉奎, 刘和春, 朱贵杰, 张丽华, 张维冰 申请人:中国科学院大连化学物理研究所