专利名称：八味沉香制剂的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种药物组合物的质量检测方法，特别涉及八味沉香制剂的质量检测方法，属于中药检测技术领域。
背景技术：
八味沉香丸为藏药，收载于《中华人民共和国卫生部药品标准》藏药分册中，标准编号为WS3-BC-0235-95。沉香收载中国药典2010年版一部，第172页，本品为瑞香科植物白木香Myilaria sinensis (Lo μ r.) Gilg含有树脂的木材。全年均可采收，割取含树脂的木材，除去不含树脂的部分，阴干。木香收载中国药典2010年版一部，第57页，本品为菊科植物木香A μ cklandia lappa decene.的干燥根。秋、冬二季采挖，除去泥沙和须根， 切段，大的再纵剖成瓣，干燥后撞去粗皮。诃子收载中国药典2010年版一部，第173页， 本品为使君子科植物诃子1Terminalia cheb μ la Retz.或绒毛诃子iTerminalia cheb μ Ia Retz. var. tomentella Kurt.的干燥成熟果实。秋冬二季果实成熟时采收，除去杂质，晒干。乳香收载中国药典2010年版一部，第207页，本品为橄榄科植物乳香树Boswellia carterii Birdw.及同属植物Boswellia bhaw-dajiana Birdw.树皮渗出的树脂。分为索马里乳香和埃塞俄比亚乳香，每种乳香又分为乳香珠和原乳香。广枣收载中国药典 2010年版一部，第41页，本品为蒙古族习用药材，为漆树科植物南酸枣Choerospondias axillaris (Roxb) Byrtt et Hill的干燥成熟果实。秋季果实成熟时采收，除去杂质、干燥。 肉豆蔻收载中国药典2010年版一部，第1 页，本品为肉豆蔻科植物肉豆蔻Myristica fragrans Hoytt.的干燥种仁。木棉花收载中国药典2010年版一部，第59页，本品为木棉科植物木棉Gossampin μ s malabarica(DC. )Merr.的干燥花。春季花盛开时采收，除去杂质，晒干。石灰华收载于中华人民共和国卫生部藏药部颁标准第一册第25页(标准编号WS3-BC-0025-卯)。本品为碳酸盐类矿物，主含碳酸钙(CaCo3)。全年均可采集，除去泥土、杂石。八味沉香丸具有清心热，宁心，安神，开窍之功效。用于热病攻心，神昏谵语，冠心病，心绞痛。原标准中的显微鉴别只是说明了鉴别特征，并未指出哪些特征是哪种药材的； 另外原标准中沉香和乳香的鉴别采用统一提取方法和展开剂等条件，标准的重复性和专属性都很差。

发明内容
本发明目的在于公开一种专属性强、重现性好、操作简便的八味沉香制剂的检测方法。本发明目的是通过如下方案实现的。八味沉香制剂的检测方法，该检测方法包括如下显微鉴别和薄层鉴别中的一种或几种A、取八味沉香制剂加水合氯醛透化2-4次，制片，置显微镜下观察，鉴别各味药材的形态特征，其中木香的主要形态特征菊糖多见，表面显放射状纹理；木棉花的主要形态特征非腺毛碎片多见，壁稍厚，平直或稍弯曲，有的胞腔中含深色颗粒状物；诃子的主要形态特征内果皮石细胞呈类圆形、椭圆形、长条形或不规则形，有的延长呈纤维状，或有分枝，壁厚，孔沟明显，有的胞腔内含黄棕色物；B.乳香、木香的薄层鉴别取八味沉香制剂1-5重量份，研细，加丙酮5-30体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液浓缩至1_3体积份，作为供试品溶液；另取乳香、木香对照药材各0. 1-2重量份，加丙酮5-30体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液浓缩至1_3体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含乳香、木香的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成乳香、木香阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0. 001-0. 01体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以 5-15 0.2-2的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和0 40min，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.诃子的薄层鉴别取八味沉香制剂2-6重量份，研细，加70%乙醇10-50体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液蒸干，残渣加2_8体积份乙醇使溶解，作为供试品溶液； 另取诃子对照药材0. 5-2重量份，加70%乙醇10-50体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液浓缩至2-8体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含诃子的阴性样品， 并按所述供试品溶液的制备方法制成诃子阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010 年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0. 001-0. 01体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2-15 1-6 0.2-2的三氯甲烷-丙酮-甲酸为展开剂，薄层板置展开缸中饱和 0 40min，展开，取出，晾干，喷以10%的三氯化铁溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；所述八味沉香制剂原料药组成为沉香80-120重量份、肉豆蔻20-120重量份、广枣45-120重量份、重量份、诃子80-320重量份、乳香25-80重量份、木香80-200重量份、木棉花45-100重量份、石灰华30-150重量份。本发明八味沉香制剂的鉴别优选为B.乳香、木香的薄层鉴别取八味沉香制剂3重量份，研细，加丙酮25体积份，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至2体积份，作为供试品溶液；另取乳香、木香对照药材各0. 5 重量份，加丙酮25体积份，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至2体积份，制成对照药材溶液； 按原料比例及制法，配置不含乳香、木香的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成乳香、木香阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0.005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9 1的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；C.诃子的薄层鉴别取八味沉香制剂4重量份，研细，加70%乙醇30体积份，超声处理30min，滤过， 滤液蒸干，残渣加5体积份乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取诃子对照药材1重量份，力口 70 %乙醇30体积份，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至5体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含诃子的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成诃子阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0. 005 体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7 3 1三氯甲烷-丙酮-甲酸为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以10%的三氯化铁溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。所述八味沉香制剂原料药组成优选为沉香100重量份、肉豆蔻100重量份、广枣 100重量份、诃子100重量份、乳香50重量份、木香175重量份、木棉花75重量份、石灰华 50重量份；所述八味沉香制剂原料药组成优选为沉香100重量份、肉豆蔻40重量份、广枣 65重量份、诃子(去核)300重量份、乳香60重量份、木香100重量份、木棉花65重量份、石灰华120重量份；所述八味沉香制剂的制法为；以上八味，粉碎成细粉，过蹄，混勻，加适量水制丸， 阴干即得；或取所述八味沉香制剂原料药，粉碎成细粉，过筛，混勻，混勻，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂，如丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂等。本发明所述重量份和体积份的关系为千克/升，克/毫升。


图1按照部颁标准鉴别方法鉴别沉香的薄层色谱图(置紫外光灯365nm下检视)从左至右依次为1 4 本发明实施例1制备的样品、5 6 沉香对照药材、7 沉香阴性对照8 乳香对照药材、9 乳香阴性对照、10 13 本发明实施例8制备的样品。图2按照部颁标准鉴别方法鉴别乳香的薄层色谱图(喷以5%的香草醛硫酸溶液)从左至右依次为1 4 本发明实施例1制备的样品、5 6 沉香对照药材、7 沉香阴性对照8 乳香对照药材、9 乳香阴性对照、10 13 本发明实施例8制备的样品。图3本发明鉴别方法鉴别乳香、木香的薄层色谱图从左至右依次为1 3 本发明实施例1制备的样品、4 5 乳香对照药材、6 乳香阴性对照、7 9 本发明实施例8制备的样品、10 11 木香对照药材、12 木香阴性对照。图4 本发明鉴别方法鉴别诃子的薄层鉴别图从左至右依次为1 本发明实施例1制备的样品、2 3 本发明实施例8制备的样品、4 5 诃子对照药材；6 诃子阴性对照。本发明对八味沉香丸中药材进行了显微鉴别，并明确指出了哪种药材具有哪些特征；本发明对八味沉香丸中处方药材进行了大量的薄层鉴别研究，试验结果表明，原标准中沉香和乳香的鉴别采用统一提取方法和展开剂等条件，由于斑点显色不清晰，分离度差，重复性，专属性较差，因此取消了沉香的薄层色谱鉴别，在原标准的基础上，新增木香、诃子的专属性薄层鉴别方法，并经过大量的薄层鉴别试验发现乳香和木香鉴别采用统一提取方法和展开剂，与原标准相比重复性和专属性较强，故将原标准中的乳香作修改，符合简便、快速的原则。下述实验例和实施例进一步说明但不限于本发明。试验例1 沉香、乳香的薄层鉴别方法研究1. 1按照部颁标准鉴别方法鉴别沉香和乳香
供试品溶液的制备分别取本发明实施例1、8制备的细粉3g，加丙酮15ml，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至anl，作为供试品溶液1、供试品溶液2。沉香对照药材溶液的制备取沉香对照药材各0. 18g，加丙酮15ml，超声处理 30min,滤过，滤液浓缩至anl，制成沉香对照药材溶液。乳香对照药材溶液的制备取乳香对照药材各0. 18g，加丙酮15ml，超声处理 30min,滤过，滤液浓缩至anl，制成乳香对照药材溶液。沉香阴性样品溶液的制备按处方比例，配制不含沉香的阴性样品，并照上述供试品溶液的制备方法制成沉香阴性样品溶液。乳香阴性样品溶液的制备按处方比例，配制不含乳香的阴性样品，并照上述供试品溶液的制备方法制成乳香阴性样品溶液。吸附剂娃胶G板(青岛海洋化工厂)。点样量供试品溶液、沉香、乳香对照药材溶液和阴性样品溶液各10 μ 1。展开剂甲苯-丙酮-甲酸(8 1 0.2)。显色剂5%的香草醛硫酸溶液(称取Ig香草醛，加20ml浓硫酸使溶解，即得)。结论照薄层色谱法(《中国药典》2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述溶液各10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以甲苯-丙酮-甲酸(8 1 0.2)为展开剂， 展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视，结果见附图1 ；然后喷以5 %的香草醛硫酸溶液，90°C烘烤5分钟，取出，结果见附图2 ；荧光下沉香的斑点和显色后乳香的斑点均显色不清晰，分离度差，重复几次结果仍然不理想，故在此检测方法中取消了沉香的薄层鉴别。1. 2本发明鉴别方法鉴别乳香、木香(1)仪器乳钵、量筒、圆底烧瓶、分析天平、超声波提取器、蒸发皿、点样器、硅胶G薄层板、 层析缸、喷雾瓶。(2)对照药材乳香对照药材、木香对照药材。(3)试剂石油醚(沸程60_90°C)、乙酸乙酯、丙酮、甲醇、浓硫酸、香草醛、蒸馏水、苯、甲苯、 甲酸、环己烷。(4)检验方法提取溶剂的选择分别采用石油醚(沸程60-90°C )、乙酸乙酯、丙酮、甲醇等溶剂为提取溶剂；提取方法的选择分别采用超声提取和冷浸；展开剂的选择分别采用苯-丙酮-甲酸(8 1 0.2)，甲苯-丙酮-甲酸 (8:1: 0.2)，环己烷-丙酮(10 3)，环己烷-乙酸乙酯(9 1)为展开剂。分别选择以上提取溶剂、提取方法和展开剂进行试验，结果如下
权利要求
1.一种八味沉香制剂的检测方法，其特征在于该检测方法通过薄层色谱鉴别方法鉴定所述八味沉香制剂中的乳香、木香；取八味沉香制剂1-5重量份，研细，加丙酮5-30体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液浓缩至1-3体积份，作为供试品溶液；另取乳香、木香对照药材各0. 1-2重量份，加丙酮 5-30体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液浓缩至1_3体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含乳香、木香的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成乳香、 木香阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0.001-0. 01体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以5-15 0. 2_2的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和0 40min，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
2.一种八味沉香制剂的检测方法，其特征在于该检测方法通过薄层色谱鉴别方法鉴定所述八味沉香制剂诃子；取八味沉香制剂2-6重量份，研细，加70%乙醇10-50体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液蒸干，残渣加2-8体积份乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取诃子对照药材0. 5-2重量份，加70%乙醇10-50体积份，超声处理10-45min，滤过，滤液浓缩至2_8体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含诃子的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成诃子阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0.001-0. 01体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以2-15 1-6 0. 2_2的三氯甲烷-丙酮-甲酸为展开剂，薄层板置展开缸中饱和0 40min，展开，取出，晾干，喷以 10%的三氯化铁溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
3.如权利要求1或2所述的检测方法，其特征在于其中所述的八味沉香制剂原料药组成为沉香80-120重量份、肉豆蔻20-120重量份、广枣45-120重量份、重量份、诃子80-320 重量份、乳香25-80重量份、木香80-200重量份、木棉花45-100重量份、石灰华30-150重量份。
4.如权利要求1所述的检测方法，其特征在于其中的乳香、木香的鉴别为取八味沉香制剂3重量份，研细，加丙酮25体积份，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至 2体积份，作为供试品溶液；另取乳香、木香对照药材各0. 5重量份，加丙酮25体积份，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至2体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含乳香、木香的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成乳香、木香阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以9 1的环己烷-乙酸乙酯为展开剂，薄层板置展开缸中饱和 20min，展开，取出，晾干，喷以5%的香草醛硫酸溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
5.如权利要求2所述的检测方法，其特征在于其中的诃子的鉴别为取八味沉香制剂4重量份，研细，加70 %乙醇30体积份，超声处理30min，滤过，滤液蒸干，残渣加5体积份乙醇使溶解，作为供试品溶液；另取诃子对照药材1重量份，加70%乙醇30体积份，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至5体积份，制成对照药材溶液；按原料比例及制法，配置不含诃子的阴性样品，并按所述供试品溶液的制备方法制成诃子阴性样品溶液；照薄层色谱法《中国药典》2010年版一部附录VI B试验，吸取上述溶液各0. 005体积份，分别点于同一硅胶G薄层板上，以7 3 1三氯甲烷-丙酮-甲酸为展开剂，薄层板置展开缸中饱和20min，展开，取出，晾干，喷以10%的三氯化铁溶液，热风吹至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.如权利要求1-5任一所述的检测方法，其特征在于其中所述的八味沉香制剂原料药组成为沉香100重量份、肉豆蔻100重量份、广枣100重量份、诃子100重量份、乳香50重量份、木香175重量份、木棉花75重量份、石灰华50重量份。
7.如权利要求1-5任一所述的检测方法，其特征在于其中所述的八味沉香制剂原料药组成为沉香100重量份、肉豆蔻40重量份、广枣65重量份、诃子(去核)300重量份、乳香 60重量份、木香100重量份、木棉花65重量份、石灰华120重量份。
8.如权利要求1-5任一所述的检测方法，其特征在于其中所述的八味沉香制剂由如下方法制成；以上八味，粉碎成细粉，过筛，混勻，加适量水制丸，阴干即得；或取所述八味沉香制剂原料药，粉碎成细粉，过筛，混勻，混勻，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂。
9.如权利要求6所述的检测方法，其特征在于其中所述的八味沉香制剂由如下方法制成；以上八味，粉碎成细粉，过筛，混勻，加适量水制丸，阴干即得；或取所述八味沉香制剂原料药，粉碎成细粉，过筛，混勻，混勻，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂。
10.如权利要求7所述的检测方法，其特征在于其中所述的八味沉香制剂由如下方法制成；以上八味，粉碎成细粉，过筛，混勻，加适量水制丸，阴干即得；或取所述八味沉香制剂原料药，粉碎成细粉，过筛，混勻，混勻，按药剂学常规方法，加入常规辅料，制成临床上接受的口服制剂。
11.如权利要求9或10所述的检测方法，其特征在于其中所述的口服制剂为丸剂、散齐U、颗粒剂、胶囊剂或片剂。
12.如权利要求8所述的检测方法，其特征在于其中所述的口服制剂为丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂或片剂。
全文摘要
本发明公开一种专属性强、重现性好、操作简便的八味沉香制剂的检测方法，该检测方法包括如下显微鉴别和薄层鉴别。本发明在原标准的基础上，新增木香、诃子的专属性薄层鉴别方法，并经过大量的薄层鉴别试验发现乳香和木香鉴别采用统一提取方法和展开剂，与原标准相比重复性和专属性较强。
文档编号G01N30/90GK102520111SQ20111042429
公开日2012年6月27日 申请日期2011年12月16日 优先权日2011年12月16日
发明者包旭宏, 张国霞, 张樱山, 续艳丽, 陈丽娟 申请人:西藏奇正藏药股份有限公司