专利名称：三聚氰胺快速检测试条的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种三聚氰胺快速检测试条，是用于检测食品或饲料中是否含有 三聚氰胺的简易测试工具。
背景技术：
2007年，在美国发生了多起狗、猫等宠物因食用含三聚氰胺的食品而发生中毒死 亡的“毒粮”事件，2008年9月份，我国爆发了性质恶劣、危害严重的因食用含三聚氰胺奶粉 导致婴幼儿肾结石甚至肾衰竭的“毒奶粉”事件。三聚氰胺引发的食品安全问题受到了国 内外的极大关注。三聚氰胺(Melamine，MEL)又名蜜胺，氰尿三酰胺，是一种重要的氮杂环有机化工 原料，主要用来与甲醛缩合聚合制备三聚氰胺树脂，可用于塑料及涂料工业，也可作纺织物 防褶、防缩处理剂。MEL因其分子中含有大量氮元素，以常用的凯氏定氮法测定产品中的蛋 白质含量时，不能区分这种伪蛋白，因而一些不良厂家将MEL添加到饲料和食品中，以提高 产品中蛋白质的检测数值，降低产品成本，牟取暴利。目前，国内外测定饲料和食品中MEL的方法，主要是采用理化分析方法，包括高效 液相色谱法、液相色谱/质谱联用分析法、气相色谱/质谱联用分析法、电位滴定法、浊度 法、重量法、苦味酸法和升华法等。这些检测方法，待检样品需经一系列复杂的处理净化，从 样品处理到得出检测结果需要2天以上时间，繁琐费时；同时这些检测方法需要大型专门 仪器设备和专业技术人员操作，无法进行现场检测，这也是目前对非法使用三聚氰胺的食 品监控和检测不力的重要原因。
发明内容本实用新型提供一种特异强、灵敏度高，能快速、简便地检测三聚氰胺的检测条， 以适用于三聚氰胺的现场检测，切实保护消费者的利益。一种三聚氰胺快速检测条，含有长条型衬板，衬板的表面从一端到另一端依次粘 贴有样品垫、吸附有三聚氰胺金标抗体的金标结合垫、包被膜及吸水垫，包被膜上印制有三 聚氰胺偶联载体蛋白的隐形检测印迹和羊抗小鼠、兔抗小鼠或羊抗兔的单克隆抗体的隐形 对照印迹，所述的吸水垫是滤纸或滤油纸。所述衬板为硬质塑胶条或不吸水的硬纸条。所述样品垫为玻璃纤维棉或尼龙膜，也可以是聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜。所述包被膜为玻璃纤维棉或纤维素膜。所述三聚氰胺金标抗体为胶体金标记的分子改造的6碳三聚氰胺单克隆抗体或 多克隆抗体，所述三聚氰胺偶联载体蛋白为牛血清白蛋白、鸡卵清白蛋白或人血清白蛋白。试条两端覆有保护膜，一端保护膜覆盖在样品垫、金标结合垫上，保护膜上印制有 样品标记线，该标记线偏向样品垫一侧4 6mm处；另一端保护膜覆盖在吸水垫上。设有由底座和面板组成的外壳，底座设有衬板的定位槽，面板设有观察窗和加样孔。底座和面板之间以凹槽和凸条插接相连。所述隐性检测印迹和隐性对照印迹为线条型、十字型或圆点型。将待测样品溶液滴入本检测试条的样品垫后，待测溶液通过虹吸作用使三聚氰胺 和金标垫中的金标抗体一同向包被膜扩散，并最终渗入吸水垫。此过程中，待测样品中的三 聚氰胺与金标抗体相结合，进而封闭金标抗体上三聚氰胺的抗原结合点，阻止金标抗体与 包被膜上偶联三聚氰胺载体蛋白的检测印迹结合，因此检测印迹为隐性，无显示；对照印迹 的抗体则可与金标抗体结合而变为棕红色，因此，测试结果只有一个棕红色印迹，则表示样 品含三聚氰胺，为阳性。反之，如果样品溶液中不含三聚氰胺，则金标抗体与包被膜上的检 测印迹偶联三聚氰胺载体蛋白结合，使检测印迹变为红综色，从而包被膜上的对照印迹和 检测印迹均变为棕红色，表示检测结果为阴性。如果包被膜上没有棕红色线显示，或只有检 测印迹显色，而对照印迹不显色，则表明试纸条已失效。综上所述，本三聚氰胺检测试条的金标结合垫以胶体金标记高亲和力的三聚氰 胺单克隆或多克隆抗体为基础制成，特异性强，敏感性高，检出三聚氰胺最低限量可达到 50ng/mL· 10分钟内即可判定被检样品液的检测结果，检测结果直观显示，简单明了，准确， 不易出现假阳性或假阴性等人为误判。试条结构简单，无需任何其它试剂和仪器，检测成本 低，操作简便、快速、时效性强，特别适用于口岸、集贸市场、加工企业和养殖场户等现场实 时检测，具有广阔的市场前景和社会效益。

图1是三聚氰胺快速检测试条结构示意图。图2是图1的俯视图。图3是设有壳体的三聚氰胺快速检测试条结构示意图。图4是图3的俯视图。图中1 一衬板，2—样品垫，3 —金标结合垫，4一包被膜，5—检测印迹，6—对照 印迹，7—吸水垫，8-1—样品浸入端保护膜，8-2—手柄端保护膜，9一标识线，10—加样孔， 11一观察窗，12—面板，13—试纸芯固定槽，14一底座，15—面板凹槽，16—凸条。
具体实施方式
三聚氰胺快速检测条结构如图1，长条型衬板1上，从右端到左端依次粘贴有样品 垫2、吸附有三聚氰胺金标抗体的金标结合垫3、包被膜4及吸水垫7，包被膜4上印制有三 聚氰胺偶联载体蛋白的隐形检测印迹5 (即对应为图4的印迹T)和羊抗小鼠、兔抗小鼠或 羊抗兔的单克隆抗体的隐形对照印迹6 (即对应为图4的印迹C)，吸水垫7可以是吸水滤 纸或滤油纸。衬板1为硬质塑胶条或不吸水的硬纸条，样品垫采用玻璃纤维棉、尼龙膜、聚 偏二氟乙烯膜或聚酯膜；包被膜4采用硝酸纤维素膜、纯纤维素膜或羧化纤维素膜。测试条 右端为测试端，左端为手柄端，两端覆有保护膜8-1和8-2 ；测试端的保护膜8-2覆盖在样 品垫2和金标结合垫3上，该端保护膜上印制有样品标识线9 (见图2)，该标识线偏向样品 垫2 —侧5mm左右。检测样品制备①饲料样将样品磨细，以生理盐水进行1 :2 1 :5稀释，静置沉淀，取上清液作为用于检测的样品液。②奶样取奶样2ml在15°C条件下3000r/min离心5min，除去上层脂肪，取下层液 用生理盐水作1 :2 1 :5稀释，静置沉淀或5000r/min离心5min，取上清液作为用于检测 的样品液。经以上处理的样品液可透过本检测条的保护膜8-2进入样品垫2。检测时，将待测样品液滴入右侧的样品垫2中；控制样品液的滴入量，使扩散范围 不超过标记线9;约10分钟后观察检测结果。如只有印迹C出现棕红色，则判定样品为阳 性，表示样品内含有三聚氰胺。如印迹c和τ同时出现棕红色，即出现两条“| |”有色，则 判定为阴性，样品内不含三聚氰胺。如果没有棕红色线显示，或C不显色而T显色，则表明 本试条已失效。图3、图4表示设有塑料外壳的三聚氰胺快速检测条，外壳由底座14和面板12组 成的，底座14设有使衬板1定位的定位槽13，面板12设有观察窗11和加样10孔。面板 12和底座14之间以凹槽15和凸条16插接相连。观察窗11与包被膜4相对应，是观察判 定结果的窗口，窗口旁印有T和C (见图4)，分别与包被膜4上的隐形检测印迹5和隐形对 照印迹6相对应。本例检测条使用时如图3状态水平放置，从加样10孔滴入样品液，10分 钟内从观察窗11观察检测结果。
权利要求1.三聚氰胺快速检测条，其特征是含有长条型衬板(1)，衬板(1)的上表面从一端到另 一端依次粘贴有样品垫(2)、吸附有三聚氰胺金标抗体的金标结合垫(3)、包被膜(4)及吸 水垫(7)，所述包被膜(4)上印制有三聚氰胺偶联载体蛋白的隐形检测印迹(5)和羊抗小 鼠、兔抗小鼠或羊抗兔的单克隆抗体的隐形对照印迹(6)，所述的吸水垫(7)是滤纸或滤油 纸。
2.根据权利要求1所述的三聚氰胺快速检测条，其特征是所述衬板(1)为硬质塑胶条 或不吸水的硬纸条。
3.根据权利要求1所述的三聚氰胺快速检测条，其特征是所述样品垫(2)为玻璃纤维 棉或尼龙膜。
4.根据权利要求1所述的三聚氰胺快速检测条，其特征是所述包被膜(4)为玻璃纤维 棉或纤维素膜。
5.根据权利要求1或2或3或4所述的三聚氰胺快速检测条，其特征是所述两端覆有 保护膜，一端保护膜(8-1)覆盖在样品垫(2)和金标结合垫(3)上，保护膜上印制有样品标 记线(9)，该标记线偏向样品垫一侧4 6mm ；另一端的保护膜(8_2)覆盖在吸水垫(7)上。
6.根据权利要求5所述的三聚氰胺快速检测条，其特征是设有由底座(14)和面板(12) 组成的外壳，底座(14)设有衬板(1)的定位槽(13)，面板(12)设有观察窗(11)和加样孔 (10)，底座(14)和面板(12)之间以凹槽(15)和凸条(16)插接相连。
7.根据权利要求1所述的三聚氰胺快速检测条，其特征是所述包被膜(4)上的隐性检 测印迹(5)和隐性对照印迹线(6)为条型、十字型或圆点型。
专利摘要本实用新型涉及一种三聚氰胺快速检测试条，含有长条型衬板，衬板的表面从一端到另一端依次粘贴有样品垫、吸附有三聚氰胺金标抗体的金标结合垫、包被膜及吸水垫，包被膜上印制有三聚氰胺偶联载体蛋白的隐形检测印迹和羊抗小鼠、兔抗小鼠或羊抗兔的单克隆抗体的隐形对照印迹。本试条的金标结合垫以三聚氰胺单克隆或多克隆抗体为基础制成，特异性强，敏感性高，检出三聚氰胺最低限量可达到50ng/ml，10分钟内即可判定被检样品液的检测结果。
文档编号G01N33/577GK201845016SQ201020577448
公开日2011年5月25日 申请日期2010年10月27日 优先权日2010年10月27日
发明者吴艳涛, 张小荣, 张睿, 李旭辉, 蒋原, 薛峰, 赵红霞, 陶宏锦, 高海岗 申请人:扬州大学, 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心, 苏州艾瑞德生物科技有限公司