专利名称：牛乳免疫球蛋白g定量技术及相关特异性抗体检测技术的制作方法
技术领域：
本发明属于检测技术领域，具体是一种牛乳及保健品中免疫球蛋白G定量技术及相关特异性抗体检测技术。
牛奶中由于存在若干物质如脂肪、杂蛋白质，掩盖了免疫球蛋白G及相关的特异性抗体反应，所以不能采用一般的人体酶标试剂盒来检测特异性抗体；同时由于牛奶中免疫球蛋白G及其相关抗体的分子量较小，目前国内还没有一种有效简捷的方法来定量牛奶以及保健食品中的免疫球蛋白G；新西兰及澳大利亚的检测技术复杂，一般条件难以操作，不够实用。
本发明的目的是针对现有技术的不足，提供一种简捷易于操作而效果好的免疫球蛋白G定量技术及相关特异性抗体的检测技术。
本发明的技术方案是这样的本发明采用特殊方法对牛乳及保健品作暴露隐蔽性免疫活性预处理，即将原来被遮掩的免疫球蛋白G及相关特异性抗体暴露出来，从而可直接使用人体酶标试剂盒进行检测特异性抗体；利用免疫增效技术，采用最适抗原抗体配比及相应仪器动态定量免疫球蛋白G。
本发明暴露隐蔽性免疫活性预处理是这样实现的将牛乳及乳制品进行脱脂，去除杂蛋白质，杂蛋白质主要是指酪蛋白。其中脱脂可采用离心脱脂，去蛋白质采用一定PH条件下乙酸与乙酸盐缓冲沉淀去除。
本发明免疫增效技术是指添加免疫增效剂，免疫增效剂采用聚乙二醇、氯化钠、蒸馏水制成，它可使抗原抗体复合物颗粒增大，可辨性增强。
本发明免疫增效技术也可用血细胞悬浮吸附技术。
本发明的最适抗原抗体配比可根据微量浊度法来测定。
本发明在定量时，采用酶标仪代替直接目测，提高分辨率。
本发明由于采用了暴露隐蔽性免疫活性相应处理技术，可直接使用人体酶标试剂盒检测特异性抗体；同时利用免疫增效技术，免疫球蛋白G分子聚集，使生成的相应抗原抗体复合物颗粒增大，可辨性增强，并可被定量检出。
本发明实施例一、牛乳中免疫球蛋白G相关特异性抗体检测技术1、对牛乳作暴露隐蔽性免疫活性预处理技术，将牛乳用离心法脱脂(4000转/分，10分钟)，或用乙醚抽取，取中下部浊液去除杂蛋白质，将PH控制在4.6，用0.05mol乙酸与乙酸盐缓冲沉淀，取中、下层清液；为保持样品稳定，可采用1％鸡蛋清液覆盖“封闭”抗原/抗体。
2、采用人体酶标试剂检测免疫球蛋白G相关特异性抗体。
二、牛乳中免疫球蛋白G定量技术1、在牛乳中添加免疫增效剂，免疫增效剂采用聚乙二醇5.6克，氯化钠0.9克、蒸馏水100mol制成，或采用3％兔纯红细胞吸附技术达到免疫增效效果。
2、用微量浊度法(MFT)测定抗原抗体最适配比。
3、采用酶标仪定量测出牛乳球蛋白含量，酶标仪波长选择在490mm。
权利要求
1.一种牛乳免疫球蛋白G相关特异性抗体检测技术，其特征在于对牛乳及保健品作暴露隐蔽性免疫活性预处理，直接采用人体酶标试剂盒进行检测特异性抗体。
2.据权利要求1所述的牛乳免疫球蛋白G相关特异性抗体检测技术，其特征在于暴露隐蔽性免疫活性预处理是将牛乳及乳制品进行离心脱脂，用乙酸与乙酸盐缓冲液沉淀去除。
3.一种牛乳免疫球蛋白G定量技术，其特征在于利用免疫增效技术，采用最适抗原抗体配比及相应仪器动态定量。
4.据权利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技术，其特征在于免疫增效技术是指在牛乳中添加免疫增效剂，免疫增效剂采用聚乙二醇、氯化钠、蒸馏水制成。
5.据权利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技术，其特征在于免疫增效技术采用血细胞悬液吸附技术。
6.据权利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技术，其特征在于最适抗原抗体可根据微量浊度法来测定。
7.据权利要求3所述的牛乳免疫球蛋白G定量技术，其特征在于采用酶标仪定量。
8.据权利要求6所述的牛乳免疫球蛋白G定量技术，其特征在于酶标仪的波长在490mm。
全文摘要
本发明涉及一种免疫球蛋白G定量技术及相关特异性抗体检测技术,采用特殊方法对牛乳及保健品作暴露隐蔽性免疫活性预处理技术,利用人体酶标试剂盒进行检测特异性抗体;采用免疫增效技术,采用最适抗原/抗体配比及相应仪器定量出免疫球蛋白G,本发明使用方便,经济实用。
文档编号G01N33/53GK1296184SQ9912148
公开日2001年5月23日 申请日期1999年11月16日 优先权日1999年11月16日
发明者徐明灶, 程越夫 申请人:徐明灶, 程越夫, 金华迪耳保健饮品有限公司