专利名称：一种检测痰液中结核杆菌的方法
技术领域：
本发明属于微生物检测领域，具体涉及一种检测痰液中结核杆菌的方法。
背景技术：
肺结核病在我国是一种常见的传染病，其发病率和发病人数在世界上均较高。除 CT等影像外，检查痰液内结核杆菌是最常见和最可靠的诊断方法，目前已广泛地运用在临床。检查痰液结核杆菌的方法最常见的有两种，一种是auramine染色，行荧光显微镜检查； 另一种是嗜酸性染色，明视野显微镜检查。前一种方法检查结核杆菌的敏感性较后一种方法尚。由于每例痰样本需要2-3张玻片，每张玻片需要检查100个视野以上，因此，检查医生需要长时间来检查每例样本，每天只能完成20例左右的痰样本的检查。医生水平高低、结核杆菌在痰内的含量多少等因素均可影响检查的阳性率。国外报道一般显微镜检查结核杆菌的阳性率在20 60%左右，为了提高结核杆菌的检出率，国外有少数公司正在研发全自动图像分析系统来提高结核杆菌的敏感性和特异性。全自动痰液结核杆菌识别系统可自动扫描、自动聚焦、自动摄像及自动识别结核杆菌。对比人工诊断，该系统识别痰液结核杆菌的敏感性和特异性达到90%以上，并且操作简便快捷，重复性和质控性较强。此系统将是更准确、更敏感快捷的诊断方法，能为肺结核患者提供一种可靠而方便的诊断方法。从而降低结核病的死亡率，节省了大量的医疗成本， 创造了巨大的经济和社会效益。

发明内容
本发明的目的在于提供一种检测痰液中结核杆菌的方法，该方法可以大幅度减少医生诊断时的工作量，同时更准确、更敏感快捷的对结核杆菌进行诊断。为了实现本发明的目的，发明人提供了如下技术方案—种检测痰液中结核杆菌的方法，包括如下步骤(1)将痰液薄层均勻涂在2-3张玻片上，自然干燥，加热固定后用Auramine 0染色，然后通过酸性酒精脱色和复染；(2)将染色后的玻片放在显微镜下，用摄像头对玻片进行扫描图像；(3)采集聚焦最清晰的图像，对图像进行预处理，对预处理后的图像进行分割；(4)提取分割后细胞的形状特征，利用计算的特征值对细胞进行自动分类，从而检测出痰液中是否存在结核杆菌。所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其中步骤O)中所述的摄像头是高清彩色荧光140万像素摄像头。所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其中在对痰液内的结核杆菌进行检测识别时，利用结核杆菌的长条形特征和边缘较光滑的特征对结核杆菌进行识别。所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其中若系统检测出玻片上有结核杆菌，医生可通过玻片复位进行显微镜下的复核。所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其中对痰液中的细胞进行嗜酸性染色， 然后将复染后的玻片放在显微镜下，医生通过镜下复核功能，对系统检测出的结核杆菌进行复核。与现有技术相比，本发明具有如下优点和显著的进步本发明提供的方法可以大幅度减少医生诊断时的工作量，同时更准确、更敏感快捷的对结核杆菌进行诊断。具体表现为，本发明首先对摄像头采集的图像进行预处理，然后对图像进行分割，计算分割后的图像的形状特征，根据这些特征值利用机器学习的方法对分割后的图像进行分类，最后，系统排列出检测出的结核杆菌图像。同时该系统还提供了在显微镜下进行复核的功能，医生可对可疑的目标进行镜下复核。另外，若系统检测出有结核杆菌，则可对该标本进行常规染色， 自动平台可自动将复染后的玻片移动到有结核杆菌的位置，医生可直接在显微镜下对系统检测的结果进行核实。


图1为用荧光染色剂对痰液样本进行染色后的图像，图中方框为检测到的结核杆菌。图2为用荧光染色剂对痰液样本进行染色后的图像，图中方框为非结核杆菌。
具体实施例方式由于结核杆菌在荧光显微镜下呈现出长条状的特征，而其它的杂物如痰液中的杂质、染色剂残留等的长条状的特征不明显，且形状不规则。所以，本发明首先对摄像头采集的图像进行预处理，然后对图像进行分割，计算分割后的图像的形状特征，根据这些特征值利用机器学习的方法对分割后的图像进行分类，最后，系统排列出检测出的结核杆菌图像。同时该系统还提供了在显微镜下进行复核的功能，医生可对可疑的目标进行镜下复核。 另外，若系统检测出有结核杆菌，则可对该标本进行常规染色，自动平台可自动将复染后的玻片移动到有结核杆菌的位置，医生可直接在显微镜下对系统检测的结果进行核实。以下是本发明的具体实施例，对本发明的技术方案做进一步作描述，但是本发明的保护范围并不限于这些实施例。凡是不背离本发明构思的改变或等同替代均包括在本发明的保护范围之内。实施例11.将痰液薄层均勻涂在2-3张玻片上，自然干燥，加热固定后用Auramine 0(金胺 0)染色，然后通过酸性酒精脱色和复染；2.将染色后的玻片放在显微镜下，用高清彩色荧光140万像素摄像头对玻片进行扫描，系统将自动进行聚焦；3.采集聚焦最清晰的图像，对图像进行预处理；4.对预处理后的图像进行分割；5.提取分割后的目标的形状特征；6.利用计算的特征值对目标进行自动分类；7.若系统检测出玻片上有结核杆菌，医生可通过玻片复位进行显微镜下的复核；
8.在必要时可对样本进行常规染色(嗜酸性染色)，然后将复染后的玻片放在显微镜下，医生通过镜下复核功能，对系统检测出的结核杆菌进行复核；9.系统自动打印诊断报告。
权利要求
1.一种检测痰液中结核杆菌的方法，包括如下步骤(1)将痰液薄层均勻涂在2-3张玻片上，自然干燥，加热固定后用Auramine0染色，然后通过酸性酒精脱色和复染；(2)将染色后的玻片放在显微镜下，用摄像头对玻片进行扫描图像；(3)采集聚焦最清晰的图像，对图像进行预处理，对预处理后的图像进行分割；(4)提取分割后细胞的形状特征，利用计算的特征值对细胞进行自动分类，从而检测出痰液中是否存在结核杆菌。
2.如权利要求1所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其特征在于步骤O)中所述的摄像头是高清彩色荧光140万像素摄像头。
3.如权利要求1所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其特征在于在对痰液内的结核杆菌进行检测识别时，利用结核杆菌的长条形特征和边缘较光滑的特征对结核杆菌进行识别。
4.如权利要求1所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其特征在于若系统检测出玻片上有结核杆菌，医生可通过玻片复位进行显微镜下的复核。
5.如权利要求1所述的一种检测痰液中结核杆菌的方法，其特征在于对痰液中的细胞进行嗜酸性染色，然后将复染后的玻片放在显微镜下，医生通过镜下复核功能，对系统检测出的结核杆菌进行复核。
全文摘要
本发明涉及一种检测痰液中结核杆菌的方法，该方法将痰液薄层均匀涂在2-3张玻片上，固定并染色，然后通过酸性酒精脱色和复染，用摄像头对玻片进行扫描图像、分割，提取分割后细胞的形状特征，利用计算的特征值对细胞进行自动分类，从而检测出痰液中是否存在结核杆菌。本发明可对痰液内的结核杆菌进行自动识别，通过荧光染色剂对标本进行染色，然后运用图像分析系统检测出痰液内的结核杆菌。同时，该系统可根据检测出的结核杆菌在玻片上的位置，定位到结核杆菌所在的视野，为医生的复检提供了很大的便利。
文档编号G01N21/27GK102359939SQ201110153090
公开日2012年2月22日 申请日期2011年6月8日 优先权日2011年6月8日
发明者孙小蓉, 黄么姑 申请人:武汉兰丁医学高科技有限公司