专利名称：一种食品中日落黄的检测方法
技术领域：
本发明涉及一种检测食品中日落黄方法，本发明使用膨胀石墨电极作为工作电极，采用差分脉冲伏安法对食品中的日落黄进行检测。属于分析化学领域或食品安全领域。
背景技术：
在食品加工的过程中为了使食品看起来更加诱人，经常添加一些色素。通常添加的色素分为天然色素和人工合成色素两大类。人工合成色素与天然色素相比较色彩鲜艳，性质稳定并且价格低廉，故被广泛的应用于食品行业。我国对在食品中添加合成色素有严格的限制凡是肉类及其加工品、鱼类及其加工品、醋、酱油、腐乳等调味品、水果及其制品、乳类及乳制品、婴儿食品、饼干、糕点都不能使用人工合成色素。只有汽水、冷饮食品、糖
果、配制酒和果汁可以少量使用，一般不得超过1/10000。日落黄是我国批准使用的一种人工合成色素。日落黄又名晚霞黄、夕阳黄、橘黄、食用黄色3号,化学名1-(4’_磺基-Γ-苯偶氮-2-萘酚-6-磺酸二钠，是一种人工合成的偶氮色素，由对氨基苯磺酸重氮化，与2-萘酚-6-磺酸偶合，经精制而得。虽然合成色素的使用提高了食品的视觉效应但合成色素自身没有营养价值，对人体健康也没有任何帮助。因此，日落黄虽然是我国批准使用的合成色素仍有严格的限制，用于果汁饮料、碳酸饮料、配制酒、糖果、糕点、西瓜酱罐头、青梅、乳酸菌饮料、植物蛋白饮料以及虾片等膨化食品中的最大使用量为O. 10 g.Kg'用于糖果包衣和红绿丝中的最大使用量为O. 20 g^Kg'冰淇淋等冷饮制品中的最大使用量为O. 09 g^Kg'果冻中的最大使用量为O. 025 g^Kg'事实上，在巨大经济利益的驱使下，一些不法商贩在食品中滥用日落黄的现象屡禁不止。食品添加剂安全性评价的权威机构-世界粮农组织和世界卫生组织的食品添加剂联合专家委员会对日落黄的安全性进行过评价，认为该添加剂的每日允许摄入量为(Γ2. 5 mg.Kg—1体重。如果人长期或者一次性食用日落黄量超标的食品，可能会引起过敏、腹泻等症状，当摄入量过大，超过肝脏负荷时，会在体内蓄积，对肾脏、肝脏产生一定伤害。因此，开发方便、简单、可行性高的检测方法对日落黄进行检测成为当务之急。目前日落黄的检测方法主要有高效液相色谱法、分光光度法、荧光光谱法、薄层色谱法。色谱法虽然灵敏度高、准确性好，但其样品前处理麻烦、分析时间较长且所需仪器昂贵。分光光度法和荧光光谱法虽然仪器简单、操作简便，但其灵敏度低，选择性不好。电化学方法检测日落黄近年来也有一定的研究，但其工作电极较贵，且要进行修饰才能达到较低的检测线。本发明的电化学分析方法中所使用工作电极为膨胀石墨电极，因膨胀石墨有较强的导电性和吸附能力，作为工作电极进行实验有灵敏度高、检测限较低，且廉价易得的优点。

发明内容
本发明的目的在于提供一种操作简单，灵敏度高，检测限低的方法对食品中日落黄进行检测。
本发明的目的通过以下技术方案，一种食品中日落黄的检测方法，按照下述步骤进行
A.膨胀石墨工作电极的制备
称取一定量的膨胀石墨和石蜡的混合物，其质量比为99:1 ;稍微加热使石蜡融化，搅拌均匀，冷却后取适量填入电极中，抛光至电极表面光滑平整，用去离子水冲洗，即可得到实验所需的工作电极。B.储备液的配制
(I)母液的配制准确称取一定量的日落黄固体用去离子水溶解、稀释定容，配制成浓度为1.0X10_4 mol · L-1的母液。然后取上述一定量的母液用去离子水稀释定容得到浓度范围为I. 0Χ1(Γ8 mol · d 0Χ1(Γ5 mol · Γ1的一系列的母液。(2)不同浓度的日落黄标准液的配制分别取一定量(I)中的不同浓度的母液加·入浓度为O. 5 mol · L—1的BR缓冲溶液作为支持电解质，然后用I mol · L—1的NaOH调节混合液的PH = 6，定容得到一系列的待测标准液；其中所述的日落黄标准液的浓度范围为5. OX 10 9 mol · L 1 2. OX 10 6 mol · L S BR 浓度为 0. I mol · L、C.标准曲线的绘制
分别取适量上述配制的一系列浓度的标准溶液，插入步骤A的膨胀石墨/石蜡电极作为工作电极在开路搅拌富集9 min后，插入饱和甘汞电极作为参比电极和钼丝电极作为对电极，接好伏安仪，使用差分脉冲伏安法在相同的测试条件下进行测试，记录不同浓度对应的峰电流值，得到的数据进行统计后用峰电流的平均值对应相应的标准液浓度值绘制标准曲线。以此建立峰电流值与日落黄浓度的线性关系，所得线性回归方程为I = 4. 8022X IO7C + 11.9539。式中I :峰电流值，单位yA;C:日落黄浓度，单位mol Γ1;线性范围5. OXlO-8 mol · Γ1 I. 5Χ1(Γ6 mol · Γ1 检测限为5· 0Χ1(Γ9 mol · Γ1，线性相关系数R = O. 9985οD.实际检测时，将需要检测的样品进行常规预处理，按照上述实验条件测定其样品对应的峰电流值，根据步骤C的线性回归方程计算即可检测待测样品中日落黄的含量。其中步骤C所使用的电化学工作站为RST 5200，差分脉冲伏安法参数的设定如下脉冲幅度为0.05 V，脉冲周期为0.1 S，脉冲宽度为0.04 S，扫描电压范围为0.4
I.O V。4.本发明的优点和积极效果
本发明的试验方法操作简单、灵敏度高，能够达到较低的检测限。本发明中的膨胀石墨电极具有较强的吸附性和导电性、而且成本低廉，制作过程简单，稳定性较好。


图I为不同浓度日落黄标准液对应的差分脉冲伏安曲线图，对应的浓度范围为
5.O X 10 8 mol · L 1 ^ 2. O X 10 6 mol ^L10图2为该浓度范围内的标准曲线。线性回归方程为1 = 4. 8022 X IO7 C +
II.9539(式中I :峰电流值，单位μΑ。C:日落黄浓度，单位mol ·Ι^)。 检测限为5.0Χ10-9 mol · I/1，相性相关系数 R = 0.9985。具体实施例下面通过具体实施例对本发明作进一步的说明，以下实施例并不能限定本发明的保护范围，只是说明性的。本发明的实验步骤如下
I.膨胀石墨工作电极的制备
称取一定量的膨胀石墨和石蜡的混合物，其质量比为99:1。稍微加热使石蜡融化，搅拌均匀，冷却后取适量填入电极，抛光至电极表面光滑平整，用去离子水冲洗，即可得到实验所需的工作电极。2.储备液的配制
(I)母液的配制准确称取一定量的日落黄固体用去离子水溶解、稀释定容，配制成浓度为1.0X10_4 mol · L-1的母液。然后取上述一定量的母液用去离子水稀释定容得到浓度范围为I. 0Χ1(Γ8 mol · d 0Χ1(Γ5 mol · Γ1的一系列的母液。(2)不同浓度的标准液的配制分别取一定量(I)中的不同浓度的母液加入20mL浓度为O. 5 mol · L—1的BR缓冲溶液(Britton-Robison，是由磷酸、硼酸、醋酸混合而成，向其中加入不同量的氢氧化钠即可得到PH I. 8 11. 9的缓冲溶液。本发明中称取醋酸30. Og、磷酸45. O g、硼酸32. O g，加入适量氢氧化钠至混合液澄清,定容至1000 mL,既得浓度为O. 5 mol -T1的BR)作为支持电解质，然后用I mol -T1的NaOH调节混合液的PH = 6，定容至100 mL既得到一系列的待测标准液。日落黄标准液的浓度范围为5. OX 10_9mol · L-1 2. OXlO-6 mol · Λ BR 浓度为 0. I mol · L'3.标准曲线的绘制
分别取适量上述配制的一系列浓度的标准溶液，插入工作电极(膨胀石墨/石蜡电极)在开路搅拌富集9 min后，插入参比电极(饱和甘汞电极)和对电极(钼丝电极)，接好伏安仪，使用差分脉冲伏安法在相同的测试条件下进行测试，记录不同浓度对应的峰电流值，得到的数据进行统计后用峰电流的平均值对应相应的标准液浓度值绘制标准曲线。以此建立峰电流值与日落黄浓度的线性关系，所得线性回归方程为I = 4. 8022X IO7 C + 11.9539(式中I :峰电流值，单位yA;C:日落黄浓度，单位mol ·Ι^)。 线性范围5. OX 10_8mol Γ1 I. 5X1(T6 mol Γ1 检测限为5· 0Χ1(Γ9 mol .I71，线性相关系数 R = O. 9985。以此为实际样品的测定提供定量标准。实施例I :市售果冻中日落黄含量的检测
(I)样品前处理将市售的某品牌的果冻搅碎，称取10 g于100 mL烧杯中，加入15 mL乙醇浸泡10 min后超声30 min,使得果冻中的色素完全萃取到乙醇溶液中。然后在5000r ^irT1的速度下离心上述固液混合物10 min，取上层清夜，用去离子水洗涤下层固体至洗涤液无色后再洗涤2 3次，合并清液于100 mL容量瓶中定容备用。(2)取(I)中定容后的溶液5. O mL加入20 mL浓度为0. 5 mol · L—1的BR，然后用I mol 调混合液的pH为6，定容至100 mL，作为待测溶液。取一定量的待测液于25 mL烧杯中在搅拌的条件下富集9 min后，按照本发明所述实验条件测定其对应的峰电流值。在相同的试验条件下平行测试4组，然后根据标准曲线即可计算得到对应的浓度，计算平均值之后得“空白含量”。(3)取(I)中定容后的溶液5. O mL加入20 mL浓度为0.5 mol七1的BR，再加入7. O mL浓度为I. OX 10_5 mol .L-1日落黄溶液配制加标样品溶液，然后用I mol .L-1的NaOH调混合液的PH为6定容至100 mL，此时混合液中加入日落黄的浓度为7. OX 10_7 mol · Γ1(316.66 μ g.L—1)，此为“加标量”。然后按上述过程分别配制加标量为5.0X 10_7 mol -T1(226. 19 μ g · L-1)和 7. OX 10_8 mol · L-1 (31. 67 μ g · L-1)的加标待测液。每组加标样品溶液均按照(2)实验过程进行，在相同的实验条件下平行测4次取平均值，其结果列于表I。(4)根据实验结果计算该品牌果冻中日落黄的量为5. 74 mg · Kg'表I某市售果冻的加标检测结果
权利要求
1.一种食品中日落黄的检测方法，其特征在于按照下述步骤进行 A.膨胀石墨工作电极的制备 称取一定量的膨胀石墨和石蜡的混合物，其质量比为99:1 ;稍微加热使石蜡融化，搅拌均匀，冷却后取适量填入电极中，抛光至电极表面光滑平整，用去离子水冲洗，即可得到实验所需的工作电极； B.储备液的配制 (1)母液的配制准确称取一定量的日落黄固体用去离子水溶解、稀释定容，配制成浓度为1.0X10_4 mol · L-1的母液；然后取上述一定量的母液用去离子水稀释定容得到浓度范围为I. OXlO-8 mol · d OX 1(T5 mol · Γ1的一系列的母液； (2)不同浓度的日落黄标准液的配制分别取一定量(I)中的不同浓度的母液加入浓度为O. 5 mol吨―1的BR缓冲溶液作为支持电解质，然后用I mol -Γ1的NaOH调节混合液的PH = 6，定容得到一系列的待测标准液；其中所述的日落黄标准液的浓度范围为5.0X10—9mol · L-1 2. OXlO-6 mol · Γ1，BR 浓度为 0. I mol · L-1 ； C.标准曲线的绘制 分别取适量上述配制的一系列浓度的标准溶液，插入步骤A的膨胀石墨/石蜡电极作为工作电极在开路搅拌富集9 min后，插入饱和甘汞电极作为参比电极和钼丝电极作为对电极，接好伏安仪，使用差分脉冲伏安法在相同的测试条件下进行测试，记录不同浓度对应的峰电流值，得到的数据进行统计后用峰电流的平均值对应相应的标准液浓度值绘制标准曲线；以此建立峰电流值与日落黄浓度的线性关系，所得线性回归方程为I = 4. 8022 X IO7C + 11.9539 ;式中I :峰电流值，单位yA;C:日落黄浓度，单位mol · L—1 ;线性范围5.OXlO-8 mol · Γ1 I. 5X1(T6 mol · Γ1 检测限为5· 0Χ1(Γ9 mol · Γ1，线性相关系数R = O. 9985 ； D.实际检测时，将需要检测的样品进行常规预处理，按照上述实验条件测定其样品对应的峰电流值，根据步骤C的线性回归方程计算即可检测待测样品中日落黄的含量。
2.根据权利要求I所述的一种食品中日落黄的检测方法，其特征在于其中步骤C的使用的电化学工作站为RST 5200，差分脉冲伏安法参数的设定如下脉冲幅度为0.05 V，脉冲周期为0.1 S，脉冲宽度为0.04 S，扫描电压范围为0.4 1.0 V。
全文摘要
本发明一种食品中日落黄的检测方法，属于分析化学领域或食品安全领域。利用膨胀石墨疏松多孔的结构具有强吸附能力，将其掺杂一定含量的石蜡磨制成膨胀石墨电极作为工作电极，利用电化学方法对食品中的日落黄进行检测。本发明的检测方法具有灵敏度较高，检测限低，方法简便，结果准确的优点。膨胀石墨电极较其它电极价格低廉、制作过程简单，同时检测成本较低，检测效果较好。
文档编号G01N27/48GK102854234SQ20121025532
公开日2013年1月2日 申请日期2012年7月23日 优先权日2012年7月23日
发明者陈智栋, 祝惠惠, 张静, 王文昌, 申屠超, 何莹 申请人:常州大学, 浙江树人大学