专利名称：一种正品大黄种子的快速检测方法
技术领域：
本发明涉及正品大黄种子的检测方法。
背景技术：
大黄为寥科植物掌叶大黄Rheum palmatum L.、唐古特大黄Rheum tanguticumMaxim, ex Balf.或药用大黄Rheum officinale Baill.的干燥根及根莖。具有 写热通肠，凉血解毒，逐瘀通经的功效。用于实热便秘，积滞腹痛，泻痢不爽，湿热黄疸，血热吐衄，目赤，咽肿，肠痈腹痛，痈肿疔疮，瘀血经闭，跌打损伤，外治水火烫伤；上消化道出血。掌叶大黄分布于甘肃东南部、青海、四川西部、云南西北部及西藏东部；唐古特大黄分布于甘肃、青海、四川及西藏东北部；药用大黄分布于陕西南部、河南西部、湖北西部、四川、云南等地。华北大黄、河套大黄是常见的伪品大黄，易与唐古特大黄等正品大黄混淆。·近年来，由于对野生大黄资源的无计划采挖，导致野生大黄资源逐年减少，全国野生大黄资源已濒临枯竭。为满足市场对优质大黄日益增长的需求量，大黄人工种植规模不断扩大，而品质纯正的种子是药材栽培的前提，是提高药材产量和质量的根本保障。目前，我国大黄种子没有检验标准和质量标准，主要是通过形状、大小、颜色、表皮、饰纹等性状进行鉴别，具有一定的局限性。申请号201110337787. 7，发明名称一种鉴定真伪大黄种子的方法的专利申请公开了一种鉴别真伪大黄种子的方法，它包括如下步骤(I)取待检种子，提取待检种子中的大黄酚和大黄素；(2)测定大黄种子中大黄酚和大黄素的含量；(3)计算大黄酚含量/大黄素含量的比值；(4)根据步骤(3)计算的比值判断若比值大于1，判断该种子为正品大黄种子，若比值小于或者等于1，判断该种子为伪品大黄种子。该方法通过种子中大黄酚和大黄素含量的比值来确定大黄种子是否为正品，因精确测定某成分含量较难，误差较大，导致该方法使用不方便，准确度不够高。尤其针对在正品大黄种子中掺杂部分伪品的情况，容易得出错误的结论，难以替代传统检测方法。需寻找一种更为简便、准确、可靠的方法鉴定正品、伪品，以及正伪混合的大黄种子的方法。

发明内容
为了解决上述问题，本发明提供了一种正品大黄种子的检测方法。本发明正品大黄种子的检测方法，它包括如下步骤I)取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，挥去溶剂，酸水解，用有机溶剂萃取，得水层；2)取步骤I)所得水层，加广3倍体积的浓氨水，震摇，无红棕色至棕褐色絮状沉淀，将待检种子鉴定为正品大黄种子。其中，步骤I)所述酸水解，溶液中氢离子的浓度为O. 52^2mol/L ;有机溶剂为乙醚。优选地，所述步骤I)中，将待检种子粉碎成细粉，加甲醇，细粉与甲醇的质量体积比为1:15^25,浸泡30mirT90min，过滤，得滤液，蒸干，加水，再加浓盐酸，盐酸体积为水体积的l/2(Tl/5，加热回流2(T40min，冷却，用乙醚萃取，萃取2次，每次所用乙醚体积为水体积的:Γ5倍，得水层。本发明正品大黄种子的检测方法中，只有纯的正品大黄才不会出现红棕色至棕褐色絮状沉淀，只要待检种子中含有伪品种子，就会出现红棕色至棕褐色絮状沉淀，因此对于正品大黄种子中掺杂部分伪品种子的情况，也很容易将其检出。本发明正品大黄检测方法准确度高、操作方便、简单、快速，可以替代传统检测方法，具有良好的应用前景。显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其它多种形式的修改、替换或变更。以下通过实施例形式的具体实施方式
，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本发明上述内容 所实现的技术均属于本发明的范围。


图I用本发明检测方法检测待检种子的结果；图2用本发明检测方法检测待检种子的结果。
具体实施例方式实施例I本发明检测方法I、检测方法(I)取待检种子；(2)取待检种子细粉I. Og,加甲醇15ml,浸泡30min,滤过,取滤液5ml,蒸干,残洛加水IOml使溶解，再加浓盐酸O. 5ml (所得稀盐酸溶液中氢离子的浓度为I. 09mol/L)，力口热回流20分钟，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次15ml，得水层；取水层，加I倍体积的浓氨水，震摇，观察有无红棕色至棕褐色絮状沉淀；(3)步骤(2)中，水层无红棕色至棕褐色絮状沉淀，将待检种子鉴定为正品大黄种子。实施例2本发明检测方法I、检测方法(I)取待检种子；(2)取待检种子细粉I. 0g，加甲醇20ml，浸泡I小时，滤过，取滤液5ml，蒸干，残渣加水IOml使溶解，再加浓盐酸Iml (所得稀盐酸溶液中氢离子的浓度为I. 09mol/L)，加热回流30分钟，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次20ml，得水层；取水层，加2倍体积的浓氨水，震摇，观察有无红棕色至棕褐色絮状沉淀；(3)步骤(2)中，水层无红棕色至棕褐色絮状沉淀，将待检种子鉴定为正品大黄种子。实施例3本发明检测方法I、检测方法
(I)取待检种子；(2)取待检种子细粉I. Og,加甲醇25ml,浸泡90min,滤过,取滤液5ml,蒸干,残洛加水IOml使溶解，再加浓盐酸I. 5ml (所得稀盐酸溶液中氢离子的浓度为I. 09mol/L)，力口热回流40分钟，立即冷却，用乙醚分2次提取，每次25ml，得水层；取水层，加3倍体积的浓氨水，震摇，观察有无红棕色至棕褐色絮状沉淀；(3)步骤(2)中，水层无红棕色至棕褐色絮状沉淀，将待检种子鉴定为正品大黄种子。实验例I用本发明检测方法检测待检种子I、实验材料
从市场购买的待检大黄种子13批，命名为Sf 11。2、实验方法( I)用传统性状鉴别方法鉴定；(2)按照实施例2检测方法检测。3、实验结果(I)传统性状鉴别方法鉴定结果SI :瘦果三棱形，棱锐，长2毫米，褐色有光泽；果被阔卵形，先端钝，全缘或具不明显的齿，长宽均3 4毫米，有一卵形瘤状突起。鉴定为寥科植物种子，是伪品大黄种子。S2 4和S7 :果实亮黄棕色，长7 8. 5mm,宽约6mm，种子较小呈卵圆形，与果实颜色相近，味潘，栽种后，根据药材的性质，鉴定为华北大黄Rheum franzenbachii Munt.的种子，是伪品大黄种子。S5、S6、S8 :果实亮黄棕色,长7 8. 5mm,宽约6mm,种子较小呈卵圆形，与果实颜色相近，味潘，栽种后，根据药材的性质，鉴定为河套大黄Rhum hotaoense C. Y. Cheng etC. T. Kao的种子，是伪品大黄种子；S9和Sll :果实黄棕色至黄褐色,长7 9mm (果实顶端至基部),宽5 7mm (果实横切面上两果翅翅缘的最大距离)，种子较小呈卵圆形，颜色比果实略深，黄褐色至褐色，味苦，栽种后，根据药材的性质，鉴定为掌叶大黄Rheum palmatum L.的种子,为正品大黄种子；SlO :果实黄棕色至黄褐色,长7 9mm (果实顶端至基部),宽5 7mm (果实横切面上两果翅翅缘的最大距离)，种子较小呈卵圆形，颜色比果实略深，黄褐色至褐色，味苦，栽种后，根据药材的性质，鉴定为唐古特大黄Rheum tanguticum’Maxim, ex Balf,是正品大黄种子。(2)本发明检测方法鉴定结果结果如图Γ2所示
权利要求
1.一种正品大黄种子的检测方法，其特征在于它包括如下步骤 1)取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，挥去溶剂，酸水解，用有机溶剂萃取，得水层； 2)取步骤I)所得水层，加f3倍体积的浓氨水，震摇，无红棕色至棕褐色絮状沉淀，将待检种子鉴定为正品大黄种子。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于步骤I)所述酸水解，溶液中氢离子的浓度为O. 52^2mol/L ;有机溶剂为乙醚。
3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于所述步骤I)中，将待检种子粉碎成细粉，加甲醇，细粉与甲醇的质量体积比为1:15^25,浸泡30mirT90min，过滤，得滤液，蒸干，加水，再加浓盐酸，盐酸体积为水体积的l/2(Tl/5，加热回流2(T40min，冷却，用乙醚萃取，萃取2次，每次所用乙醚体积为水体积的3飞倍，得水层。
全文摘要
本发明公开了一种正品大黄种子的快速检测方法，它包括如下步骤1)取待检种子，粉碎，用甲醇提取，过滤，得滤液，挥去溶剂，酸水解，用有机溶剂萃取，得水层；2)取步骤1)所得水层，加1~3倍体积的浓氨水，震摇，无红棕色至棕褐色絮状沉淀，将待检种子鉴定为正品大黄种子。本发明正品大黄种子的检测方法使用方便，准确度高，成本低廉，市场应用前景良好。
文档编号G01N21/82GK102879394SQ20121037620
公开日2013年1月16日 申请日期2012年10月8日 优先权日2012年10月8日
发明者李敏, 敬勇, 林秋霞 申请人:成都中医药大学