专利名称：一种免疫结合试验方法
技术领域：
本发明属于医学、生物检测技术领域，特别涉及一种新的免疫结合试验方法。
背景技术：
目前，在生物、食品、药物、医学、畜牧等检测中普遍采用的方法有(1)酶联免疫吸附试验，该法适用于在实验室进行检测，检测时间一般需要1小时到数小时，每次可检测较多样品；( 胶体微粒标记免疫层析或渗滤试纸试验，该法使用胶体金、胶体硒作为标记物，可以在实验室内外进行快速检测，一般仅需要10-20分钟，每次可检测单份样品，但检测灵敏度较低，不易定量或半定量，无法满足很多检测的需要。

发明内容
本发明的目的在于提供一种对具有免疫活性样品进行定性和/或定量检测的新方法。与现有方法相比较，本发明的方法既有酶联免疫吸附试验较高精密性、灵敏性，又有胶体微粒标记免疫层析或渗滤试纸试验方便性、快速性。本发明的另一个目的在于提供简化免疫结合实验方法的同时，提高检测的灵敏度，满足定性、半定量和定量分析的要求。为达上述目的，本发明采用如下技术方案以酶联免疫吸附试验的吸附材料为载体，以胶体微粒和/或染料为标记物，采用简化的酶联免疫吸附实验步骤，使用简单仪器和/或肉眼进行测量判读。本发明通过采用酶联免疫吸附试验常用的吸附材料，如聚苯乙烯、聚氯乙烯，将其制作成为表面平整、便于放入简单仪器进行测量的条形或板形，并且在其两个相对的平整面上设置检测区，吸附参与免疫反应的抗体和/或抗原和/或核酸，并进行了封闭、干燥等常规加工(注专业术语称为“包被”)，将载体的吸附性能增加了一倍，可以保证整个实验的精密性和灵敏性；通过采用兼有示踪和参与免疫反应的作用的标记物，如胶体金或胶体硒标记的、与包被物配对的抗体、抗原、核酸等，可使整个实验步骤得以简化，方便了非专业人员按说明书进行操作；实验试剂设计为单份，使不需规模化实验的检测成本相对降低； 通过采用比色计等简单仪器进行测量判读，使实验结果定量和/或半定量，提高了实验结果的可信度，增加了判读的容易性；进而，这些简单仪器可以附有通用滤光片，使其满足某一类型实验的需要，也可以针对不同的实验试剂设计和提供专用的本底滤光片、临界值光片，降低非专业人员测量判读的技术门槛。以下列表显示本方法与现有方法主要异同点的对比1本方法与酶联免疫吸附试验主要异同点的对比
权利要求
1.一种免疫结合试验方法，其特征在于，以酶联免疫吸附试验的吸附材料为载体，以胶体微粒和/或染料为示踪物，采用简化的酶联免疫吸附实验步骤，使用简单仪器和/或肉眼进行测量判读。
2.根据权利要求1所述的一种免疫结合试验方法，其特征在于这种试验方法与载体的吸附有关，与层析、渗滤无关；其示踪与胶体微粒和/或染料有关，与酶和底物无关。
3.根据权利要求1所述的一种免疫结合试验方法，其特征在于作为载体的吸附材料， 是酶联免疫吸附试验常用的吸附材料，如聚苯乙烯、聚氯乙烯、硅片，或者是以聚苯乙烯、聚氯乙烯和/或磁性微粒、硅微粒为表面的吸附材料，它们的外观是表面平整、便于放入简单仪器进行测量的条形、板形、块形。
4.根据权利要求3所述的作为载体的吸附材料，其特征在于这一载体材料的检测区表面上，应吸附了参与免疫反应的抗体和/或抗原和/或核酸，进行了封闭、干燥等常规加工(注专业术语称为“包被”)，并且这个载体材料的检测区，并不限于它的某一个面，还包括了这个面的对面。
5.根据权利要求1所述的一种免疫结合试验方法，其特征在于所述的示踪物是胶体微粒和/或染料，但应标记在参与免疫反应的抗体和/或抗原和/或核酸上，是兼有示踪和参与免疫反应作用的结合物。
6.根据权利要求5所述的示踪物，其特征在于这些示踪物可以是胶体微粒，如胶体金、胶体硒、乳胶，也可以是染料，如荧光染料、颜料、显色染料、阳离子染料、分散染料、反应染料、硫化染料、还原染料、直接染料，还可以是进一步增强这些示踪物作用的显色物，如胶体金与银微粒。
7.根据权利要求1所述的一种免疫结合试验方法，其特征在于所述的简化的酶联免疫吸附实验步骤，是指载体上已经包被过的检测区先后与测试样品接触、与标记结合物接触、测量判读等主要实验过程，也可根据需要增加洗涤、增强等辅助实验过程。
8.根据权利要求1所述的一种免疫结合试验方法，其特征在于所述的用于测量判读的简单仪器，依据示踪物的不同，可以是比色计、光度计、光密度计、荧光仪。
9.根据权利要求8所述的用于测量判读的简单仪器，其特征在于这些简单仪器，可以附有通用滤光片，也可以由不同的实验试剂提供专用的本底对照片、临界值对照片。
10.根据权利要求4所述的包被物和权利要求5所述的标记结合物，其特征在于采用不同的包被物与标记结合物组合，可以进行双抗体夹心法、双抗原夹心法、间接法、竞争法、 阻断法、捕获法等免疫吸附实验类型。
全文摘要
一种免疫结合试验方法，属于医学、生物检测技术领域。以酶联免疫吸附试验的吸附材料为载体，以胶体微粒和/或染料为示踪物，采用简化的酶联免疫吸附实验步骤，使用简单仪器和/或肉眼进行测量判读，可进行相应疾病、食品、药物等抗体、抗原或核酸的检测。本发明通过综合采用新型吸附材料、示踪物和简单仪器，在保证整个实验精密性和灵敏性的同时，满足了多种类型实验的需要，提高了实验结果的可信度，简化了实验步骤，增加了判读的容易性，降低了非专业人员使用实验试剂的技术门槛。
文档编号G01N33/53GK102346183SQ20101024191
公开日2012年2月8日 申请日期2010年8月2日 优先权日2010年8月2日
发明者吴佩珊 申请人:吴佩珊