专利名称：一种同时检测雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡的制作方法
技术领域：
本发明涉及 一种同时检测雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡，属于检测雌性 激素的器具技术领域。
背景技术：
雌二醇是应用广泛的性激素，因其可以促进动物生长和提高畜禽瘦肉比，而在畜 牧业中有应用。雌二醇可在动物体内残留，通过食物链危害人体健康，使女性儿童提前发 育，男性儿童乳腺组织发育女性化，男性生殖系统异常化引起病变，并导致女性乳腺癌和子 宫内膜异位症发生率上升，且雌二醇存在明显致癌性，欧美等发达国家相继禁止使用雌二 醇作为饲料添加剂。醋酸甲羟孕酮是一种类留体激素药物，已经用于妇女绝经期综合症疾病的替代治 疗。由于醋酸甲羟孕酮可明显促进动物生长，在美国、澳大利亚、新西兰等国已被批准用作 饲料添加剂，但有严格的停药期。食品中的醋酸甲羟孕酮对人有严重副作用，可抑制人的精 子生成，导致不育。因此动物性食品中的醋酸甲羟孕酮残留对人类，特别是儿童的健康构成 潜在的严重危害。我国和欧盟禁止用它做饲料添加剂，但仍有人非法使用。目前，现有技术对于性激素等饲料添加剂的检测主要有酶免疫检测试剂盒、自动 化免疫分析仪等，这些方法操作过程繁琐、时间长，操作人员须具有一定的专业技术知识才 能操作，因此应用范围受限。也有单一检测雌二醇的胶体金快速检测卡。但到目前为止，没 有同时检测这两种物质的检测器具。

发明内容
本发明的目的在于提供一种能同时检测雌二醇和醋酸甲羟孕酮的器具，克服现有 技术操作繁琐、专业要求高及只能进行单独检查的缺陷。本发明的技术方案一种雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡，它是在长条扁 平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔 (4)，测试条是由支承背板(5)上粘贴五种元件组成支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜
(6)，支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜(10)，另一端部上叠置粘贴样品垫(9)，吸水膜内 端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部， 两者之间夹置粘贴两段胶体金膜，胶体金膜(7)是含抗雌二醇抗体胶体金标记物的玻璃纤 维膜，胶体金膜(8)是含抗醋酸甲羟孕酮抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上 有2条检测带和1条质控带，一条检测带(11)含雌二醇蛋白质偶联物，另一条检测带(12) 含醋酸甲羟孕酮蛋白质偶联物，质控带(13)为抗兔抗体或抗鼠抗体；测试条置入检测卡外 壳内，样品垫正对加样孔，硝酸纤维素膜正对检测窗孔。本发明的有益效果其优点是能同时检测出饲料、动物组织(肌肉和肝脏等)、尿液 中的雌二醇和醋酸甲羟孕酮，易于制备且节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结 果准确。


图1雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡及测试条在外壳内的安置图。1、外 壳，2、测试条，3、检测窗孔，加样孔4。图2雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡的检测试条结构示意图。5、支承背 板，6、硝酸纤维素膜，7、胶体金膜(含抗雌二醇抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜)，8、胶体金 膜(含抗醋酸甲羟孕酮抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜)，样品垫9，吸水膜10。图3检测试条的硝酸玻璃纤维膜上显示印迹示意图。6、硝酸纤维素膜，11 、检测带 (含雌二醇蛋白质偶联物)，12、检测带(含醋酸甲羟孕酮蛋白质偶联物)，13，质控带。
具体实施例方式本发明结合具体实施例参见附图进一步说明如下 实施例1
一种雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡，它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检 测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1和2。检测卡外壳1为长条扁平薄壳状壳 体，长7cm，宽2cm，厚0. 5cm，薄壳壁厚0. lcm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳 座两半联接构成，在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和加样孔4。测试条2放置在检测卡 外壳1的壳座内。测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约6. 0cm，片宽约0. 4cm，厚度小于2. 5mm。 测试条2是多层结构底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约0. 5mm,长6. Ocm,宽 0. 4cm ；支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，硝酸纤维素膜厚0. 5mm，长2_2. 5cm,宽 0. 4cm。硝酸纤维素膜6上有三条间隔开的横向显示印迹带，参见附图3，三条显示印迹带 中，一条是检测带11，含雌二醇蛋白质偶联物；另一条是检测带12，含醋酸甲羟孕酮蛋白 质偶联物，第三条是质孔带13，含抗鼠抗体。支承背板5 —端部上叠置粘贴吸水膜10，支 承背板5另一端部上叠置粘贴样品垫9，吸水膜10内端与样品垫9内端各自分别与硝酸 纤维素膜6 —端搭接，在样品垫9与硝酸纤维素膜6的搭接部，两者之间夹置粘贴两段胶 体金膜，胶体金膜7是含抗雌二醇抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，胶体金膜8是含抗醋 酸甲羟孕酮抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜。胶体金膜7和胶体金膜8厚0. 5-0. 8mm,长 0. 5-0. 6cm,宽 0. 4cm。样品垫 9 厚 0. 5-0. 8mm,长 2cm,宽 0. 4cm。吸水膜 10 厚 0. 5-0. 8mm, 长1. 6-2cm,宽0. 4cm。胶体金膜7、胶体金膜8、样品垫9及吸水膜10与硝酸纤维素膜搭接 长度为0. 1-0. 2cm。吸水膜10材料是吸水纸，样品垫9材料是吸水玻璃纤维膜。测试条2置入外壳1内，样品垫9正对加样孔4，硝酸纤维素膜6正对检测窗孔3。检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金 标记的抗体，在测试带上分别与含雌二醇蛋白质偶联物、醋酸甲羟孕酮蛋白质偶联物，以及 质控带抗兔抗体或抗鼠抗体反应，形成棕红色条带。若样品中有相应的待检雌二醇和醋酸 甲羟孕酮都高于允许值，当样品加入后即与相应的抗体发生反应，而不会与相应的检测带 所含的雌二醇蛋白质偶联物、醋酸甲羟孕酮蛋白质偶联物反应，从而不显色。主要反应的结 果有以下5种情况
1、如果显示检测带11、12和质控带13同时显现棕红色印迹带，表示检测结果为阴性， 说明被检测样品中雌二醇和醋酸甲羟孕酮均低于允许值。
2、反之，检测带11、12不显示颜色，只有质控带13显现棕红色印迹，检测结果为阳 性，表明被检测样品中雌二醇和醋酸甲羟孕酮都高于允许值。3、如果检测带11不显示颜色，检测带12和质控带13同时显现棕红色印迹，检测 结果为阳性，表明被检测样品中雌二醇高于允许值，而醋酸甲羟孕酮低于允许值。
4、如果检测带12不显示颜色，检测带11和质控带13同时显现棕红色印迹，检测 结果为阳性，表明被检测样品中醋酸甲羟孕酮高于允许值，而雌二醇低于允许值。5、如果检测带11、12和质孔带13均不显色，则表明检测试条失效。
权利要求
一种雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡，其特征在于在长条扁平薄壳状的检测卡外壳(1)中设置测试条(2)，检测卡外壳表面有检测窗孔(3)和加样孔(4)，测试条是由支承背板(5)上粘贴五种元件组成支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端部上叠置粘贴吸水膜(10)，另一端部上叠置粘贴样品垫(9)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜一端搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴两段胶体金膜，胶体金膜(7)是含抗雌二醇抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，胶体金膜(8)是含抗醋酸甲羟孕酮抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有2条检测带和1条质控带，一条检测带(11)含雌二醇蛋白质偶联物，另一条检测带(12)含醋酸甲羟孕酮蛋白质偶联物，质控带(13)为抗兔抗体或抗鼠抗体；测试条置入检测卡外壳内，样品垫(9)正对加样孔(4)，硝酸纤维素膜(6)正对检测窗孔(3)。
全文摘要
一种同时检测雌二醇和醋酸甲羟孕酮的双通道检测卡，属于检测雌性激素的器具技术领域。该检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔，壳内有测试条，支承背板中部粘贴硝酸纤维素膜，支承背板一端粘贴吸水膜，另一端粘贴样品垫，吸水膜与样品垫分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴二段胶体金膜,分别是含抗雌二醇及抗醋酸甲羟孕酮单克隆抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜；硝酸纤维素膜上横向有三条间隔开的显示印迹带分别为含雌二醇蛋白质偶联物的检测带、含醋酸甲羟孕酮蛋白质偶联物的检测带及含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本检测卡能同时检测一份样品中两种雌性激素,节省检测费用，使用方便，检测快速，灵敏度高，结果准确。
文档编号G01N33/74GK101957381SQ20101050847
公开日2011年1月26日 申请日期2010年10月15日 优先权日2010年10月15日
发明者吴文晔, 周坚, 熊晓芳 申请人:无锡安迪生物工程有限公司