专利名称：一种复方丹参片的检测方法
技术领域：
本发明涉及药物检测领域，具体涉及一种复方丹参片的检测方法。
背景技术：
复方丹参片是由丹参、三七、冰片为原料加辅料制成的中药制剂，收载于《中华人 民共和国药典》2010年版一部第904页。复方丹参片一般分为三种规格，其中规格(1)为 薄膜衣小片，每片重0. 32g，相当于饮片0.6g;规格(2)为薄膜衣大片，每片重0.8g，相当于 饮片1.8g;规格(3)为糖衣片，相当于饮片0.6g。在《中华人民共和国药典》2010年版一部第904页收载了复方丹参片的质量标准。 其中，复方丹参片的鉴别方法包括取本品5片[规格(1)和规格(3)]或2片[规格(2)]， 糖衣片除去糖衣，研碎，加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，药渣备用，滤液挥干，残渣加乙 酸乙酯2ml使溶解，作为供试品溶液。另取丹参酮II A对照品、冰片对照品，分别加乙酸乙 酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录VI B)试验，吸取上 述三种溶液各4μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以苯-乙酸乙酯(19 1)为展开剂，展 开，取出，晾干。供试品色谱中，在与丹参酮II八对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑 点；喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加热数分钟，在与冰片对照品色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点。在上述鉴别方法中，存在如下缺点首先，使用的展开剂中含有剧毒化学物质苯， 对检测人员的危害大；其次，按照上述方法进行检测，供试品色谱中，在与丹参酮IIA对照品 色谱相应的位置上，斑点的颜色明显不一致，说明该检测方法并不能准确检测供试品中的
丹参酮II A。

发明内容
有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于，提供一种复方丹参片的检测方法，该检 测方法对人体无害，并且能准确的检测出复方丹参片中的活性成分。为了解决上述技术问题，本发明提供一种复方丹参片的检测方法，包括提供待测复方丹参片的供试品溶液；取选自二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A、冰片中的一种溶解在乙酸 乙酯内作为对照品溶液；以石油醚和丙酮的混合物作为展开剂，采用薄层色谱法对所述供试品溶液进行检 测。优选的，所述展开剂中石油醚和丙酮的体积比为7 10 1 3。优选的，所述展开剂中石油醚和丙酮的体积比为8 2。优选的，所述待测复方丹参片的供试品溶液采用如下方法制备取待测复方丹参片的待测部分加入乙醚超声处理，滤过，弃去滤渣，所得滤液蒸 干，残渣加乙酸乙酯使溶解，得到供试品溶液。
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优选的，所述待测复方丹参片中的待测成分采用如下方法获得取待测复方丹参片，糖衣片除去糖衣，磨碎、研细，即得。优选的，所述取待测复方丹参片的待测部分在乙醚中超声处理的时间为2分钟以上。优选的，所述取待测复方丹参片的待测部分在乙醚中超声处理的时间为5分钟。本发明提供一种复方丹参片的检测方法，与现有技术相比，本发明使用石油醚和 丙酮的混合物作为展开剂，采用薄层色谱法对复方丹参片进行检测，由于石油醚和丙酮的 混合物无毒，不含剧毒化合物苯，因此该检测方法对人体无害。检测结果进一步表明，以石 油醚和丙酮的混合物作为展开剂，采用薄层色谱法能准确检测出复方丹参片的活性成分。


图1为本发明实施例1得到的显色前的薄层色谱图；图2为本发明实施例1得到的显色后的薄层色谱图。图3为本发明实施例2得到的显色前的薄层色谱图；图4为本发明实施例2得到的显色后的薄层色谱图。图5为本发明实施例3得到的显色前的薄层色谱图；图6为本发明实施例3得到的显色后的薄层色谱图。图7为本发明实施例4得到的显色前的薄层色谱图；图8为本发明实施例4得到的显色后的薄层色谱图。图9为本发明比较例1得到的显色前的薄层色谱图；图10为本发明比较例1得到的显色后的薄层色谱图。
具体实施例方式为了进一步了解本发明，下面结合实施例对本发明优选实施方案进行描述，但是 应当理解，这些描述只是为进一步说明本发明的特征和优点，而不是对本发明权利要求的 限制。本发明提供的复方丹参片的检测方法的一个实施方案，包括提供待测复方丹参片的供试品溶液；取选自二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A、冰片中的一种溶解在乙酸 乙酯内作为对照品溶液；以石油醚和丙酮的混合物作为展开剂，采用薄层色谱法对所述供试品溶液进行检 测。按照本发明，所述复方丹参片指收载于《中华人民共和国药典》2010年版一部第 904页的由丹参、三七、冰片为原料加辅料制成的中药制剂。本发明采用薄层色谱法对待测 复方丹参片进行检测。薄层色谱法(thin-layer chromatography)也称为薄层层析，本发 明采用的薄层色谱法参照《中华人民共和国药典》2010年版一部附录VI B，其中，使用的展 开剂为石油醚和丙酮的混合物。按照本发明，所述展开剂中石油醚和丙酮的体积比优选为 7 10 1 3，更优选为8 2。由于复方丹参片中含有二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A、冰片等多
4种有效成分，现有技术中使用苯和乙酸乙酯按照体积比19 1混合作为展开剂，采用薄层 色谱法进行检测，上述几种有效成分不能得到彻底分离，因此使得供试品色谱和对照品色 谱对应位置的斑点的颜色不一致，其原因在于供试品色谱中丹参酮I和丹参酮II α的斑点 极易发生重叠。本发明使用石油醚和丙酮的混合物作为展开剂，分别对以上几种有效成分 使用薄层色谱法进行检测，结果表明，可对以上几种有效成分进行有效分离，因此能够准确 检测复方丹参片的有效成分。按照本发明，所述待测复方丹参片的供试品溶液可以采用如下方法制备取待测复方丹参片中的待测部分加入乙醚进行超声处理，超声处理的目的在于使 所述待测复方丹参片的有效成分溶解在乙醚中，超声处理的时间优选为2分钟以上，更优 选为5分钟。超声处理后，将溶解有复方丹参片有效成分的乙醚液过滤，弃去滤渣，滤液挥 干，得到的残渣溶解在乙酸乙酯中，得到供试品溶液。所述待测复方丹参片中的待测部分优 选为取待测复方丹参片，糖衣片除去糖衣，磨碎、研细，即得。按照本发明，使用选自二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I、丹参酮II A、冰片中的 一种溶解在乙酸乙酯内作为对照品溶液。检测时，分别吸取供试品溶液和对照品溶液分别 点于同一硅胶薄层板上，用展开剂展开，取出，晾干，观察供试品色谱与对照品色谱中斑点 的颜色和位置。然后喷以香草醛硫酸溶液，加热进行显色。如果供试品色谱与对照品色谱 在相应的位置显示相同颜色斑点，则表明供试品为复方丹参片；如果供试品色谱与对照品 色谱在相应的位置不能显示相同颜色的斑点，则表明供试品不是复方丹参片。以下以具体实施例说明本发明的效果，但是本发明的保护范围并不受以下实施例 的限制。以下实施例和比较例的检测环境相同，环境温度为20°C，环境相对湿度为63%。实施例1按照《中华人民共和国药典》2010年版一部复方丹参片的规格要求，取2批规格 (1)(每批5片，分别编号为6、7)、2批规格(3)(每批5片，分别编号为8、9)、1批规格(2) (2片，编号为10)。将以上2批规格⑴每批5片、2批规格⑵每批5片及1批除去糖衣的规格(3)2 片分别研碎，各加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，弃去滤渣，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯 2ml使溶解，分别作为供试品溶液(对应编号依次为6、7、8、9、10)。另取二氢丹参酮I对照 品(编号为1)、隐丹参酮对照品(编号为2)、丹参酮I对照品(编号为3)、丹参酮114对照 品(编号为4)、冰片对照品(编号为5)，分别加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，分别 作为对照品溶液(对应编号依次为1、2、3、4、5)。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》 2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述10种溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚和丙酮按照7 2的体积比混合作为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在 与二氢丹参酮I对照品、隐丹参酮对照品、丹参酮I对照品、丹参酮II Α对照品色谱相应的 位置上，均显相同颜色的斑点，如图1所示；然后喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加热 5分钟进行显色，供试品色谱与各对照品色谱相对应的位置上，均显相同颜色的斑点，如图 2所示。实施例2按照《中华人民共和国药典》2010年版一部复方丹参片的规格要求，取2批规格
5(1)(每批5片，分别编号为6、7)、2批规格(3)(每批5片，分别编号为8、9)、1批规格(2) (2片，编号为10)。将以上2批规格⑴每批5片、2批规格⑵每批5片及1批除去糖衣的规格(3)2 片分别研碎，各加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，弃去滤渣，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯 2ml使溶解，分别作为供试品溶液(对应编号依次为6、7、8、9、10)。另取二氢丹参酮I对照 品(编号为1)、隐丹参酮对照品(编号为2)、丹参酮I对照品(编号为3)、丹参酮114对照 品(编号为4)、冰片对照品(编号为5)，分别加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，分别 作为对照品溶液(对应编号依次为1、2、3、4、5)。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》 2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述10种溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚和丙酮按照8 2的体积比混合作为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在 与二氢丹参酮I对照品、隐丹参酮对照品、丹参酮I对照品、丹参酮II Α对照品色谱相应的 位置上，均显相同颜色的斑点，如图3所示；然后喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加热 5分钟进行显色，供试品色谱与各对照品色谱相对应的位置上，均显相同颜色的斑点，如图 4所示。实施例3按照《中华人民共和国药典》2010年版一部复方丹参片的规格要求，取2批规格 (1)(每批5片，分别编号为6、7)、2批规格(3)(每批5片，分别编号为8、9)、1批规格(2) (2片，编号为10)。将以上2批规格⑴每批5片、2批规格⑵每批5片及1批除去糖衣的规格(3)2 片分别研碎，各加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，弃去滤渣，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯 2ml使溶解，分别作为供试品溶液(对应编号依次为6、7、8、9、10)。另取二氢丹参酮I对照 品(编号为1)、隐丹参酮对照品(编号为2)、丹参酮I对照品(编号为3)、丹参酮114对照 品(编号为4)、冰片对照品(编号为5)，分别加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，分别 作为对照品溶液(对应编号依次为1、2、3、4、5)。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》 2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述10种溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚和丙酮按照9 2的体积比混合作为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中，在 与二氢丹参酮I对照品、隐丹参酮对照品、丹参酮I对照品、丹参酮II Α对照品色谱相应的 位置上，均显相同颜色的斑点，如图5所示；然后喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加热 5分钟进行显色，供试品色谱与各对照品色谱相对应的位置上，均显相同颜色的斑点，如图 6所示。实施例4按照《中华人民共和国药典》2010年版一部复方丹参片的规格要求，取2批规格 (1)(每批5片，分别编号为6、7)、2批规格(3)(每批5片，分别编号为8、9)、1批规格(2) (2片，编号为10)。将以上2批规格⑴每批5片、2批规格⑵每批5片及1批除去糖衣的规格(3)2 片分别研碎，各加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，弃去滤渣，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯 2ml使溶解，分别作为供试品溶液(对应编号依次为6、7、8、9、10)。另取二氢丹参酮I对照 品(编号为1)、隐丹参酮对照品(编号为2)、丹参酮I对照品(编号为3)、丹参酮114对照 品(编号为4)、冰片对照品(编号为5)，分别加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，分别作为对照品溶液(对应编号依次为1、2、3、4、5)。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》 2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述10种溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以石油醚和丙酮按照10 2的体积比混合作为展开剂，展开，取出，晾干。供试品色谱中， 在与二氢丹参酮I对照品、隐丹参酮对照品、丹参酮I对照品、丹参酮II八对照品色谱相应 的位置上，均显相同颜色的斑点，如图7所示；然后喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加 热5分钟进行显色，供试品色谱与各对照品色谱相对应的位置上，均显相同颜色的斑点，如 图8所示。比较例1按照《中华人民共和国药典》2010年版一部复方丹参片的规格要求，取2批规格 (1)(每批5片，分别编号为6、7)、2批规格(3)(每批5片，分别编号为8、9)、1批规格(2) (2片，编号为10)。将以上2批规格⑴每批5片、2批规格⑵每批5片及1批除去糖衣的规格(3)2 片分别研碎，各加乙醚10ml，超声处理5分钟，滤过，弃去滤渣，滤液挥干，残渣加乙酸乙酯 2ml使溶解，分别作为供试品溶液(对应编号依次为6、7、8、9、10)。另取二氢丹参酮I对照 品(编号为1)、隐丹参酮对照品(编号为2)、丹参酮I对照品(编号为3)、丹参酮114对照 品(编号为4)、冰片对照品(编号为5)，分别加乙酸乙酯制成每Iml含0. 5mg的溶液，分别 作为对照品溶液(对应编号依次为1、2、3、4、5)。照薄层色谱法(《中华人民共和国药典》 2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述10种溶液各4 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上， 以苯和乙酸乙酯按照19 1的体积比混合作为展开剂，展开，取出，晾干，观察供试品色谱 与对照品色谱中斑点的颜色和位置。然后喷以香草醛硫酸溶液，在110°C加热5分钟 进行显色。显色前的薄层色谱图如图9所示，显色后的薄层色谱图如图10所示。将实施例1 4显色前与显色后得到的薄层色谱图与比较例1显色前与显色后得 到的薄层色谱图进行比较，可以看出，将对照品、供试品用苯和乙酸乙酯的混合物作为展开 剂，按《中华人民共和国药典》2010年版一部第904页中的薄层色谱法进行检测，供试品色 谱中，在与丹参酮II A对照品色谱相应的位置上，斑点的颜色明显不一致，原因在于丹参酮
I和丹参酮II A的斑点相互重叠，因此检测效果不准确。本发明公开的方法则很好地解决 了上述问题。此外，丹参是复方丹参片的君药，其活性成分中，含量较高的除丹参酮II A外，还有 二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮I等，本发明进一步增加二氢丹参酮I、隐丹参酮、丹参酮 I作为指标成分，可以更全面地反映复方丹参片的质量情况。最后，本发明所用的展开剂为
石油醚和丙酮的混合物，与现有技术相比，不含剧毒化合物苯，因此检测条件得到改善。以上对本发明提供的复方丹参片的检测方法进行了详细的介绍。本文中应用了具 体个例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发 明的方法及其核心思想。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明 原理的前提下，还可以对本发明进行若干改进和修饰，这些改进和修饰也落入本发明权利 要求的保护范围内。
权利要求
一种复方丹参片的检测方法，其特征在于，包括提供待测复方丹参片的供试品溶液；取选自二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、冰片中的一种溶解在乙酸乙酯内作为对照品溶液；以石油醚和丙酮的混合物作为展开剂，采用薄层色谱法对所述供试品溶液进行检测。
2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂中石油醚和丙酮的体积 比为7 10 1 3。
3.根据权利要求2所述的检测方法，其特征在于，所述展开剂中石油醚和丙酮的体积 比为8 2。
4.根据权利要求1至3任一项所述的检测方法，其特征在于，所述待测复方丹参片的供 试品溶液采用如下方法制备取待测复方丹参片的待测部分加入乙醚超声处理，滤过，弃去滤渣，所得滤液蒸干，残 渣加乙酸乙酯使溶解，得到供试品溶液。
5.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述待测复方丹参片中的待测部分 采用如下方法获得取待测复方丹参片，糖衣片除去糖衣，磨碎、研细，即得。
6.根据权利要求4所述的检测方法，其特征在于，所述待测复方丹参片的待测部分在 乙醚中超声处理的时间为2分钟以上。
7.根据权利要求6所述的检测方法，其特征在于，所述待测复方丹参片的待测部分在 乙醚中超声处理的时间为5分钟。
全文摘要
本发明提供一种复方丹参片的检测方法，包括提供待测复方丹参片的供试品溶液；取选自二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、冰片中的一种溶解在乙酸乙酯内作为对照品溶液；以石油醚和丙酮的混合物作为展开剂，采用薄层色谱法对所述供试品溶液进行检测。本发明使用石油醚和丙酮的混合物作为展开剂，与现有技术中使用的含苯展开剂相比，本发明使用的展开剂无毒；此外，检测结果表明，本发明使用的展开剂能够准确检测出复方丹参片的活性成分。
文档编号G01N30/90GK101904897SQ201010244188
公开日2010年12月8日 申请日期2010年7月30日 优先权日2010年7月30日
发明者吴笛, 李楚源, 王德勤 申请人:广州白云山和记黄埔中药有限公司