专利名称：华支睾吸虫免疫胶体金检测盒的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种免疫胶体金检测盒，尤其是华支睾吸虫免疫胶体金检测盒。
本实用新型是这样实现的。
本实用新型采用一个小塑料盒，小塑料盒有盒盖和底座，盒盖的一侧开有椭圆形或近圆形的加样孔供加待检样品；盒盖的中部开有长条形的观察窗；试纸条的底层为塑料薄片，其上层对应盒盖加样孔的一侧为有大容量吸水纸的吸附有指示剂为胶体金标记的人的IgG的羊抗人或鼠抗人抗体(二抗)的加样区，对应盒盖观察窗的中部为反应结合区，为层析模，其上设有检测线和质控线，其中检测线在近加样区侧，质控线在远加样区侧，检测线上的检测试剂是华支睾吸虫成虫的抗原成分，检测线的孔径是5～8μm，质控线上的质控试剂是人的IgG；试纸条的加样区的对侧一端可以设置有大容量吸水纸的吸水区。本实用新型的试纸条通过双面胶带或粘胶组成的粘胶层粘连在塑料盒底座上。
本实用新型在加样区靠近层析膜的位置为吸附有指示剂为胶体金标记的羊抗人或鼠抗人IgG二抗为佳。
本实用新型的反应结合区可以是孔径为5～8μm混合纤维素或硝酸纤维素层析膜。
使用时，在加样区滴上一滴人唾液，等唾液全部吸入后，滴加两滴PBS-Tween 20磷酸缓冲液，约2～3分钟后，从观察窗中可以观察到，质控线上出现一条红线，阳性样品在检测线上还会出现一条红线。
使用本实用新型的华支睾吸虫免疫胶体金快速检测盒检测时，检测对象是人唾液中华支睾吸虫成虫特异的IgG，被检测者不必有任何创伤，只需要一滴唾液即可。本实用新型同时还具有敏感性高、特异性强、操作简便、反应快速、微量准确、经济实用、便于保存、适合现场使用等优点。
图2为本实用新型的示意图。
图中，(1)为盒盖，(2)为底座，(3)为加样孔，(4)为观察窗，(5)为试纸条，(6)为粘胶层，(7)加样区，(8)检测线T，(9)质控线C，(10)吸水区。
如

图1所示，本实用新型的小塑料盒有盒盖(1)和底座(2)，其中试纸条(5)通过双面胶带或粘胶组成的粘胶层(6)粘连在塑料盒底座(2)上，试纸条底层为塑料薄片，其上层对应盒盖加样孔的一侧为有大容量吸水纸的吸附有指示剂为胶体金标记的羊抗人或鼠抗人IgG的二抗的加样区(7)，对应盒盖的中部观察窗部位为反应结合区，为层析膜，其上设有检测试剂为华支睾吸虫成虫的抗原成分的检测线T(8)，以及加有质控试剂为人的IgG的质控线C(9)，在远加样区(7)侧。
本实用新型的检测线的孔径为5～8μm。
本实用新型的反应结合区的孔径为5～8μm。
本实用新型的试纸条的加样区(7)的对侧可设置有大容量吸水纸的吸水区(10)。
由于华支睾吸虫是通过消化道感染的寄生虫病，进入消化道的成虫经过胃和小肠的消化作用，突破囊壁，经小肠进入肝胆管发育成熟。华支睾吸虫成虫的虫体体表的脱落抗原和分泌排泄抗原进入肝脏，刺激免疫系统产生IgG。因此，可以以华支睾吸虫成虫抗原成分作为检测试剂，予以检测。
使用时，在加样区滴上一滴人唾液，等唾液全部吸入后，滴加两滴加有PBS-TWEEN 20磷酸缓冲液，样品中IgG与胶体金标记的IgG的抗体结合成抗体一二抗一胶体金免疫复合物，并在毛细管作用下展开。经展开，该复合物被固定在检测线上的华支睾成虫抗原特异结合，在检测线处富集，这是由于形成了胶体金抗原抗体配体，因而如人抗华支睾成虫的抗原的抗体为阳性，则检测线显红色；而游离的胶体金标记的二抗继续前移，在含有人IgG的质控线上富集，使得质控线显红色；质控线显色，表明试剂盒的质量合格。
权利要求1.一种华支睾吸虫免疫胶体金检测盒，盒盖的一侧开有椭圆形或近圆形的加样区，盒盖的中部开有一长条形的观察窗，小盒有盒盖和底座，其特征在于有试纸条通过双面胶带或粘胶组成的粘胶层粘连在塑料盒底座上，试纸条底层为塑料薄片，其上对应盒盖加样孔的一侧为有大容量吸水纸的吸附有指示剂为胶体金标记的人的IgG的羊抗人或鼠抗人抗体的加样区，对应盒盖的中部观察窗部位为反应结合区，为层析膜，其上设有检测试剂为华支睾吸虫成虫的抗原成分的检测线T，以及加有质控试剂为与人的IgG的质控线C，其中检测线T在近加样区侧，质控线C在远加样区侧。
2.根据权利要求1所述的华支睾吸虫免疫胶体金检测盒，其特征在于检测线的孔径为5～8μm。
3.根据权利要求1所述的华支睾吸虫免疫胶体金检测盒，其特征在于反应结合区的孔径为5～8μm。
4.根据权利要求1所述的华支睾吸虫免疫胶体金检测盒，其特征在于加样区的对侧设置有大容量吸水纸的吸水区。
专利摘要一种华支睾吸虫成虫免疫胶体金检测盒，盒盖的一侧开有椭圆形或近圆形的加样区，盒盖的中部开有一长条形的观察窗，试纸条通过双面胶带或粘胶组成的粘胶层粘连在塑料盒底座上，试纸条底层为塑料薄片，其上层对应盒盖加样孔的一侧为有大容量吸水纸的吸附有胶体金标记的人的IgG的羊抗人或鼠抗人抗体的加样区，对应盒盖的中部观察窗部位为反应结合区，其上设有加有检测试剂为华支睾吸虫成虫的抗原成分的检测线T，以及加有质控试剂为人的IgG的质控线C，其中检测线T在近加样区侧，质控线C在远加样区侧，本实用新型提供了一种敏感、特异、简便、快速、廉价、适合现场应用的技术手段。
文档编号G01N33/543GK2604687SQ03224469
公开日2004年2月25日 申请日期2003年3月24日 优先权日2003年3月24日
发明者余新炳, 胡旭初, 徐劲, 陈守义 申请人:中山大学