专利名称：不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药的制作方法
技术领域：
本发明提供含胶乳(latex)等不溶性载体粒子的比浊免疫测定用试药、用不溶性载体粒子的比浊免疫测定方法和含不溶性载体粒子的比浊免疫测定用试剂盒。更具体来说，提供使吸光度稳定，并且能抑制与反应相关的对测定值有影响的血浆成分的作用的含不溶性载体粒子的比浊免疫测定用试药、用不溶性载体粒子进行的比浊免疫测定方法和含不溶性载体粒子的比浊免疫测定用试剂盒。
另外，特开平9-318632号公报中，记载了将检测体和负载有抗原或抗体的胶乳混悬液混合，向该混合液中添加二元醇，抗原抗体反应使胶乳粒子凝集，测定由此引起的吸光度变化量，即使检测体中含有高浓度的需测定的抗原或抗体时，也无需稀释检测体，直接用原液就可测定的胶乳比浊免疫测定方法。
另外，特开平7-301632号公报中，记载了负载有表面有羧基的胶乳粒子和与该粒子共价键合的键合免疫反应体的微粒子，胶乳粒子有直径0.1～0.6μm和有8～35平方埃表面羧化的负载微粒子以及含有该微粒子和缓冲液的免疫测定试药。
如上所述，胶乳经常被用于利用胶乳比浊免疫测定法等免疫凝集反应的测定体系中，胶乳混悬液是指通过向其中混入微量的重金属离子等使与反应液中共存的血浆成分反应，使其对抗原或抗体的胶乳载体的吸附性发生变化，或者使抗原或抗体从与结合了抗原或抗体的胶乳上解离，生成游离的抗原或抗体，反应时，因使胶乳凝集程度发生变化，出现灵敏度不稳定的问题。另外，对于没有结合抗原或抗体的胶乳，有表面电荷的羧基或磺酸基会因结合重金属离子，而出现表面电荷变化，灵敏度不稳定的问题。
本发明提供了与胶乳等不溶性载体粒子凝集反应相关，通过抑制对测定值有影响的血浆成分的作用，使凝集反应稳定化，反应液的吸光度稳定化，能得到更精确的测定结果的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药、不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒和用该试药或试剂盒的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法。
本发明者为解决上述课题进行了深入研究，胶乳凝集反应不稳定化的血浆成分，即对于血浆中存在的微量多价金属离子，用分子式中含有特定基团的化合物的缓冲液，使胶乳表面的荷电状态稳定化，防止与胶乳结合的抗原或抗体游离，使胶乳凝集反应稳定化，能够得到精确的测定结果，从而可以完成本发明。
[化学式2] [化学式3])
另外，本发明中，不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求8)，其特征在于使用不溶性载体粒子和分子内具有化学式1所示基团的化合物或者其盐组成的缓冲剂，权利要求8所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求9)，其特征在于上述化合物使用上述[化学式2]所示的通式[I][式中R1，R2与前述相同]所示的化合物，权利要求9所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求10)，其特征在于通式[I]所示化合物是用上述[化学式3][式中R1，R2，R3与前述相同]所示的化合物，权利要求10所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求11)，其特征在于通式[II]所示的化合物为蚕豆嘧啶葡糖苷或者麦黄酮，权利要求8～11的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求12)，其特征在于在缓冲剂存在下，抗体或抗原保持在不溶性载体粒子中，然后进行免疫凝集反应，权利要求8～12的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求13)，其特征在于抗体或抗原保持在不溶性载体粒子中后，在缓冲剂存在下，进行免疫凝集反应，权利要求8～13的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求14)，其特征在于缓冲剂是指缓冲剂浓度5～200mmol/L的缓冲液，权利要求8～14的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求15)，其特征在于不溶性载体粒子是指不溶性载体粒子浓度为0.005～5重量％的不溶性载体粒子混悬液，权利要求8～15的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法(权利要求16)，其特征在于不溶性载体粒子为胶乳。
而且，本发明中，不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求17)，其特征在于包括有含不溶性载体粒子的混悬液、分子内具有上述[化学式1]所示基团的化合物或者其盐组成的缓冲剂的缓冲液，权利要求17所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求18)，其特征在于上述化合物是用[化学式2]中所示的通式[I][式中R1，R2与前述相同]所示的化合物，权利要求18所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求19)，其特征在于上述通式[I]所示化合物为上述[化学式3]中通式[II][式中R1，R2，R3与前述相同]所示的化合物，权利要求19所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求20)，其特征在于通式[II]所示的化合物为蚕豆嘧啶葡糖苷或者麦黄酮，权利要求17～20的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求21)，其特征在于含缓冲剂的缓冲液是指缓冲剂浓度为5～200mmol/L的缓冲液，权利要求17～21的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求22)，其特征在于含不溶性载体粒子的混悬液是指不溶性载体粒子的浓度为0.005～5重量％的混悬液，权利要求17～22的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒(权利要求23)，其特征在于不溶性载体粒子为胶乳。最佳实施方式本发明中不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药若是含有不溶性载体粒子、分子内含有[化学式4]所示基团的化合物或其盐形成的缓冲剂的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，则没有特别限制。另外，本发明中不溶性载体粒子比浊免疫测定方法若是用含有不溶性载体粒子、分子内含有[化学式4]所示基团的化合物或其盐形成的缓冲剂的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，则没有特别限制。这里不溶性载体粒子比浊免疫测定方法是指用不溶性载体粒子进行免疫凝集反应，测定反应后的浓度，对检测体中的抗原或抗体进行定量的方法。而且，本发明中不溶性载体粒子比浊免疫测定试剂盒若是含有不溶性载体粒子的混悬液，分子内含有[化学式4]所示基团的化合物或其盐形成的缓冲剂的缓冲液的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，则没有特别限制。[化学式4] 上述作为缓冲剂的化合物是指，能用下述通式[I]表示的化合物，通式[I]中的R1，R2相同或不同均可，可以列举出氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、三(硫代-羟基-烷基)烷基等。
上述烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基和三(硫代-羟基-烷基)烷基中的烷基可以列举出直链或支链的碳原子数在1～6的烷基，该直链或支链的碳数为1～6的烷基具体可列举出甲基、乙基、丙基、丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基等。
上述的取代氨烷基及取代氨羰基烷基中的取代基团可以列举出烷基、羟烷基、羧烷基、硫代烷基、硫代-羟基-烷基、含氮原子的杂环基。该烷基、羟烷基、羧烷基、硫代烷基、硫代-羟基-烷基中的烷基可以列举出前述的直链或支链的碳原子数目在1～6的烷基。上述的含氮原子的杂环基可列举出哌嗪基、吗啉基、哌啶基等。
上述的取代烷氧烷基中的取代基团可列举出羟基、羧基、磺酸基等。
另外，通式[I]中的R1、R2和氮原子形成环状结构，可列举出取代或无取代的哌嗪基、取代或无取代的吗啉基或者取代或无取代的哌啶基，该取代的哌嗪基、取代的吗啉基及取代的哌啶基中的取代基团，可列举出烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、三(硫代-羟基-烷基)烷基等。
上述的烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基和三(硫代-羟基-烷基)烷基中的烷基，可以列举出前述的直链或支链的碳数在1～6的烷基。
上述的取代氨烷基及取代氨羰烷基中的取代基可以列举出，前述取代氨烷基及取代氨羰烷基中的取代基。另外，上述取代烷氧基烷基中的取代基团可以列举出前述取代烷氧基烷基中的取代基。[化学式5] 上述的羟烷基可列举出羟甲基、2-羟乙基、2-羟丙基、2-羟丁基、2-羟戊基、2-羟己基等，二(羟烷基)烷基可列举出二(羟甲基)甲基、二(2-羟乙基)甲基等，三(羟烷基)烷基可列举出三(羟甲基)甲基、三(2-羟乙基)甲基等，羧烷基可列举出羧甲基、2-羧乙基等，二(羧烷基)烷基可列举出二(羧甲基)甲基、二(2-羧乙基)甲基等，三(羧烷基)烷基可列举出三(羧甲基)甲基、三(2-羧乙基)甲基等。
另外，前述的取代或无取代的氨烷基可列举出氨甲基、2-氨乙基、N-甲氨甲基、2-(N-甲氨基)乙基等，取代或无取代氨羰基烷基可列举出氨羰甲基、2-氨羰乙基、N-甲氨羰甲基、2-(N-甲氨羰基)乙基等，取代或无取代烷氧基烷基可列举出甲氧甲基、乙氧甲基、2-甲氧乙基、(羧甲氧基)甲基、(2-羟乙氧基)甲基等，硫代烷基可列举出硫代甲基、2-硫代乙基等，二(硫代烷基)烷基可列举出二(硫代甲基)甲基、二(2-硫代乙基)甲基等，三(硫代烷基)烷基可列举出三(硫代甲基)甲基、三(2-硫代乙基)甲基等，硫代-羟基-烷基可列举出2-羟基-3-硫代丙基、3-羟基-4-硫代丙基等，二(硫代-羟基-烷基)可列举出，二(2-羟基-3-硫代丙基)甲基、二(3-羟基-4-硫代丙基)甲基等，三(硫代-羟基-烷基)可列举出三(2-羟基-3-硫代丙基)甲基、三(3-羟基-4-硫代丙基)甲基等。
另外，通式[I]所示化合物优选为下述通式[II]所表示的化合物，通式[II]中R1、R2、R3相同或不同均可，可列举出氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、三(硫代-羟基-烷基)烷基等。作上述的烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基和三(硫代-羟基-烷基)烷基分别可列举前述的各基团，其各目的具体例也如前所述。
上述的取代氨烷基、取代氨羰基烷基和取代烷氧基烷基中的取代基分别可列举前述的各基团，其具体例也如前所述。[化学式6] 本发明中使用的缓冲剂，具体可列举出已知的优良缓冲剂蚕豆嘧啶葡糖苷[N，N-二(2-羟乙基)甘氨酸]、麦黄酮{N[三(羟甲基)甲基]甘氨酸}外还有ADA[N-(2-乙酰胺)亚氨二乙酸]等，因为其中下述式[III]所表示的蚕豆嘧啶葡糖苷或式[IV]表示的麦黄酮通过不溶性载体粒子凝集反应而稳定，所以是优选。[化学式7] [化学式8] 上述通式[I]，特别是通式[II]表示的化合物形成的缓冲剂，因为使用浓度为5～200mmol/L，通过胶乳等不溶性载体粒子凝集反应而稳定，所以是优选。不溶性载体粒子凝集反应时的pH对反应的稳定化非常重要，缓冲成分的浓度在5mmol/L以上时，保持一定的pH比较容易，在200mmol/L以下时，不溶性载体粒子的粒子之间不进行抗原抗体反应所致非特异凝集反应。调节含有缓冲成分的缓冲液pH值的酸通常除盐酸、硫酸、硝酸外、还可以使用醋酸等有机酸，碱通常可以使用氢氧化钠、氢氧化锂、氢氧化钾、氢氧化铵等。本发明中的缓冲剂除上述缓冲成分外，根据需要也可以含有其他成分。其他成分可以列举出对检测体中脂质有溶化效果的表面活性剂，特别是含有聚氧乙二醇基团的非离子类表面活性剂或其他阴离子类、阳离子类表面活性剂。
本发明中不溶性载体粒子在与上述本发明的缓冲剂合用时，若抑制对测定值有影响的血浆成分的作用，使凝集反应稳定化，任何物质均可。例如可列举出特公昭58-11575号公报中所述的公知的有机高分子物质微粒子、无机氧化物微粒子或者用有机物等处理作为核的这些物质表面的微粒子，具体可列举出如聚苯乙烯、聚氯乙烯、聚丙烯、(甲基)丙烯酸树脂、聚甲基甲基丙烯酸酯等合成树脂(胶乳)、硝基纤维素、纤维素、甲基纤维素等纤维素衍生物、金属、陶瓷、玻璃、硅橡胶等无机物。其中，特别是聚苯乙烯类合成高分子优选含有作为供电子成分的丙烯酸类单体或磺酸的单体等共聚和形成的聚苯乙烯类合成高分子。
如上所述，本发明中上述的不溶性载体优选使用聚苯乙烯胶乳等胶乳粒子。使用聚苯乙烯胶乳等表面疏水性强的胶乳时，能使蛋白质或肽的吸附顺利进行。另外，不使用作为乳化剂的表面活性剂，通过皂化自由重合得到的聚苯乙烯胶乳粒子，由于表面的负电荷之间相斥，即使不用表面活性剂，也能够稳定的存在，所以优选使用。根据需要也可以使用其他各种改性的胶乳(例如羧酸改性胶乳)、磁性胶乳(含磁性粒子的胶乳)等。
进行免疫测定的定量时，通常对不溶性载体粒子大小的均一性，对表面状态的控制、对内部结构等的选择等有极高的要求，这样的适于作为试药的胶乳等不溶性载体粒子可以在市售品种中选择得到。对不溶性载体粒子的形状没有特别的限制，例如可以为球状，球状的粒径为平均粒径在0.03～0.8μm，特别优选平均粒径在0.06～0.2μm。另外，对发明中不溶性载体粒子在反应液中的浓度也没有特别限制，例如为0.001～10重量％，优选为为0.005～5重量％，更优选为0.01～2重量％的浓度，这样通过不溶性载体粒子凝集反应使稳定化成为可能。
本发明中不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药可以例示使用调整至5～200mmol/L含蚕豆嘧啶葡糖苷、麦黄酮等的缓冲剂，使用浓度调整至0.005～5重量％的胶乳等不溶性载体粒子，不溶性载体粒子负载的抗原或抗体和含有其他成分的试药。另外，试药也可以使用预先负载有抗原或抗体的不溶性载体粒子。
本发明中不溶性载体粒子比浊免疫测定方法可以例举出在蚕豆嘧啶葡糖苷、麦黄酮等缓冲剂存在条件下，抗原或抗体通过化学键或物理吸附等作用负载在不溶性载体粒子上，然后进行免疫凝集反应的方法，负载有抗原或抗体的不溶性载体粒子在缓冲剂存在条件下进行免疫凝集反应的方法，这时，缓冲剂可以使用缓冲液，不溶性载体粒子可以使用不溶性载体粒子混悬液。也可使用不溶性载体粒子混悬在缓冲液中的状态。免疫凝集反应时、不溶性载体粒子负载抗原或抗体时，优选缓冲剂浓度在5～200mmol/L，不溶性载体粒子浓度在0.005～5重量％。
本发明的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，可以例举出蚕豆嘧啶葡糖苷、麦黄酮等缓冲剂浓度为5～200mmol/L的缓冲液，胶乳等不溶性载体粒子浓度为0.005～5重量％的混悬液，不溶性载体粒子负载的抗原或抗体以及含其他任意成分的试药组成的试剂盒。另外，测定用试剂盒中，可以使用预先负载有抗原或抗体的不溶性载体粒子。
以下，列举实施例对本发明进行更详细的说明，本发明的范围不限于此。实施例中的％除特别说明外均表示重量％。
权利要求
1.不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于含有不溶性载体粒子、分子内具有化学式1所示基团的化合物或其盐组成的缓冲剂。化学式1
2.权利要求1所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于化合物是用通式I所示的化合物，化学式2 式中R1，R2相同或不同均可，表示氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、三(硫代-羟基-烷基)烷基，或者R1，R2和氮原子形成的环状结构，形成取代或无取代的哌嗪基、取代或无取代的吗啉基或者取代或无取代的哌啶基的基团。
3.权利要求2所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于通式I所示化合物为通式II所表示的化合物，化学式3 式中R1，R2，R3相同或不同均可，表示氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基或三(硫代-羟基-烷基)烷基。
4.权利要求3所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于通式II所代表的化合物为蚕豆嘧啶葡糖苷或者麦黄酮。
5.权利要求1～4的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于缓冲剂是指浓度调整至5～200mmol/L的形态。
6.权利要求1～5的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于不溶性载体粒子是指浓度调整至0.005～5重量％的形态。
7.权利要求1～6的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试药，其特征在于不溶性载体粒子是胶乳。
8.不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于使用不溶性载体粒子、分子内具有化学式4所示基团的化合物或者其盐组成的缓冲剂。化学式4
9.权利要求8所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于化合物为通式I所示的化合物，化学式5 式中R1，R2相同或不同均可，是指氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、三(硫代-羟基-烷基)烷基，或者R1，R2和氮原子形成的环状结构，形成取代或无取代的哌嗪基、取代或无取代的吗啉基或者取代或无取代的哌啶基的基团。
10.权利要求9所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于通式I所示化合物为通式II所表示的化合物，化学式6 式中R1，R2，R3相同或不同均可，表示氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基或三(硫代-羟基-烷基)烷基。
11.权利要求10所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于通式II所示的化合物为蚕豆嘧啶葡糖苷或者麦黄酮。
12.权利要求8～11的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于在缓冲剂存在下，抗体或抗原保持在不溶性载体粒子中，然后进行免疫凝集反应。
13.权利要求8～12的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于抗体或抗原保持在不溶性载体粒子中后，在缓冲剂存在下，进行免疫凝集反应。
14.权利要求8～13的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于缓冲剂是指缓冲剂浓度5～200mmol/L的缓冲液。
15.权利要求8～14的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于不溶性载体粒子是指不溶性载体粒子浓度为0.005～5重量％的不溶性载体粒子混悬液。
16.权利要求8～15的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法，其特征在于不溶性载体粒子为胶乳。
17.不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于包括有含不溶性载体粒子的混悬液、含分子内具有化学式7所示基团的化合物或者其盐组成的缓冲剂的缓冲液。化学式7
18.权利要求17所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于化合物为通式I所示的化合物，化学式8 式中R1，R2相同或不同均可，是指氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、三(硫代-羟基-烷基)烷基，或者，R1，R2和氮原子形成的环状结构，形成取代或无取代的哌嗪基、取代或无取代的吗啉基、或者取代或无取代的哌啶基的基团。
19.权利要求18所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于通式I所示化合物为通式II所示的化合物，化学式9 式中R1，R2，R3相同或不同均可，是指氢原子、烷基、羟烷基、二(羟烷基)烷基、三(羟烷基)烷基、羧烷基、二(羧烷基)烷基、三(羧烷基)烷基、取代或无取代氨烷基、取代或无取代氨羰基烷基、取代或无取代烷氧基烷基、硫代烷基、二(硫代烷基)烷基、三(硫代烷基)烷基、硫代-羟基-烷基、二(硫代-羟基-烷基)烷基、或三(硫代-羟基-烷基)烷基。
20.权利要求19所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于通式II所示的化合物为蚕豆嘧啶葡糖苷或者麦黄酮。
21.权利要求17～20的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于含缓冲剂的缓冲液是指缓冲剂浓度为5～200mmol/L的缓冲液。
22.权利要求17～21的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于含不溶性载体粒子的混悬液是不溶性载体粒子的浓度为0.005～5重量％的混悬液。
23.权利要求17～22的任一项所述的不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒，其特征在于不溶性载体粒子为胶乳。
全文摘要
提供抑制与胶乳等不溶性载体粒子凝集反应相关的对测定值有影响的血浆成分的作用，使凝集反应稳定化，使反应液的吸光度稳定，能够得到精确的测定结果的不溶性载体粒子的比浊免疫测定用试药、不溶性载体粒子比浊免疫测定用试剂盒、用该试剂或试剂盒进行的不溶性载体粒子比浊免疫测定方法。在蚕豆嘧啶葡糖苷、麦黄酮等分子内含有以下所示基团的化合物的缓冲液存在或不存在的条件下，使不溶性载体粒子负载有抗体或抗原，然后，在上述缓冲液存在的条件下，对抗体或抗原敏感的不溶性载体粒子混悬液和检测体接触，发生免疫凝集反应，通过不溶性载体粒子凝集反应，测定产生的浓度，对检测体中的抗原或抗体进行定量。(式中R
文档编号G01N33/543GK1443309SQ01812896
公开日2003年9月17日 申请日期2001年6月15日 优先权日2000年6月30日
发明者重信香代子, 小栗一人 申请人:协和梅迪克斯株式会社, 爱赐爱儿股份有限公司