专利名称：一种检测人参皂苷总类成分含量的方法
技术领域：
本发明属于医药技术领域，涉及一种检测人参皂苷总类成分含量的方法。
背景技术：
人参总皂苷具有扩冠，强心，改善心功能，减轻心、脑缺血再灌注损伤，改善血液流变学参数，调节机体免疫功能等药理作用，被广泛应用于药物制剂中。目前人参皂苷总类成分的含量测定方法主要是高氯酸-香草醛显色法和硫酸-香草醛显色法，上述方法专属性差，部分杂质同样可以被显色，存在明显干扰，同时显色过程容易受外界条件影响，使测定结果缺乏准确性，不利于控制药品质量。

发明内容
本发明的目的是提供一种检测人参皂苷总类成分含量的方法，该方法专属性强，可有效消除杂质干扰，获得良好的检测效果。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是按如下步骤实现(1)采用常规水解方法处理含人参总皂苷的样品，制备人参皂苷元供试样品。
(2)采用高效液相色谱法，检测器为蒸发光散射检测器，外标法测定样品中人参皂苷元含量。
(3)分别根据人参二醇组皂苷、人参三醇组皂苷和齐墩果酸组皂苷各自的加权平均分子量与相对应的人参皂苷元分子量之比值，计算人参皂苷总类成分含量，即得。
本发明所述含量检测方法适用于符合指纹图谱相关技术要求的含人参皂苷的药材、提取物和药物制剂。
本发明所述人参皂苷总类成分可以是人参二醇组皂苷、人参三醇组皂苷、齐墩果酸组皂苷中的一类或任意两类的混合物或三类的总混合物。
本发明所述常规水解方法可以是酸水解法，也可以是碱水解法，还可以是Smith法。酸水解法的试剂可以是盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸、醋酸、磷酸、氢溴酸中的一种或其中任意多种组合，碱水解法的试剂可以是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙中的一种或其中任意多种组合。
本发明所述人参二醇组皂苷的皂苷元可以是20(S)-原人参二醇，也可以是异构化产物人参二醇；人参三醇组皂苷的皂苷元可以是20(S)-原人参三醇，也可以是异构化产物人参三醇。
本发明所述加权平均分子量按如下步骤测定(1)采用高效液相色谱法，检测器为蒸发光散射检测器，根据人参二醇组中供含量测定用的人参皂苷对照品，外标法测定人参皂苷总类成分中相对应皂苷的含量和响应值，并计算平均响应值。
(2)根据属于人参二醇组的其余人参皂苷对照品，鉴别人参皂苷总类成分的高效液相色谱图中相对应的人参皂苷色谱峰。
(3)根据蒸发光散射检测器对同系物的响应值基本相同的原理，利用步骤(1)中的平均响应值，计算属于人参二醇组的其余皂苷的含量。
(4)按照步骤(1)～(3)，测定不少于10批符合指纹图谱相关技术要求的含人参总皂苷的样品，根据测定结果计算各种人参皂苷各自的平均含量。
(5)将人参二醇组皂苷中各种皂苷的组成比例设定为权数，按照下列公式计算加权平均分子量。
S＝aX+bY+…S代表加权平均分子量X、Y、…代表单体人参皂苷的分子量a、b、…代表权数，即对应单体人参皂苷的组成百分比(6)同法测定人参三醇组皂苷和齐墩果酸组皂苷各自的加权平均分子量。
与现有技术相比，本发明的有益效果是①方法专属性强，有效消除了杂质的干扰；②高效液相色谱响应值高，检测误差小，精密度、稳定性、回收率、重现性均较好，方法操作简便，稳定可靠，实用性强，非常适合产品质量的控制。
具体实施例方式
下面结合具体实施方式
对本发明作进一步的详细描述。
实施例红参提取物中总皂苷的含量测定1.材料及试剂红参标准提取物共十批，编号I～X。待测红参提取物共三批，编号1～3，均符合根据编号I～X提取物建立的指纹图谱的技术标准。
供含量测定用对照品Rb1、Rb2、Rb3、Rg3、Rh2、Re、Rg1、人参二醇、人参三醇；供鉴别测定用对照品Ra、Rc、Rd、Rh3、Rs1、Rg2、Rh1、Rf。
2.人参皂苷平均含量的测定采用高效液相色谱法，检测器为蒸发光散射检测器，流动相为乙腈(A)和H2O(B)按不同体积比混合，梯度洗脱程序0～30min，19％A；30～31min，19％A～30％A；31～70min，30％A。结果见表1～2。
3.加权平均分子量计算根据表1～2结果，设定各种皂苷的组成比例设定为权数，计算得人参二醇组皂苷加权平均分子量为1062，人参三醇组皂苷加权平均分子量为840。
4.皂苷元的含量测定红参提取物加含10％硫酸的50％乙醇液，于90℃水浴4h，放冷，用氢氧化钠溶液中和至pH5～6，减压回收乙醇，并用氯仿萃取，回收氯仿至干，残渣用甲醇溶解定容，制得供试品溶液。采用高效液相色谱法，检测器为蒸发光散射检测器，流动相为甲醇-水(92∶8)，测定人参二醇和人参三醇的含量，结果见表3。
5.人参总皂苷含量计算根据人参二醇组皂苷和人参三醇组皂苷各自的加权平均分子量与相对应的人参皂苷元分子量之比值，计算人参总皂苷含量，结果见表3。
表1 人参二醇组皂苷的平均含量

表2 样品人参三醇组皂苷的平均含量

表3 人参总皂苷的含量

权利要求
1.一种检测人参皂苷总类成分含量的方法，其特征是按如下步骤测定(1)采用常规水解方法处理含人参总皂苷的样品，制备人参皂苷元供试品。(2)采用高效液相色谱法，检测器为蒸发光散射检测器，外标法测定样品中人参皂苷元含量。(3)分别根据人参二醇组皂苷、人参三醇组皂苷和齐墩果酸组皂苷各自的加权平均分子量与相对应的人参皂苷元分子量之比值，计算人参皂苷总类成分含量，即得。
2.根据权利要求1所述的检测人参皂苷总类成分含量的方法，其特征是适用于符合指纹图谱技术要求的含人参皂苷的药材、提取物和药物制剂。
3.根据权利要求1所述的检测人参皂苷总类成分含量的方法，其特征是人参皂苷总类成分可以是人参二醇组皂苷、人参三醇组皂苷、齐墩果酸组皂苷中的一类或任意两类的混合物或三类的总混合物。
4.根据权利要求1所述的检测人参皂苷总类成分含量的方法，其特征是常规水解方法可以是酸水解法，也可以是碱水解法，还可以是Smith法，酸水解法的试剂可以是盐酸、硫酸、硝酸、高氯酸、醋酸、磷酸、氢溴酸中的一种或其中任意多种组合，碱水解法的试剂可以是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙中的一种或其中任意多种组合。
5.根据权利要求1所述的检测人参皂苷总类成分含量的方法，其特征是人参二醇组皂苷的皂苷元可以是20(S)-原人参二醇，也可以是异构化产物人参二醇；人参三醇组皂苷的皂苷元可以是20(S)-原人参三醇，也可以是异构化产物人参三醇。
6.根据权利要求1所述的检测人参皂苷总类成分含量的方法，其特征是加权平均分子量按如下步骤测定(1)采用高效液相色谱法，检测器为蒸发光散射检测器，根据人参二醇组中供含量测定用的人参皂苷对照品，外标法测定人参皂苷总类成分中相对应皂苷的含量和响应值，并计算平均响应值。(2)根据属于人参二醇组的其余人参皂苷对照品，鉴别人参皂苷总类成分的高效液相色谱图中相对应的人参皂苷色谱峰。(3)根据蒸发光散射检测器对同系物的响应值相同的原理，利用步骤(1)中的平均响应值，计算属于人参二醇组的其余皂苷的含量。(4)按照步骤(1)～(3)，测定不少于10批符合指纹图谱相关技术要求的含人参总皂苷的样品，根据测定结果计算各种人参皂苷各自的平均含量。(5)将人参二醇组皂苷中各种皂苷的组成比例设定为权数，按照下列公式计算加权平均分子量。S＝aX+bY+…S代表加权平均分子量X、Y、…代表单体人参皂苷的分子量a、b、…代表权数，即对应单体人参皂苷的组成百分比(6)同法测定人参三醇组皂苷和齐墩果酸组皂苷各自的加权平均分子量。
全文摘要
本发明公开了一种检测人参皂苷总类成分含量的方法，属于医药技术领域。现有技术检测方法专属性差，杂质干扰明显，检测误差较大。本发明先采用高效液相色谱方法测定人参皂苷元含量，后分别根据人参二醇组皂苷、人参三醇组皂苷和齐墩果酸组皂苷各自的加权平均分子量与相对应皂苷元分子量之比值，计算人参皂苷总类成分含量。该方法专属性强，可有效消除杂质干扰，获得良好的检测效果。
文档编号G01N33/15GK1963494SQ200610022399
公开日2007年5月16日 申请日期2006年12月4日 优先权日2006年12月4日
发明者罗益民, 蔡炜 申请人:罗益民