专利名称：：巴菲蛤浓缩液酸解产物的梅拉德反应化学成分的测定方法
技术领域：
：本发明属于化学分析领域，特别是一种巴菲蛤浓縮液酸解产物的梅拉德反应化学成分的测定方法。
背景技术：
：梅拉德反应是氨基化合物与还原糖之间发生的复杂反应，是食品香味产生的主要来源之一。法国化学家梅德拉曾发现甘氨酸与葡萄糖的混合物加热时，形成褐色变化反应的类黑精。以后人们发现这类反应不仅影响其颜色，而且对香味也有重要作用。所以将此反应称为梅拉德反应，也叫非酶褐变反应。梅拉德反应产生大量致香成分，已被用于制备各类香精香料、增香剂。当使用氨基酸的种类、配比和反应条件不同时，会产生不同风格香型的香精基，由于梅拉德反应无论从反应as是产物，均可视作天然，这些香精基被国际权威机构认定为"天然的"，因而其应用已广受各国关注。在有机化学、食品化学、香料化学、食品工业、烟草工业等领域的研究方兴未艾。巴菲蛤属于"巴菲属"，它的外壳有形似水波的纹路，称为"波纹巴菲蛤"，因它的纹路像花一样美丽，也称它为"花蚶"等。它是一种属亚热带暖水性品种，潮下带浅海生活的双壳类，分布于水深8.0以内的浅水区，营埋栖生活在泥沙底质或软泥底质中有时称"泥蚶"。巴菲蛤体态呈长卵圆形、壳面呈淡棕褐色水波状纹路的贝类，我国主要在福建、广东、广西等地的海域里生长，是一种经济价值较高的双壳类软体动物，也是深受国内外客户所喜爱的海鲜品。蛤肉内富含丰富的人体需要的维生素和氨基酸，其中特有的营养成分包括血红蛋白和维生素B12等，对人体有补血、温中、健胃的功效。早在三国时期《临海异物志》中曾载有"益血色"之功效，清朝《食疗本草》载蚶"润五脏，治消渴，开关节"。《四声本草》"温中消食，起阳"。《医林纂要》也说"补心血，散瘀血，除烦醒酒，破结消痰"。人们在加工巴菲蛤时取肉将其蒸煮熟后产生汁液，汁液中含有丰富的营养成分，但多数情况都作为废物弃掉。
发明内容本发明的目的是提供一种巴菲蛤浓縮液酸解产物的梅拉德反应化学成分的测定方法，是以废弃的巴菲蛤浓縮液为原料从中提取有价值的物质，为巴菲蛤浓縮液的综合利用提供一种可行的的方法，对环境的保护和废弃物的利用有现实的意义。本发明包括鲜活巴菲蛤将外壳刷净，用自来水冲洗，去壳取其贝肉或全脏器，即整个软体部，用去离子水冲洗后，于筛绢网上沥尽水分，制得湿样，沸水回流蒸煮l.52.5小时，得蒸煮液，将浓縮汁于50'C恒温烘干至固体状，磨碎，准确称取干燥粉末3545g置于250ml三口烧瓶中，加入80150ml的HC1(6mol/L)，105115'C回流加热水解1215h;水解完后减压蒸发赶酸，蒸发至干后，加入原来体积的水再蒸发，如此反复几次直至赶酸完毕，加入适量活性炭粉末置于8590'C水浴中脱色，当溶液颜色澄清时，趁热过滤，滤液减压浓縮后烘干得固状物，然后称取水解所得固状物l.52.5g，称取6.08.Og葡萄糖或蔗糖，加6080ml水溶解，并用氢氧化钠调节溶液的pH至7左右，将上述溶液倒入250ml三口烧瓶中，在装有回流冷凝管的水浴中加热，在95100'C温度搅拌当回流，反应半小时后溶液由浅黄色变深黄色，随着时间的转移，颜色由黄到浅棕色再到棕色，在反应3.55.0h后，颜色变为深棕红色，停止加热，并使反应液冷却，该反应液初闻有香甜味再闻则略带有焦味，取50ml反应液加入NaCl使其饱和，然后分别以40、30、20、lOmL的乙醚进行4次萃取，每次l0—15^>钟，将各次萃取液合并浓縮至l.52.OmL。'本发明提取工艺简单实用。巴菲蛤浓縮液酸解产物与还原糖进行梅拉德反应对其醚溶性成分气相色谱-质谱(GC-MS)分析测定方法快捷迅速，4-羰基正戊酸是其中的主要产物。4-羰基正戊酸是应用范围很广附加值较高的有机物，对其进行回收和市场开发前景好。具体实施例方式巴菲蛤浓縮汁液的酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应中醚性物质的气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法，图谱检测出9个峰。巴菲蛤浓縮汁液的酸解产物与蔗糖的梅拉德反应中醚性物质的气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法，图谱检测出6个峰。采用色谱峰面积归一化法确定巴菲蛤浓縮汁液的酸解产物中脂溶性物质的各组成及含量结果见表l和表2。巴菲蛤浓縮汁液的酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应中的醚溶性能被确定成分有八种烷类2种2-乙氧基丙烷和3，5-二异丁基-4-羟基甲苯；酯类两种乙酰丙酸乙酯和乙酸戊酯；羧酸类2种4-羰基正戊酸和丁二酸；另外还含有呋喃醛、吡喃酮各一个5-羟甲基2-呋喃醛和2,6-二甲基-4-H-吡喃-4-酮；巴菲蛤浓縮汁液的酸解产物与蔗糖'的梅拉德反应中的醚溶性能被确定成分有5种:酯类两种2-羟基丙酸乙酯和邻苯二酸异丙酯；羧酸类1种4-羰基正戊酸；另外还含有酰胺N-酰氧基-N-乙酰基乙酰胺。表l巴菲蛤浓缩汁液的酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应中的醚溶性成分<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表2<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>实施例l巴菲蛤浓縮汁液酸解方法鲜活巴菲蛤将外壳刷净，用自来水冲洗，去壳取其贝肉或全脏器，即整个软体部，用去离子水冲洗后，于筛绢网上沥尽水分，制得湿样。沸水回流蒸煮1.52.5小时，得蒸煮液。将浓縮汁于50'C恒温烘干至固体状，磨碎，准确称取干燥粉末3545g置于250ml三口烧瓶中，加入80150ml的HCl(6mol/L),105115'C回流加热水解1215h;水解完后减压蒸发赶酸，蒸发至干后，加入原来体积的水再蒸发，如此反复几次直至赶酸完毕。加入适量活性炭粉末置于859(TC水浴中脱色，当溶液颜色澄清时，趁热过滤，滤液减压浓縮后烘干得固状物。实施例2巴菲蛤浓縮汁液的酸解产物与还原糖的梅拉德反应称取水解所得固状物1.52.5g，称取6.08.0g葡萄糖或蔗糖，加6080ml水溶解，并用氢氧化钠调节溶液的pH至7左右，将上述溶液倒入250ml三口烧瓶中，在装有回流冷凝管的水浴中加热，在95100'C温度搅拌当回流。反应半小时后溶液由浅黄色变深黄色，随着时间的转移，颜色由黄到浅棕色再到棕色，在反应3.55.0h后，颜色变为深棕红色，停止加热，并使反应液冷却，该反应液初闻有香甜味再闻则略带有焦味，取50ml反应液加入NaCl使其饱和，然后分别以40、30、20、10mL的乙醚进行4次萃取，每次十到十五分钟，将各次萃取液合并浓縮至1.52.0mL。实施例3气相色谱-质谱(GC-MS)测试条件GC条件2010型气相色谱仪，毛细管柱，载气为氦气，柱温60'C，进样温度250'C，柱压7L5kPa，载气流量3ral/min。MS条件EI离子源，电子能量70eV，电离温度20(TC，界面温度230'C，扫描时间2-40min，扫描质量范围20-500amu。权利要求1、一种巴菲蛤浓缩液酸解产物的梅拉德反应化学成分的测定方法，其特征是包括鲜活巴菲蛤将外壳刷净，用自来水冲洗，去壳取其贝肉或全脏器，即整个软体部，用去离子水冲洗后，于筛绢网上沥尽水分，制得湿样，沸水回流蒸煮1.5～2.5小时，得蒸煮液，将浓缩汁于50℃恒温烘干至固体状，磨碎，准确称取干燥粉末35～45g置于250ml三口烧瓶中，加入80～150ml的HCl(6mol/L)，105～115℃回流加热水解12～15h；水解完后减压蒸发赶酸，蒸发至干后，加入原来体积的水再蒸发，如此反复几次直至赶酸完毕，加入适量活性炭粉末置于85～90℃水浴中脱色，当溶液颜色澄清时，趁热过滤，滤液减压浓缩后烘干得固状物，然后称取水解所得固状物1.5～2.5g，称取6.0～8.0g葡萄糖或蔗糖，加60～80ml水溶解，并用氢氧化钠调节溶液的pH至7左右，将上述溶液倒入250ml三口烧瓶中，在装有回流冷凝管的水浴中加热，在95～100℃温度搅拌当回流，反应半小时后溶液由浅黄色变深黄色，随着时间的转移，颜色由黄到浅棕色再到棕色，在反应3.5～5.0h后，颜色变为深棕红色，停止加热，并使反应液冷却，该反应液初闻有香甜味再闻则略带有焦味，取50ml反应液加入NaCl使其饱和，然后分别以40、30、20、10mL的乙醚进行4次萃取，每次10-15分钟，将各次萃取液合并浓缩至1.5～2.0mL，采用气相色谱-质谱(GC-MS)测定方法，图谱采用色谱峰面积归一化法确定巴菲蛤浓缩汁液的酸解产物中脂溶性物质的各组成及含量，巴菲蛤浓缩汁液的酸解产物与葡萄糖的梅拉德反应中的醚溶性能被确定成分有八种烷类2种2-乙氧基丙烷和3，5-二异丁基-4-羟基甲苯；酯类两种乙酰丙酸乙酯和乙酸戊酯；羧酸类2种4-羰基正戊酸和丁二酸；另外还含有呋喃醛、吡喃酮各一个5-羟甲基2-呋喃醛和2，6-二甲基-4-H-吡喃-4-酮；巴菲蛤浓缩汁液的酸解产物与蔗糖的梅拉德反应中的醚溶性能被确定成分有5种酯类两种2-羟基丙酸乙酯和邻苯二酸异丙酯；羧酸类1种4-羰基正戊酸；另外还含有酰胺N-酰氧基-N-乙酰基乙酰胺。全文摘要一种巴菲蛤浓缩液酸解产物的梅拉德反应化学成分的测定方法，以巴菲蛤浓缩液为原料，用稀盐酸为溶剂回流得水解产物，其水解产物分别与葡萄糖、蔗糖进行梅拉德反应得棕色产物，两种棕色产物有较浓的香味，对其醚溶性成分采用GC-MS分析，总共鉴定出十三种物质其中水解产物与葡萄糖反应有8种，与蔗糖反应得5种。本项发明的创新性在于巴菲蛤浓缩液酸解氨基酸提取工艺简单实用。巴菲蛤浓缩液酸解产物与还原糖进行梅拉德反应对其醚溶性成分气相色谱-质谱(GC-MS)分析测定方法快捷迅速，4-羰基正戊酸是其中的主要产物。4-羰基正戊酸是应用范围很广附加值较高的有机物，对其进行回收和市场开发前景好。文档编号G01N30/88GK101614714SQ200810029068公开日2009年12月30日申请日期2008年6月23日优先权日2008年6月23日发明者宋文东,谷长生,郝晓敏,陈济铭,颜建斌申请人:广东海洋大学