专利名称：一种从燕窝中提取牛磺酸的方法及其检测方法
技术领域：
本发明涉及一种从燕窝中提取牛磺酸的方法及其检测方法。
背景技术：
燕窝是一种名贵的传统中药和保健食品，来源于雨燕科动物金丝燕及多种同属燕类用唾液与绒羽等混合凝结所筑成的巢窝。在《本草纲目》上对燕窝的药用价值的，评价为味甘淡平，大养肺阴，化痰止嗽，补而能清，为调理虚损劳瘵之圣药。一切病之由于肺虚不能清肃下行者，用此皆可治之；开胃气，已劳痢，益小儿痘疹，可入煎药，或单煮汁服。燕窝的产地主要是马来西亚和印尼，因为燕窝的产量少，药用价值高，加上燕窝的价格昂贵。市面上很多不法商贩，利用不同的原料，进行添加和造假燕窝。检测氨基酸的含量作为真假燕窝的依据受到大多数商家认可。目前现有技术中尚无一种行之有效的检测方法。

发明内容
针对上述现有技术，本发明提供了一种从燕窝中提取牛磺酸的方法及其检测方法。本发明检测燕窝中牛磺酸的含量，作为检测真假燕窝的指标之一，操作简单，快速，准
确，可靠。本发明是通过以下技术方案实现的一种从燕窝中提取牛磺酸的方法，步骤如下(I)取燕窝，粉碎，按燕窝(W):水(V) =1 :3 9 (单位g :ml)的比例加入水，在常温下超声(40MHz)提取I 3次，每次时间为30 60分钟，提取之后进行离心(9000rpm，10分钟),合并上清液；(2)向上述离心好的上清液中按上清液(W):无水乙醇(V) =3 :5 7 (单位g ml)的比例加入无水乙醇，在闭光的容器内放置0. 5 I小时，然后取出上清液(直接倒出或虹吸或过滤)；(3)上述上清液在50 65°C条件下旋转蒸发浓缩，得到浓缩液，干燥后即得到含牛磺酸的粉末状物质。一种牛磺酸的薄层层析检测方法，步骤如下(I)取样品液(即上述步骤(3)得到的浓缩液)IOul点在涂有硅胶GF254的高效薄层板(IOcmX IOcm)上，以正丙醇(v):无水乙醇(v):水(v):冰乙酸(v) =5 7 :0. 5 I :
I 2 :1 2作为展开剂,在展开缸(IOcmX 12cmX 15cm)内展开,展距为6cm,并采用外标一点法点Iul (0. 12,0. 192,0. 24,0. 36,0. 48mg / ml)牛磺酸标准品溶液，同时展开，展开的时间为60分钟，展开的距离为6cm ；(2)展完后取出展板晾干，以质量浓度为I 2%的水合茚三酮的乙醇溶液为染色液喷雾染色在板上，放进烘箱里烘干5分钟，温度为1101，其Rf=O. 62。(3)将烘干后的展板放在薄层扫描仪上，以485nm吸收波长进行扫描，通过检测样品和标准品的吸光度并计算得到燕窝中牛磺酸的含量。
上述检测方法，还需要进行以下辅助工作绘制标准曲线取Sigma公司销售的牛磺酸标准品溶解于水，其浓度分别为0. 12，0. 192,0. 24，
0.36,0. 48mg / ml,在高效薄层板上各点I y I,用Camag薄层扫描仪3,以485nm的吸收波长扫描，经扫描仪的软件Wincatsl. 4. I统计，得到的线性方程Y=4234. 5154+20. 6178X，相关系数 r=0. 99928，RSD=L 87%。经多次检测和计算，真品燕窝中的牛磺酸含量为12. 620 12. 720ug / g。、
本发明的牛磺酸的薄层层析检测方法，其精确度、板内变异、板间变异、加样回收率等情况如下I.精确度的测定制备0.24mg / ml牛磺酸标准溶液，在同一块高效薄层板上点四个点，每点为I V- I，分别在0, 2,4,6和8小时扫描测量,证明了 4小时后才稳定,如表I所不。2.板内变异和板间变异在板上分别滴I ill即0. 24mg / ml和0. 48mg / ml标准品溶液每隔12小时扫描定量，共测定2天。测得板内变异为0. 94% 2. 45%，而板间变异为0. 33% 2. 78%，如表2所示。3.加样回收率向提取配制的样品液中，加50，100和150%的牛磺酸标准品，其加样平均回收率为99. 68%，如表3所示。表I精确度
权利要求
1.一种从燕窝中提取牛磺酸的方法，其特征在于步骤如下 (1)取燕窝，粉碎，按燕窝(W)/Jc(V)=I :3 9的比例加入水，在常温下超声提取I 3次,每次时间为30 60分钟，提取之后进行离心，合井上清液； (2)向上述上清液中按上清液(W):无水こ醇(V)=3 5 7的比例加入无水こ醇，在闭光条件下放置0. 5 I小时,然后取出上清液； (3)上述上清液在50 65°C条件下旋转蒸发浓缩，得到浓缩液，即为含有牛磺酸的样品液，干燥后即得到含牛磺酸的粉末状物质。
2.根据权利要求I所述的ー种从燕窝中提取牛磺酸的方法，其特征在于所述步骤(I)中的离心条件为9000rpm，10分钟。
3.—种牛磺酸的薄层层析检测方法，其特征在于步骤如下 (1)取样品液10Ul点在涂有硅胶GF254的高效薄层板上，以正丙醇(V):无水こ醇(V):水(V):冰こ酸(V) =5 7 :0. 5 I :1 2 :1 2作为展开剂，在展开缸内展开，展距为6cm，并采用外标一点法点I y I牛磺酸标准品溶液，同时展开，展开的时间为60分钟，展开的距离为6cm ； (2)展完后取出展板晾干，以质量浓度为I 2%的水合茚三酮的こ醇溶液为染色液喷雾染色在板上，放进烘箱里烘干5分钟，温度为110°C ； (3)将烘干后的展板放在薄层扫描仪上，以485nm吸收波长进行扫描，通过检测样品和标准品的吸光度并计算得到燕窝中牛磺酸的含量； 所述样品液是通过以下方法制备得到的 (1)取燕窝，粉碎，按燕窝(W)/JC(V)=I :3 9的比例加入水，在常温下超声提取I 3次,每次时间为30 60分钟，提取之后进行离心，合井上清液； (2)向上述上清液中按上清液(W):无水こ醇(V)=3 5 7的比例加入无水こ醇，在闭光条件下放置0. 5 I小时,然后取出上清液； (3)上述上清液在50 65°C条件下旋转蒸发浓缩，得到浓缩液，即为样品液。
全文摘要
本发明公开了一种从燕窝中提取牛磺酸的方法及其检测方法用超声波提取法从燕窝中提取牛磺酸，经离心除杂和浓缩制备样品液，同牛磺酸标准品液采用外标一点法，在涂有硅胶GF254高效薄层板上展开，展开剂为按比例配制的正丙醇、无水乙醇、水和冰乙酸的混合液。水合茚三酮的乙醇溶液为染色液，其中水合茚三酮浓度为1～2％。展完后的展板，用染色液喷雾染色。将板放进烘箱里5分钟，温度为110℃。以485nm吸收波长进行薄层扫描，计算得到燕窝中牛磺酸含量。本发明检测燕窝中牛磺酸的含量，作为检测真假燕窝的指标之一，操作简单，快速，准确，可靠。
文档编号G01N30/90GK102735790SQ20121024860
公开日2012年10月17日 申请日期2012年7月18日 优先权日2012年7月18日
发明者刘代成, 张北山, 马夫翠 申请人:山东师范大学