专利名称：快速测定循环水中含菌量的方法
技术领域：
本发明涉及一种含有微生物的定量测定方法，尤其是一种测定循环水中含菌量的方法。
在工业生产的循环水系统中，需要经常测定水中含菌情况，特别是所含有的异养菌，以进行水中含菌的控制和处理，确保生产装置的正常运行及提高设备的使用周期。目前，现有的测定循环水中含菌量的方法是平板菌落计数法，主要采用琼脂、蛋白胨、肉膏为培养基，需在无菌室内进行培养基的制备和操作，且操作繁琐，从测定准备到制出培养液需要8-10小时，再将培养液置于专门的细菌培养箱中经72小时培养后方才能出结果，测定时间较长，为生产现场提供的水质含菌数测定报告滞后，特别是在水质恶化时难以及时测定出含菌量，从而给水处理造成损失。
本发明之目的是提供一种改进的测定循环水中含菌量的方法，使其制备培养液操作工艺简便，测定菌数时间短，快速，能及时为生产现场提供水质含菌量测定结果，适应水处理及相关生产装备的需要。
为实现上述目的，本发明采用的解决方案是选择氯化三苯基四氮唑(TTC)作为测定循环中含菌量的染色剂，将TTC和蛋白胨、牛肉膏、氯化钠加蒸馏水按重量比为TTC0.1-0.2、蛋白胨4-6、牛肉膏1-2、氯化钠2-3、蒸馏水800-1200配制成PH7.5-8.5的染色培养基液，组装入试管经灭菌后备用；再取定量的被测循环水移入备好的染色培养基液试管中封闭摇匀后，置入温度为35-38℃的恒温培养箱中培养，至试管内培养液变成为浅粉红色，按所用培养时间计算出单位容积被测水中所含菌数。
由于氯化三苯基四氮唑(TTC)溶解于水呈无色溶液。它能进入生物的细胞内，作为人工受氢体，接受脱氢酶从基质上脱下来的氢，而本身被还原成红色的沉淀物。因此，TTC能使包括好氧及厌氧、自养及异养等活菌体染上红色。经数次试验结果表明，选择TTC染色法，应用染色培养基液培养测定循环水含菌量仅需几小时至十几小时，在常规化验室便可操作，其操作简便，测定快速，节省人力物力，能及时为生产现场提供水质含菌量的测定报告。该方法可广泛应用于化肥、炼油、化工、制药、纺织等行业循环水系统中测定含菌量，亦适用于筛选评价杀菌药剂的功效性能，系一种快速测定工业循环水中含菌量的新方法。
下面结合实施例对本发明作进一步详细说明。
本发明实施例1、染色培养基液的配制(1)染色培养基液配方(重量比)材料名称配方1配方2TTC 0.15g0.18g蛋白胨 4.5g 5g牛内膏 1.4g 1.8g氯化钠 2.2g 2.6g蒸馏水 1000g1000g(2)配制方法如按上述配方1配制成PH8的染色培养基液，分别按每管5毫升组装试管，再进行灭菌后备用。
2、菌数测定方法取1毫升被测水移入备好的5毫升染色培养液试管中，在酒精灯上将试管盖塞封闭，充分摇匀。每种被测水样做三支平行样管，并做一支不加被测水样的空白培养液试管。然后移入37±1℃的细菌培养箱中培养，至装有被测水样的试管中培养液变为浅粉红色，按所用培养时间由下列“含菌量与TTC变色时间对应表”得出单位容积被测水中含菌量。
对含菌量较大的被测水，也可用无菌水稀释一定倍数后再对照检测。
3、含菌量与TTC变色时间对应表<
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权利要求
1.一种快速测定循环水中含菌量的方法，包括由蛋白胨、牛肉膏和蒸馏水配制的培养基液，其特征是该测定方法还包括菌体染色剂氯化三苯基四氮唑(TTC)和培养基氯化钠，是按重量配比为TTC0.1-0.2、蛋白胨4-6、牛肉膏1-2、氯化钠2-3、蒸馏水800-1200配成为PH7.5-8.5的染色培养基液，组装试管灭菌后备用，再将定量的被测水移入备好的染色培养基液试管中封闭摇匀后，置入温度为35-38℃的培养箱内培养，至试管内培养基液变成浅粉红色，按所用培养时间由含菌量与TTC变色时间对应表得出单位容积被测水中的含菌量。
2.根据权利要求1所述快速测定循环水中含菌量的方法，其特征是含菌量与TTC变色时间对应表为
全文摘要
本发明提供了一种测定循环水中含菌量的方法。它采用TTC为染色剂,并与蛋白胨、牛肉膏、氯化钠、蒸馏水配制成染色培养基液,经组装试管后灭菌备用;再将定量的被测水移入备好的染色培养基液试管中封闭摇匀后,置入恒温培养箱内培养,至试管内培养液变为浅粉红色,按所培养时间得出单位容积被测水中含菌数。本发明操作简便,测定快速,能及时为生产现场提供水质含菌量的测定报告,系一种快速测定工业循环水中含菌量的新方法。
文档编号G01N33/48GK1171550SQ97112019
公开日1998年1月28日 申请日期1997年5月15日 优先权日1997年5月15日
发明者赵书培 申请人:河北沧州大化集团有限责任公司