专利名称：双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法
技术领域：
本发明涉及牙膏中氯化两面针碱含量的测定方法，属于高效液相色谱法测定物质含量的技术领域。
背景技术：
随着食品安全事件引起社会广泛关注，部分学者和社会舆论将视角延伸到“入口形”日化用品领域中，而牙膏作为口腔清洁用品是这一类产品的典型代表，关系到人身安全。对于功能性牙膏的质量与安全监督不可松懈。我国在中草药功效方面的研究有着辉煌悠久的历史，中草药功效型牙膏从面试至今已有几十年的历史，已经成为国内牙膏市场中的主类产品，一些国际日化用品企业为了加入中国市场也纷纷对中草药功效型牙膏进行开发和生产。这其中不免出现真假难辨、鱼目混珠的现象。氯化两面针碱为芸香科花椒属植物两面针Zan thoxylum ni tidum (Roxb.)DC的干燥根两面针中的苯并菲定类生物碱,英文名称:chloride ,分子式:C21H18NO4 - Cl，CAS号:13063-04-2，分子量:382.82，标准品为淡黄色针状结晶，溶于甲醇等有机试剂。氯化两面针碱是两面针的主要活性有效成分，具有抗炎、镇痛、解毒等作用。近年来，两面针药材资源开始出现匮乏，出现了较多根茎混用现象或伪品，如常见的飞龙掌血属的飞龙掌血asiatica Lam等,影响药材质量,随之影响了牙膏中所添加的两面针活性成分的质量。中国药典以氯化两面针碱为两面针含量测定的指标进行检测。牙膏基质为复杂的混合物，通常由摩擦剂、保湿剂、表面活性剂、增稠剂、甜味剂、色素、香精和活性添加物等组成。某些添加成分的化合物碳链比较长，在前处理中难以去除，同时，也对色谱柱的柱效有影响。用传统的高效液相色谱方法去分离、检测，其中的杂质对标准品氯化两面针碱的测定·有干扰。

发明内容
本发明要解决的技术问题是提供一种双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，本发明方法操作简单，快速，选择性好，重现性好；能够使目标分析物的色谱峰与杂质色谱峰达到较好的基线分离，可以排除牙膏基质中干扰物的干扰，准确地对牙膏中的氯化两面针碱进行定量分析，且分离效果好，线性范围宽。本发明所采取的技术方案是:一种双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，包括以下步骤:(1)绘制氯化两面针碱的标准曲线(2)准确称取待测牙膏放置于具塞离心管中，加入甲醇振荡、摇匀，用甲醇定容；
(3)将步骤(I)的具塞离心管室温下超声处理，离心，取上清液用0.22 μ m的有机相滤膜过滤得待测溶液；
(4)利用双三元高效液相色谱法二维柱分离，紫外检测器测定待测溶液中氯化两面针碱，根据步骤(I)的标准曲线得出牙膏待测溶液中氯化两面针碱的含量；
采用C18 二维色谱柱测定；
第一维色谱柱为富集柱C18柱(2.1mmX IOOmm, 5 μ m),第二维色谱柱为分析柱C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m)。所述步骤(4)中采用C18 二维色谱柱测定的优选条件为:以乙腈和0.02mol/LKH2PO4溶液为流动相，流动相加H3PO4调节pH值为2.61 2.75，检测波长为328nm，进样量为50uL，色谱柱柱温为40°C，等梯度洗脱，乙腈与KH2PO4溶液的体积比是35:65，流速为
0.5 L 2mL/min ；
权利要求
1.一种双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，其特征在于:包括以下步骤:(1)绘制氯化两面针碱的标准曲线图； (2)准确称取待测牙膏放置于具塞离心管中，加入甲醇振荡、摇匀，用甲醇定容； (3)将步骤(I)的具塞离心管室温下超声处理，离心，取上清液用0.22 μ m的有机相滤膜过滤得待测溶液； (4)利用双三元高效液相色谱法二维柱分离，紫外检测器测定待测溶液中氯化两面针碱，根据步骤(I)的标准曲线得出牙膏待测溶液中氯化两面针碱的含量； 采用C18 二维色谱柱测定； 第一维色谱柱为富集柱C18柱(2.1mmX IOOmm, 5 μ m),第二维色谱柱为分析柱C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m)。
2.如权利要求1所述的双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，其特征在于:所述步骤(4)中采用C18 二维色谱柱测定的条件为:以乙腈和0.02mol/L KH2PO4溶液为流动相，流动相加H3PO4调节pH值为2.61 2.75，检测波长为328nm，进样量为50uL，色谱柱柱温为40°C，等梯度洗脱，乙腈与KH2PO4溶液的体积比是35:65，流速为 0.5 1.2mL/min ； 十通阀的切换时间如下:
3.如权利要求2所述的双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，其特征在于:步骤(4)中流动相的流速为1.0mL/min。
4.如权利要求1所述的双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，其特征在于:步骤(2)中每克待测牙膏定容至10mL。
5.如权利要求1所述的双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，其特征在于:步骤(3)中超声处理的时间为15分钟。
6.如权利要求1所述的双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，其特征在于:步骤(3)中IOOOOrpm离心处理5分钟。
全文摘要
本发明公开了一种双三元二维柱高效液相色谱法测定牙膏中氯化两面针碱含量的方法，属于高效液相色谱法测定物质含量的技术领域。包括以下步骤(1)绘制标准曲线图；(2)将待测牙膏放置于具塞离心管中用甲醇定容；(3)制备待测溶液；(4)利用双三元高效液相色谱法二维柱分离，紫外检测器测定氯化两面针碱，根据标准曲线得出氯化两面针碱的含量。本发明方法操作简单，快速，选择性好，重现性好；能够使目标分析物的色谱峰与杂质色谱峰达到较好的基线分离，可以排除牙膏基质中干扰物的干扰，准确地对牙膏中的氯化两面针碱进行定量分析，且分离效果好，线性范围宽。
文档编号G01N30/46GK103235068SQ201310137628
公开日2013年8月7日 申请日期2013年4月19日 优先权日2013年4月19日
发明者张岩, 丛斌, 张敬轩, 刘敬泽, 李挥, 滕文华, 吕品, 庞坤, 李强, 夏静 申请人:河北省食品质量监督检验研究院