专利名称：复方苁蓉益智胶囊的检测方法
技术领域：
本发明涉及药品检验技术领域。具体地说，本发明涉及一种中成药的检测方法。
背景技术：
传统中成药检测方法只能定性说明中成药的成分，高效和定量的检测中成药的成分，是现代中药产业急需解决的技术问题。复方苁蓉益智胶囊由五种天然药物经过粉碎、提取、煎煮、过滤、干燥等一系列工艺制成，具有良好的益智养肝，活血化浊，健脑增智的作用。用于轻、中度血管性痴呆肝肾亏虚兼痰瘀阻络，对智力减退、思维迟钝、神情呆滞、健忘，或喜怒不定、腰膝酸软、头晕耳鸣、失眠多梦等都有较好的疗效。复方苁蓉益智胶囊为硬胶囊，内容物为棕褐色的粉末；气微，味咸、微苦。主要由制何首乌、荷叶、肉苁蓉、地龙和漏芦制成，其中，何首乌具有抗衰老、降血脂、促进红细胞的生·长发育、抗动脉粥样硬化、增加冠状动脉血流量的作用和保护神经元的作用；肉苁蓉具有补肾阳，益精血，润肠通便的作用，能够调整内分泌、促进代谢、延缓衰老；地龙具有较强的抗凝血、抗血栓形成作用，并且还能够促进已形成的血栓逐渐溶解；漏芦具有改善高脂血症，减轻动脉硬化病变，降低血清中过氧化脂质水平，减少心、脑、肾等组织内脂褐素含量的作用；荷叶具有降血脂的作用。复方苁蓉益智胶囊的处方如下制何首乌 833g 荷叶 583g肉苁蓉 417g 地龙 417g漏芦250g复方苁蓉益智胶囊的制法如下以上五味，制何首乌粉碎成粗粉，用75%乙醇回流二次，第一次加8倍量提取I小时，第二次加6倍量提取I小时，合并乙醇提取液，浓缩至相对密度为1.28 1.30(60°C)的清膏。荷叶、肉苁蓉、漏芦加水煎煮二次，第一次加12倍量水，煎煮2小时，第二次加10倍量水，煎煮I小时，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为I. 04 I. 05 (600C )，放冷，加乙醇使含醇量达60%，冷藏12小时，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.28 1.30(6(TC )的清膏，与上述清膏合并，80°C以下真空(O. OSMPa)干燥。地龙粉碎成粗粉，加入4倍量水匀浆5次，每次15分钟，合并匀浆液，加乙醇使含醇量为10%，离心，取上清液加乙醇使含醇量达50%，离心，沉淀物用丙酮洗涤二次，离心，沉淀物真空(O. 08MPa)干燥，与上述干浸膏合并,加适量糊精,粉碎成中粉，装入胶囊，制成1000粒，即得。复方苁蓉益智胶囊的制法复杂，其疗效受药材的品质、含量和药剂的制作工艺影响较大。然而现有的检测方法，定性、定量检测不全面，无法更好的保证药品的质量，进而对药品使用的安全性和有效性构成威胁
发明内容
本发明为解决上述现有技术的不足，提供一套全面有效的检测方法，严格控制复方苁蓉益智胶囊的质量稳定性。本发明提供的复方苁蓉益智胶囊的检测方法包括如下步骤A)内容物性状观察；B)薄层色谱法鉴别方中何首乌、荷叶、肉苁蓉、地龙和漏芦；C)根据中国药典2010年版一部附录IL，检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定；和D)高效液相色谱法测定方中何首乌的含量。在本发明中，步骤A)的观察即粉末性状观察，也就是对复方苁蓉益智胶囊药品进 行观察，其内容物应当为棕褐色的粉末；气微，味咸、微苦。步骤B)的鉴别包括(I)取复方苁蓉益智胶囊内容物2g，加丙酮15ml，超声处理40分钟，滤过，滤液作供试品溶液。另取何首乌对照药材2g，同法制成对照药材溶液。再取大黄素对照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VIB)试验，吸取供试品溶液15 μ I、对照品药材溶液3 μ I、对照品溶液I μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以石油醚(60 90°C ) —甲酸乙酯一甲酸(体积比15 5 I)的上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。(2)取复方苁蓉益智胶囊内容物4g，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残洛加1%盐酸溶液IOml使溶解,滤过,滤液加浓氨试液调节pH值至9 10，用三氯甲烷振摇提取3次，每次IOml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用少量三氯甲烷使溶解，通过中性氧化铝柱(100 200目，lg，内径O. 8cm)，用三氯甲烷洗脱，收集洗脱液5ml，蒸干，残渣加三氯甲烷O. 2ml使溶解，作为供试品溶液。另取荷叶对照药材2g，加60%乙醇40ml，回流20分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI
B)试验，吸取上述两种溶液各5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷一丙酮一浓氨试液(体积比6 2 O. I)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点。(3)取复方苁蓉益智胶囊内容物lg，加甲醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液。另取肉苁蓉对照药材2g，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜(8X8cm)上，以甲醇一冰醋酸一水(体积比2 I 7)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点。(4)取复方苁蓉益智胶囊内容物lg，* 20%乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液通过颗粒状活性碳柱(O. 5g，高4. OcmX直径O. 8cm)，收集洗脱液，作为供试品溶液。另取地龙对照药材O. 5g，置乳钵中，加水研磨2次，每次5ml，离心，合并上清液，加无水乙醇15ml，摇匀，静置30分钟，离心，弃去上清液，收集沉淀物，用60%乙醇2ml洗涤一次，沉淀物加20%乙醇2. 5ml使溶解，取上清液作为对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取供试品溶液5μ 1，对照药材溶液10μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正丁醇一冰醋酸一水(体积比7 2 I)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热5 10分钟。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。(5)取复方苁蓉益智胶囊内容物lg，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液。另取漏芦对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法(中国药典2010年版一部附录VI B)试验，吸取上述两种溶液各5^1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷一丁酮(4 I)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。步骤C)的检查根据中国药典2010年版一部附录I L，检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定。即，水分、装量差异、崩解时限、重金属检查、砷盐检查、微生物限度检查应当符合规定。步骤D)的含量测定包括 照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇一乙腈一水一磷酸(体积比10 20 110 0.01)为流动相；检测波长为320nm。理论板数按2，3，5，4f -四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷峰计算应不低于2500。对照品溶液的制备取五氧化二磷减压干燥至恒重的2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷对照品I. Omg,精密称定，置50ml棕色量瓶，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得(每Iml中含2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷O. 02mg)(避光保存)。供试品溶液的制备取复方苁蓉益智胶囊装量差异项下内容物，研成细粉，混匀，取细粉约O. 15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理(功率100W，频率40KHZ) 20分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇勻，上清液用微孔滤膜(O. 45 μ m)滤过，即得(避光保存)。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10 μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得。所述复方苁蓉益智胶囊每粒含制何首乌以2，3，5，4'-四羟基二苯乙稀-2-0- β -D-匍萄糖昔(C20H22O9)计，不得少于O. 70mg。通过上述检测方法，能够对复方苁蓉益智胶囊的成分及含量做很好的定性检测和定量检测，保证药品的质量，从而提高药品使用的安全性和有效性。
权利要求
1.一种复方苁蓉益智胶囊的检测方法，其特征在于，该方法由下列步骤组成 A)内容物性状观察； B)薄层色谱法鉴别方中何首乌、荷叶、肉苁蓉、地龙和漏芦； C)根据中国药典2010年版一部附录IL，检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定；和 D)高效液相色谱法测定方中何首乌活性成分的含量。
2.根据权利要求I所述的复方苁蓉益智胶囊的检测方法，其特征在于， 所述步骤B)的步骤如下 (1)取复方苁蓉益智胶囊内容物2g，加丙酮15ml，超声处理40分钟，滤过，滤液作供试品溶液；另取何首乌对照药材2g，同法制成对照药材溶液；再取大黄素对照品，加甲醇制成每Iml含O. Img的溶液，作为对照品溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液15 μ I、对照品药材溶液3μ1、对照品溶液Ιμ ，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比15 : 5 : I比例的石油醚一甲酸乙酯一甲酸上层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材、对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点； (2)取复方苁蓉益智胶囊内容物4g，加甲醇50ml，加热回流30分钟，滤过，滤液蒸干，残洛加1%盐酸溶液IOml使溶解,滤过,滤液加浓氨试液调节pH值至9 10，用三氯甲烷振摇提取3次，每次IOml，合并三氯甲烷液，蒸干，残渣用少量三氯甲烷使溶解，通过中性氧化铝柱，用三氯甲烷洗脱，收集洗脱液5ml，蒸干，残渣加三氯甲烷O. 2ml使溶解，作为供试品溶液；另取荷叶对照药材2g,加60%乙醇40ml，回流20分钟，滤过，滤液同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比6 : 2 : O. I比例的三氯甲烷一丙酮一浓氨试液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾试液；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色斑点； (3)取复方苁蓉益智胶囊内容物lg，加甲醇10ml，超声处理10分钟，滤过，滤液作为供试品溶液；另取肉苁蓉对照药材2g，加甲醇5ml，同法制成对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2 μ 1，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以体积比2 I 7比例的甲醇一冰醋酸一水为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上，显相同颜色的荧光斑点； (4)取复方苁蓉益智胶囊内容物Ig,加20%乙醇10ml，超声处理20分钟，滤过，滤液通过颗粒状活性碳柱，收集洗脱液，作为供试品溶液；另取地龙对照药材O. 5g，置乳钵中，力口水研磨2次，每次5ml，离心，合并上清液，加无水乙醇15ml，摇匀，静置30分钟，离心，弃去上清液，收集沉淀物，用60%乙醇2ml洗涤一次，沉淀物加20%乙醇2. 5ml使溶解，取上清液作为对照药材溶液；照薄层色谱法试验，吸取供试品溶液5 μ 1，对照药材溶液10 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比7 2 I比例的正丁醇一冰醋酸一水为展开剂，展开，取出，晾干，喷以茚三酮试液，在105°C加热5 10分钟；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； (5)取复方苁蓉益智胶囊内容物lg，加甲醇20ml，超声处理20分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加乙酸乙酯Iml使溶解，作为供试品溶液；另取漏芦对照药材lg，同法制成对照药材溶液，照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各5 μ 1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比4 I的环己烷一丁酮为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外灯(365nm)下检视；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。
3.根据权利要求I或2所述的复方苁蓉益智胶囊的检测方法，其特征在于， 所述步骤D)的步骤如下 色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以.10 20 110 O. 01体积比的甲醇一乙腈一水一磷酸为流动相；检测波长为320nm;理论板数按2，3，5，4f -四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷峰计算应不低于2500 ； 对照品溶液的制备取五氧化二磷减压干燥至恒重的2，3，5，4 '-四羟基二苯乙烯-2-0- β -D-葡萄糖苷对照品I. Omg,精密称定，置50ml棕色量瓶，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得，每Iml中含2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β-D-葡萄糖苷O. 02mg，避光保存； 供试品溶液的制备取复方苁蓉益智胶囊装量差异项下内容物，研成细粉，混匀，取细粉约O. 15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇20ml，密塞，称定重量，超声处理20分钟，取出，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，上清液用微孔滤膜滤过，即得，避光保存； 测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定，即得; 所述复方苁蓉益智胶囊每粒含制何首乌以2，3，5，4'-四羟基二苯乙烯-2-0-β -D-葡萄糖苷计，不得少于O. 70mg。
全文摘要
本发明提供一种复方苁蓉益智胶囊的检测方法，包括如下步骤A)内容物性状观察；B)薄层色谱法鉴别方中何首乌、荷叶、肉苁蓉、地龙和漏芦；C)根据中国药典2010年版一部附录IL，检查应符合胶囊剂项下有关的各项规定；和D)高效液相色谱法测定方中何首乌活性成分的含量。采用这种方法，能够对复方苁蓉益智胶囊的成分及含量做很好的定性检测和定量检测，保证药品的质量，从而提高药品使用的安全性和有效性。
文档编号G01N30/90GK102914615SQ201210390779
公开日2013年2月6日 申请日期2012年10月15日 优先权日2012年10月15日
发明者卢海涛, 赵玉龙 申请人:辽源誉隆亚东药业有限责任公司