专利名称：蜡笔中芳香胺的测定方法
技术领域：
本发明涉及蜡笔中芳香胺的测定方法。
背景技术：
蜡笔中的主要成分是蜡类、凡士林、矿物油、碳酸钙、硬脂酸、染料等。由于生产工艺和使用原料不合格等原因，蜡笔中会残留一些对人体有害的物质，其中最主要的是可致癌的芳香胺类物质。这类物质在蜡笔中主要来自于某些偶氮染料的分解，如果蜡笔制造过程中使用了这些偶氮染料，那么当蜡笔与人体直接接触后，这些物质会在人体代谢物(如汗液、唾液)的作用下分解出芳香胺，并被人体吸收造成健康危害。在由欧盟标准化委员会制定的EN71系列标准中，规定不得在玩具中检出超过5mg/kg的苯胺邻甲苯胺、2-甲氧基苯胺、4-氯苯胺、2-萘胺、联苯胺、3，3- 二甲基联苯胺、3，3- 二氯联苯胺、3，3’- 二甲氧基联苯胺等9种致癌性芳香胺。致癌性芳香胺的检测方法由三个环节构成偶氮染料的还原裂解、芳香胺的提取及测定，三者缺一不可。其中芳香胺的提取是整个检测方法的关键，只有充分排除样品基质的干扰，高选择性的将芳香胺提取出来才能保证后续测定结果的准确可靠。目前文献报道的致癌性芳香胺的检测方法主要是针对纺织品、皮革等材质的样品，而由于蜡笔的组成成份与上述材质差别较大，现有检测方法并不适用于蜡笔中芳香胺的检测。

发明内容
本发明的目的是提供一种蜡笔中芳香胺的测定方法。本发明所提供的蜡笔中芳香胺的测定方法，包括如下步骤将蜡笔切成小块，用正己烷、环己烷或庚烷对样品进行超声前处理，去除正己烷、 环己烷或庚烷，获得前处理样品；使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈对所述前处理样品超声提取，获得提取液；去除所述提取液中的有机溶剂加入连二亚硫酸钠溶液在60 80°C下进行还原反应；反应后调整反应液pH7 9，然后经硅藻土柱吸附，用甲基叔丁基醚或乙醚洗脱， 获得洗脱液；在洗脱液中加入0.5 lmol/L盐酸溶液，去除上层有机层，调整剩下的水相的 PH7 9，再加入甲基叔丁基醚或乙醚，待有机相与水相完全分层后，取有机相进入气相色谱-质谱仪测定芳香胺。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈按照1 克蜡笔/20 60ml甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈的比例加入。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述连二亚硫酸钠溶液按照1克蜡笔 /0. 4 1克连二亚硫酸钠的比例加入。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述洗脱液与所述0.5 lmol/L盐酸溶液的体积比为30 1 50 1。 本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述洗脱液中加入0.5mol/L盐酸溶液。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈对所述前处理样品超声提取，获得提取液后，对剩余固体使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈进行超声提取，获得提取液，合并两次超声提取的提取液。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述芳香胺为苯胺、邻甲苯胺、2-甲氧联苯胺、4-氯苯胺、2-萘胺、联苯胺、3，3' -二甲基联苯胺、3，3' - 二氯联苯胺和/或3， 3' -二甲氧基联苯胺。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法，其中所述还原反应进行20 40分钟。本发明的蜡笔中芳香胺的测定方法填补了技术空白；有效避免了蜡笔中其他成份产生的基质干扰问题；采用常用的检测装置，方法易于普及。


图1为相同浓度的盐酸和乙酸处理后色谱图。图2为不同浓度的盐酸处理后的色谱图。
具体实施例方式实施例1、一、蜡笔中芳香胺的测定方法(一)蜡笔样品处理(1)称取一定质量的蜡笔，用洁净刀片切成小块，使用正己烷对蜡笔小块进行超声前处理，弃去正己烷，再将其在通风条件下挥发近干，获得前处理样品；(2)使用甲醇对前处理样品超声提取两次，按照1克蜡笔/40ml甲醇的比例加入甲醇；(3)将提取液离心后，收集澄清溶液至鸡心瓶中，用旋转蒸发器旋蒸至近干，再用缓氮气流吹干；(4)向鸡心瓶中加入200mg/ml连二亚硫酸钠溶液(pH6的柠檬酸盐缓冲溶液作为溶剂配置的200mg/ml连二亚硫酸钠溶液)，按照1克蜡笔/0. 6克连二亚硫酸钠的比例加入连二亚硫酸钠溶液，在70°C下反应30分钟，反应后冷却至室温；(5)在反应液中加入氢氧化钠溶液调整pH8，然后经硅藻土柱吸附，用甲基叔丁基醚洗脱后收集至鸡心瓶中；(6)在洗脱液中加入0. 5mol/L盐酸溶液、0. lmol/L盐酸溶液、lmol/L盐酸溶液或 0. lmol/L乙酸溶液，洗脱液与盐酸溶液的体积比为40 1，充分摇勻，然后用旋转蒸发器将上层有机层蒸干，在剩下的水相中加入0. 5mol/L氢氧化钠溶液调整pH8，再加入甲基叔丁基醚，充分摇勻，待有机相与水相完全分层后，取有机相进入气相色谱-质谱仪测定。( 二)气相色谱_质谱分离对气相色谱-质谱分离所采用的具体条件，包括色谱柱种类、程序升温条件、进样模式、进样口温度等不作限定，凡是可以有效分离9种目标物质的方法均可以使用。
下面给出的是典型的测定条件a.毛细管色谱柱HP-5M石英毛细管柱30mX0. 32mm i. d.，1. 80 μ m，或等效者；b.程序升温初始温度100°C (保持2min)，以10°C /min升至135°C (保持Omin)， 以 15°C /min 升至 185°C (保持 Imin)，以 15°C /min 升至 220°C (保持 12min)，以 8°C /min 升至280°C尾吹2min ；c.载气高纯氦，流速为1. OmL/min ；d.进样口温度280°C ；进样模式分流进样，分流比5:1;e.检测器质量选择检测器(MSD)；质量扫描范围50m/z 300m/z ；f.接口温度280°C ；g.离子化方式EI ；电离能量70eV ；h.监测方式SIM ；各物质的特征离子如下表所示表1. 9种芳香胺名称及其测定所使用的特征离子
权利要求
1.蜡笔中芳香胺的测定方法，包括如下步骤将蜡笔切成小块，用正己烷、环己烷或庚烷对样品进行超声前处理，去除正己烷、环己烷或庚烷，获得前处理样品；使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈对所述前处理样品超声提取，获得提取液；去除所述提取液中的有机溶剂加入连二亚硫酸钠溶液在60 80°C下进行还原反应；反应后调整反应液pH7 9，然后经硅藻土柱吸附，用甲基叔丁基醚或乙醚洗脱，获得洗脱液；在洗脱液中加入0. 5 lmol/L盐酸溶液，去除上层有机层，调整剩下的水相pH7 9， 再加入甲基叔丁基醚或乙醚，待有机相与水相完全分层后，取有机相进入气相色谱-质谱仪测定芳香胺。
2.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈按照1 克蜡笔/20 60ml甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈的比例加入。
3.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述连二亚硫酸钠溶液按照1克蜡笔/0. 4 1克连二亚硫酸钠的比例加入。
4.根据权利要求1所述的测定方法，其特征在于所述洗脱液与所述0.5 lmol/L盐酸溶液的体积比为30 1 50 1。
5.根据权利要求1至4中任一所述的测定方法，其特征在于所述洗脱液中加入 0. 5mol/L盐酸溶液。
6.根据权利要求5所述的测定方法，其特征在于所述使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈对所述前处理样品超声提取，获得提取液后，对剩余固体使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈进行超声提取，获得提取液，合并两次超声提取的提取液。
7.根据权利要求6所述的测定方法，其特征在于所述芳香胺为苯胺、邻甲苯胺、2-甲氧联苯胺、4-氯苯胺、2-萘胺、联苯胺、3，3' -二甲基联苯胺、3，3' - 二氯联苯胺和/或3， 3' -二甲氧基联苯胺。
8.根据权利要求7所述的测定方法，其特征在于所述还原反应进行20 40分钟。
全文摘要
本发明公开了一种蜡笔中芳香胺的测定方法。该方法将蜡笔切成小块，用正己烷、环己烷或庚烷对样品进行超声前处理，去除正己烷、环己烷或庚烷，获得前处理样品；使用甲醇、乙醇、异丙醇或乙腈对前处理样品超声提取，获得提取液；去除提取液中的有机溶剂加入连二亚硫酸钠溶液在60～80℃下进行还原反应；反应后将反应液调整pH7～9，然后经硅藻土柱吸附，用甲基叔丁基醚或乙醚洗脱，获得洗脱液；在洗脱液中加入0.5～1mol/L盐酸溶液，去除上层有机层，调整剩下的水相的pH7～9，再加入甲基叔丁基醚或乙醚，待有机相与水相完全分层后，取有机相进入气相色谱-质谱仪测定芳香胺。本发明的方法填补了技术空白；有效避免了蜡笔中其他成份产生的基质干扰问题。
文档编号G01N30/72GK102213697SQ20101014185
公开日2011年10月12日 申请日期2010年4月8日 优先权日2010年4月8日
发明者吕庆, 康苏媛, 张庆, 王超, 白桦 申请人:中国检验检疫科学研究院