专利名称：利用混合对照对中成药进行全面质量控制的方法
技术领域：
本发明涉及一种利用混合对照对中成药进行全面质量控制的方法。
背景技术：
中药的质量评价一直是一个难以解决的难点问题，自古有“丸散膏丹，神仙难辨” 之说，从新中国成立到现在，中药质量也实现了由凭过程经验控制到事后检验控制的过渡。 近年来，随着现代化学分析技术的不断进步，中成药内在化学成分的研究手段与方法越来 越多，将已知的内在成分及其测定方法用于质量控制，制定相应检验标准，有了很大进步， 如中国药典1963年版收载的中药材只有基源与外观状鉴别，中成药则仅有处方和制法，没 有任何检验项目。1977年版则大量采用了显微鉴别，从1985版药典开始，色谱、光谱技术在 中药质量控制上大量被采用，2005年版药典收载含量测定的中成药就有720种。但随着中 成药检测项目的不断增加，检验周期越来越长，使用的有毒有害试剂也越来越多，如中国药 典2010年版一部收载的牛黄解毒片有4项鉴别，1项含量，六味地黄丸收载有6项鉴别，2 项含量，这些药的检验周期均需1周以上，使用有毒有害试剂达6 10种。再者，中药作为 一个整体，强调的是辨证施治，强调的是各味药的协同作用，目前中成药中单一有效成分或 指标成分的控制，难以真正控制药品质量。有些药厂为了降低成本，利用药检质量标准不能 完全控制所有药味的漏洞，非法生产，对于一些无法检验的药味不投料或少投料，对于有含 量测定的药味多投料，使中成药疗效难以保证，对人民身体健康造成巨大威胁，而药检部门 也难以进行检测。这种情况下指纹图谱作为中成药、草药提取物这类含有混合物质群的质 量控制方法，已经成为目前的国际共识。但现阶段指纹图谱研究正处于起步时期，主要研究 组成相对简单的注射液的指纹图谱，其原因主要是指纹图谱受药材产地、加工，实验环境， 色谱条件等因素影响较大，各实验室间重现性差，难以推广，一些常见中成药还不能应用指 纹图谱控制质量。

发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种利用混合对照对中成药进行全面质量控 制的方法。本发明解决其技术问题是所采用的技术方案本发明具体步骤如下(1)获取供试品色谱图a 称取供试品；b 制备供试品溶液；按照所述供试品中各味原药材所含化学成分的性质选择相适应的提取方法制备 供试品溶液；c 按照所述供试品中各味原药材所含化学成份的性质选择相适应的色谱条件，测 试并记录供试品色谱(2)获取混合对照色谱图所述混合对照是指取所述供试品中各味对照药材按处方比例混勻所得的产物；a 称取与所述供试品等量的所述混合对照；b 制备混合对照溶液制备方法和工艺条件与所述供试品溶液的制备完全相同；c 在与上述第(1)步中的同一色谱条件下，测试并记录所述混合对照色谱图；(3)对比供试品色谱图与混合对照色谱图中各色谱峰保留时间是否一致。本发明测试色谱图采用的仪器包括高效液相色谱仪、气相色谱仪、超高效液相色 谱仪及液相色谱质谱联用仪、气相色谱质谱联用仪。本发明的有益效果如下(1)本发明引入了 “混合对照”这一全新的概念，采用混合对照药材与现代仪器分 析技术相结合，所得色谱信息量大。(2)利用混合对照模式可在同一色谱条件下对中成药中各个药味进行鉴别，克服 了常规中成药质量标准只对其中几味药进行鉴别的瓶颈问题，不仅可对药品整体质量进行 控制，而且大大节约了检验时间与成本。(3)本发明采取混合对照药材与供试品在同一实验条件下测定，克服了指纹图谱 对色谱柱、仪器的限制，易于推广应用。(4)本发明解决了现有中成药标准鉴别项目多，方法繁烦，有毒有害试剂使用量大 等问题，特别解决了现有标准在消耗大量人工和试剂的情况下不能完全控制药品的质量这 一长久以来困挠中成药发展的难题，可广泛应用于中成药质量控制、中药新药开发中。


图1为冠心苏合丸混合对照色谱图。图2为冠心苏合丸供试品色谱图。图3为止嗽定喘丸混合对照色谱图。图4为止嗽定喘丸供试品色谱图。
具体实施例方式实施例1 (利用气质联用技术对冠心苏合丸中各药味进行鉴别)冠心苏合丸由冰片、乳香、檀香、苏合香、土木香五味药材组成，具有理气宽胸，止 痛之功效，临床用于心绞痛、胸闷、憋气等病症的治疗。(1)主要仪器气相色谱质谱联用仪(Shimadzu 2010Plus,日本)，天平(Metters AE-163，瑞士)。(2)材料与试剂冰片、乳香、檀香、苏合香、土木香对照药材(中检所，批号 110743-200504、120970-200604、121240-200402、120931-200202、121090-200602)。供试品冠心苏合丸购自药店。水为纯净水，其它试剂均为分析纯。(3)色谱条件色谱柱Rtx-5ms弹性石英毛细管柱(30mX0. 25mmX0. 25 μ m)；程 序升温80°C保持4分钟，以10°C /min升至120°C，再以15°C /min升到280°C，保持3min ；
4进样口温度250°C ；载气为He气，载气流量1.2mL/min;进样量=IyL;分流比为20 1。(4)质谱条件离子源为EI源；离子源温度230°C ；接口温度280°C ；扫描范围 50 400amu ；溶剂延迟3min。(5)供试品溶液制备取冠心苏合丸5g，精密称定，置圆底烧瓶中，加水200ml，连 接挥发油测定器，自测定器上端加水溢流至烧瓶，加乙酸乙酯3ml，连接回流冷凝管，加热至 微沸，并保持3小时，放冷，分取乙酸乙酯液，水液再用乙酸乙酯萃取2次，每次加乙酸乙酯 5ml，合并乙酸乙酯液至25ml量瓶中，加乙酸乙酯至刻度，摇勻，作为供试品溶液。(6)混合对照溶液制备按冠心苏合丸处方比例称取上述对照药材适量，混勻，取 5g，同上述第(5)步制备方法制备混合对照溶液。(7)在同一色谱条件下分别测试并记录冠心苏合丸供试品色谱图(见图2)和冠心 苏合丸混合对照色谱图(见图1)。(8)对比图2与图1中各色谱峰保留时间是否一致，若一致则冠心苏合丸供试品质
量合格。在本实施例中，冠心苏合丸混合对照色谱图(图1)中各色谱峰对应各味对照药材 的确认方法如下分别取冰片、乳香、檀香、土木香、苏和香对照药材，按上述第(5)步方法制备各味对照药材溶液，并测定、记录各味对照药材的色谱图，对比混 合对照色谱与各味对照药材色谱，混合对照色谱显示16个色谱峰，经与各味对照药材色谱 比对，确认其中1-6号峰为冰片，7、13-16号峰为乳香，9、10号峰为檀香，11、12号峰为土木 香，8号峰为苏合香；各味药材不互相干扰。上述冠心苏合丸混合对照色谱图中各色谱峰对应的各味对照药材的确认方法，在 药检单位只需做一次，确认后可以对各药厂提供的供试品进行检验。实施例2 利用高效液相色谱技术对止嗽定喘丸中各药味进行鉴别。止嗽定喘丸由麻黄、苦杏仁、甘草、石膏四味药组成，有辛凉宜泄，清肺平喘之功 效，主要用于表寒里热，身热口渴，咳嗽痰盛，喘促气逆，胸膈满闷，急性支气管炎等症的治 疗。本处方中石膏为矿物药，无色谱行为，所以采用显微鉴别对其进行质量控制，对其它麻 黄、苦杏仁、甘草等三味药采用高效液相色谱法进行了质量控制。(1)主要仪器高效液相色谱仪(Shimadzu20A,日本)，天平(Metters AE-163，瑞士 )。(2)材料与试剂麻黄、苦杏仁、甘草对照药材(中检所提供，批号121051-200503、 121554-200601、120904-200511)供试品止嗽定喘丸购自药店。水为纯净水，其它试剂均为分析纯。(3)色谱条件色谱柱=C18 柱(Shim-pack 0DS, 4. 6 X 150mm)；流动相=A 乙腈，B 0. OlM磷酸二氢钾(三乙胺调pH为3. 5)，按附表1进行梯度洗脱，检测波长210nm，进样 量:10yL，柱温:25°C。(4)供试品溶液制备取止嗽定喘丸，研细，取lg，精密称定，置具塞锥形瓶中，精 密加0. 1 %甲酸溶液20ml，超声处理30min，放冷，摇勻，滤过，滤液作为供试品溶液。
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(5)混合对照溶液制备按止嗽定喘丸处方比例称取上述对照药材，混勻，取lg， 同上述第(4)步方法制备混合对照溶液。(6)在同一色谱条件下分别测试并记录止嗽定喘丸供试品色谱图(见图4)和止嗽 定喘丸混合对照色谱图(见图3)。(7)对比图4和图3中各色谱峰保留时间是否一致，若一致则说明止嗽定喘丸供试
品质量合格。在本实施例中，止嗽定喘丸混合对照色谱图(图3)中各色谱峰对应各味对照药材 的确认方法与实施例1相同。确认结果为混合对照色谱显示6个色谱峰，经与各味对照药 材色谱比对，确认其中1-2号峰为麻黄，3、5-6号峰为甘草，4号峰为苦杏仁。各味药材不互 相干扰。附表1 流动相梯度洗脱表

权利要求
利用混合对照对中成药进行全面质量控制的方法，其特征在于具体步骤如下(1)获取供试品色谱图a称取供试品；b制备供试品溶液；按照所述供试品中各味原药材所含化学成分的性质选择相适应的提取方法制备供试品溶液；c按照所述供试品中各味原药材所含化学成份的性质选择相适应的色谱条件，测试并记录供试品色谱图；(2)获取混合对照色谱图所述混合对照是指取所述供试品中各味对照药材按处方比例混匀所得的产物；a称取与所述供试品等量的所述混合对照；b制备混合对照溶液制备方法和工艺条件与所述供试品溶液的制备完全相同；c在与上述第(1)步中的同一色谱条件下，测试并记录所述混合对照色谱图；(3)对比供试品色谱图与混合对照色谱图中各色谱峰保留时间是否一致。
2.根据权利要求1所述的利用混合对照对中成药进行全面质量控制的方法，其特征在 于测试色谱图采用的仪器包括高效液相色谱仪、气相色谱仪、超高效液相色谱仪及液相色 谱质谱联用仪、气相色谱质谱联用仪。
全文摘要
本发明涉及一种利用混合对照对中成药进行全面质量控制的方法，具体步骤如下(1)获取供试品色谱图；(2)获取混合对照色谱图；(3)对比供试品色谱图与混合对照色谱图中各色谱峰保留时间是否一致。本发明的有益效果利用混合对照模式可在同一色谱条件下对中成药中各个药味进行鉴别，克服了常规中成药质量标准只对其中几味药进行鉴别的瓶颈问题，不仅可对药品整体质量进行控制，而且大大节约了检验时间与成本。
文档编号G01N30/88GK101936974SQ20101022193
公开日2011年1月5日 申请日期2010年7月9日 优先权日2010年7月9日
发明者冯丽, 刘永利, 李冬梅, 王熳, 袁浩 申请人:河北省药品检验所