专利名称：心脑血管疾病三通道检测卡的制作方法
技术领域：
本实用新型涉及一种检测脑中风等心脑血管疾病的器具，特别是涉及一种 心脑血管疾病三通道检测卡。属于脑中风等心脑血管疾病检测技术领域。
背景技术：
脑中风等心脑血管疾病是目前全世界范围内危害人类生命健康的第一杀 手。临床医学上大多依靠脑电图、影像学检查诊断此类疾病，但其使用受到多 种条件的限制，很大程度上耽误了治疗时间。研究表明，已知多种脑中风的生 化标志物及其分析鉴定方法有助于判断、预测心脑血管疾病病情，大大提高了 疾病诊断率，可明显降低患者死亡率。这些生化标志物是大脑缺血或出血性中 风发生时从大脑释放出的蛋白质或其它分子，包括仅存于大脑中的一些蛋白的
异构体，如神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和s—ioop蛋白等，使用多种
生化标志物的试剂检测将大大提高脑中风的有效诊断率。
通过检测分析人脑脊液或血清中神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和s
一ioop蛋白的水平，可提供一种快速诊断和区分脑中风的方法，有助于鉴别栓
塞性和出血性中风。现有技术对于神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和s 一ioop蛋白的检测主要依赖化学仪器分析、酶免疫检测试剂盒，也有单独检测
神经元特异性烯醇化酶的检测试纸条。但到目前为止，还没有同时检测这三种
物质的检测器具。
发明内容
本实用新型的目的在于提供一种能同时检测神经元特异性烯醇化酶、髓鞘
碱性蛋白和s—ioop蛋白的检测器具，大大提高脑中风的有效诊断率。
本实用新型的技术方案是一种心脑血管疾病三通道检测卡，它在长条扁平薄壳状的检测卡外壳中设置测试条，检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔，测
试条2是由支承背板5上粘贴样品垫8、胶体金膜7、硝酸纤维素膜6、和吸水 膜9组成。支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素膜6，支承背板一端叠置粘贴吸 水膜9，另一端叠置粘贴样品垫8，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤 维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴数段胶体 金膜7。胶体金膜是含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗
s—ioop蛋白抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有三条检测带和
一条质控带，依次是含抗神经元特异性烯醇化酶抗体检测带10，含抗髓鞘碱 性蛋白抗体检测带ll，含抗S—100p蛋白检测带12,质控带13,质控带含抗兔 抗体或抗鼠抗体，测试条置入检测卡外壳l内，样品垫正对加样孔4，硝酸纤维 素膜正对检测窗孔3。
本实用新型的有益效果本发明的三通道检测卡能同时检测出血液和脑脊 液样品中含有的神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和S—100p蛋白，本实用 新型三通道检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。

图1心脑血管疾病三通道检测卡的外壳及测试条在外壳内的安置图。 图2心脑血管疾病三通道检测卡的测试条结构示意图。 图3心脑血管疾病三通道检测卡的硝酸玻璃纤维膜上显示印迹示意图。
具体实施方式
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本实用新型结合具体实施例参见附图进一步说明如下
一种心脑血管疾病三通道检测卡，它是在检测卡外壳1中设置测试条2，检
测卡外壳1的结构及测试条2的设置参见附图1，检测卡外壳1为长条扁平薄壳 状外壳，长7cm,宽2cm，厚0. 5cm，薄壳壁厚0. lcm，由工程塑料制成。检测卡外壳1由壳盖与壳座两半联接构成，在检测卡外壳1壳盖上有检测窗孔3和 加样孔4。测试条2放置在检测卡外壳1的壳座内。
测试条2是多层结构的窄条薄片，片长约6.0cm，片宽约0.4cm,厚度小于 2.5mm。测试条2是多层结构底层是支承背板5，为聚氯乙烯塑料薄片，厚约 0.5mm,长6.0cm,宽0. 4cm;在支承背板5上通过不干胶在其上粘贴样品垫8, 胶体金膜7，硝酸纤维素膜6和吸水膜9。支承背板5中部叠置粘贴硝酸纤维素 膜6，硝酸纤维素膜厚0.5咖，长2-2.5cm,宽0. 4cm。硝酸纤维素膜6上有四 条间隔开的横向显示印迹带，参见附图3，四条显示印迹带中，第一条是检测带 10，含抗神经元特异性烯醇化酶抗体，第二条检测带11,含抗髓鞘碱性蛋白抗 体，第三条是检测带12,含抗S—IOOP蛋白抗体，第四条是质控带13,含抗兔 抗体或抗鼠抗体。调节待检物的抗体浓度大约为lmg/ml，抗兔抗体或抗鼠抗体 浓度大约为lmg/ml时喷膜。支承背板5 —端上叠置粘贴吸水膜9，支承背板5 另一端上叠置粘贴样品垫8，吸水膜9内端与样品垫8内端各自分别与硝酸纤维 素膜6 —端搭接，在样品垫8与硝酸纤维素膜6的搭接部，两者之间夹置粘贴 数段胶体金膜7,胶体金膜7是含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋 白抗体和抗S — 100P蛋白抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜。胶体金膜7厚 0. 5-0. 8咖，长0. 5~0. 6cm,宽0. 4cm。样品垫8厚0. 5-0. 8咖，长2cm,宽0. 4c迈。 吸水膜9厚0. 5-0. 8mm,长1.6-2cm，宽0. 4cm。胶体金膜是将抗体与胶体金颗 粒标记后，调节浓度大约为1D涂布胶体玻璃纤维膜，烘干后备用。胶体金膜7、 样品垫8及吸水膜9与硝酸纤维素膜6搭接长度为0. 1-0. 2cm。吸水膜9材料是 吸水纸，样品垫8材料是吸水玻璃纤维膜。
使用心脑血管疾病三通道检测卡进行检测时，先将待检测 样品液从加样 孔中4滴注入神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和S—100P蛋白三通道检测卡的样品垫8，由于虹吸作用原理，带动待检测的样品液及胶体金膜7所含的抗
神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗s—ioop蛋白抗体胶体金
标记物一起向硝酸纤维素膜6扩散，5-IO分钟内观察结果。
检测卡的主要反应是免疫学的抗原和抗体反应，当样品中有相应的待检神
经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和s—ioop蛋白存在，则样品加入后即与相
应的胶体金结合的抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗S 一100p蛋白抗体反应，在硝酸纤维素膜上迁移的胶体金标记的抗体，在测试带 上分别与含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗s—ioop 蛋白抗体，以及质控带抗兔抗体或抗鼠抗体反应，形成棕红色条带。主要反应 的结果有以下9种情况，分别显示不同的检测结果
1、 如果显示检测带IO、 11、 12和质控带13同时显现棕红色印迹带，表示 检测结果为阳性，说明被检测样品中神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和S
—ioop蛋白含量增高。
2、 如果检测带IO、 11、 12不显示颜色，只有质控带13显现棕红色印迹， 检测结果为阴性，表明被检测样品中神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和S
一ioop蛋白含量正常。
3、 如果检测带IO、 11、质控带13显现棕红色印迹，检测带12不显色，表 明被检测样品中神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白含量增高，而S—100j3 蛋白含量正常。
4、 如果检测带10、 12、质控带13显现棕红色印迹，检测带11不显色，表
明被检测样品中神经元特异性烯醇化酶、s—ioop蛋白含量增高，而髓鞘碱性蛋
白含量正常。
5、 如果检测带ll、 12、质控带13显现棕红色印迹，检测带10不显色，表明被检测样品中髓鞘碱性蛋白、s—ioop蛋白含量增高，而神经元特异性烯醇化
酶含量正常。
6、 如果检测带10显现棕红色印迹，检测带ll、 12和质控带13不显现棕 红色印迹，表明被检测样品中神经元特异性烯醇化酶含量增高，而髓鞘碱性蛋 白和S—100(3蛋白含量正常。
7、 如果检测带11显现棕红色印迹，检测带10、 12和质控带13不显现棕 红色印迹，表明被检测样品中髓鞘碱性蛋白含量增高，而神经元特异性烯醇化 酶和S—100p蛋白含量正常。
8、 如果检测带12显现棕红色印迹，检测带10、 11和质控带13不显现棕 红色印迹，表明被检测样品中S—100J3蛋白含量增高,而神经元特异性烯醇化酶、 髓鞘碱性蛋白含量正常。
9、 如果检测带IO、 11、 12和质控带13均不显色，则表明测试条失效。
权利要求1、一种心脑血管疾病三通道检测卡，它在长条扁平薄壳状的检测卡外壳中设置测试条，检测卡外壳表面有检测窗孔和加样孔，其特征在于测试条(2)是由支承背板(5)上粘贴样品垫(8)、胶体金膜(7)、硝酸纤维素膜(6)、和吸水膜(9)组成支承背板中部叠置粘贴硝酸纤维素膜(6)，支承背板一端叠置粘贴吸水膜(9)，另一端叠置粘贴样品垫(8)，吸水膜内端与样品垫内端各自分别与硝酸纤维素膜搭接，在样品垫与硝酸纤维素膜的搭接部，两者之间夹置粘贴数段胶体金膜(7)；胶体金膜是含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗S-100β蛋白抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有三条检测带和一条质控带，依次是含抗神经元特异性烯醇化酶抗体检测带(10)，含抗髓鞘碱性蛋白抗体检测带(11)，含抗S-100β蛋白检测带(12)，质控带(13)，质控带含抗兔抗体或抗鼠抗体，测试条置入检测卡外壳(1)内，样品垫正对加样孔(4)，硝酸纤维素膜正对检测窗孔(3)。
专利摘要心脑血管疾病三通道检测卡。本实用新型三通道检测卡外壳内有测试条，由支承背板上粘贴样品垫、胶体金膜、硝酸纤维素膜和吸水膜组成。胶体金膜为含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗S-100β蛋白抗体胶体金标记物的玻璃纤维膜，硝酸纤维素膜上有3条检测带，分别含抗神经元特异性烯醇化酶抗体、抗髓鞘碱性蛋白抗体和抗S-100β蛋白抗体，另有1条含抗兔抗体或抗鼠抗体的质控带。本实用新型优点是能同时检测出血液和脑脊液样品中含有的神经元特异性烯醇化酶、髓鞘碱性蛋白和S-100β蛋白。检测卡易于制备且节省检测费用，使用方便快速，结果准确。
文档编号G01N33/558GK201429597SQ200920065048
公开日2010年3月24日 申请日期2009年7月6日 优先权日2009年7月6日
发明者坚 周 申请人:坚 周