专利名称：一种测定血清总蛋白用的固体试剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及的是一种测定血清总蛋白用的固体试剂。
血清总蛋白对人体疾病的诊断及辅助诊断有重要价值。血清总蛋白升高常见于呕吐，腹泻等急性失水性疾病，多发性骨髓瘤及肾上腺机能减退等;血清总蛋白浓度降低可由蛋白质摄入不足，严重消耗性疾病如结核、甲亢、肿瘤等引起，肝功能严重损害，肾病综合症如溃疡性结肠炎等疾病均可表现为总蛋白浓度低下。
目前，被国内外临床和实验室广泛并长期采用的测定血清总蛋白的试剂为双缩脲试剂，其主要成分为硫酸铜、酒石酸钾钠和氢氧化钠，有的还加入碘化钾，按传统配方配制时，必须将硫酸铜、酒石酸钾钠和氢氧化钠分别溶解，然后将酒石酸钾钠与硫酸铜混合，再加入浓度为30%的氢氧化钠溶液，如不循此步骤则可能产生混浊沉淀，甚至使试剂不能使用，配方中的氢氧化钠呈颗粒状，腐蚀性和吸湿性都极强，所以，迄今为止，无论是国内还是国外的试剂厂家都是将试剂制成液体形式提供给用户，但液体试剂体积大、重量大、易渗漏、难以保证试剂质量，且运输费用高，增加包装难度。
本发明的目的在于提供一种测定血清总蛋白用的固体试剂，使之不但使用方便，且其重量和体积都大大小于液体试剂，易于包装，便于贮存和运输，保证了试剂的贮存稳定和配制易溶。
本发明的目的是这样实现的，在进行了大量实验筛选后，选用了主要成分为硫酸铜、酒石酸钾钠、磷酸钠、迭氮钠和非离子表面活性剂的固体试剂，其溶液配比为在每升试剂溶液中，含有
硫酸铜 2～4克/升酒石酸钾钠 4～8克/升磷酸钠 10～20克/升迭氮钠 0.5～1克/升非离子表面活性剂Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)或Tween 20(聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯)或Tween 80(聚乙氧基油酸山梨糖醇) 2～4克/升或Brij 35(聚氧乙烯月桂醚) 1～3克/升其中加入的非离子表面活性剂是为使溶液不致产生混浊，而迭氮钠则是作为防腐剂。
在加工中，我们将上述五种物质分为两组，即组分A硫酸铜和迭氮钠组分B酒石酸钾钠、磷酸钠和非离子表面活性剂在制作成品时，只需将组分A按规定配比混匀，即可分装，为成品;组分B则按重量称取后经电动搅拌充分混匀，此时呈湿润粉末状，将粉末置于真空干燥器中至少24小时，再次搅拌混匀，即可分装，为成品。使用时只需按比例要求取定量组分A和组分B分别以蒸馏水溶解，然后混匀，即可使用。
本发明试剂重量和体积都远远低于液体试剂，原液体试剂1000毫升重量1027克，固体试剂1000毫升用量仅29克，体积30毫升，其重量和体积分别比液体试剂缩小35倍和34倍，便利包装、运输;配方中采用了磷酸钠代替了腐蚀性极强的氢氧化钠，有利于安全操作;原液体试剂往往几个月便出现悬浮的絮状物，影响使用，甚至有的新购试剂(北京化工厂出品)中有明显的絮状物，试验证明固体试剂在固体状态下，至少可保质一年，配制成液体后六个月仍然清亮，贮存时间长。为与液体试剂取得较一致的测试结果，我们以北京化工厂生产的作为商品出售的双缩脲试剂做为对照进行了实验比较，发现将原试剂量的4毫升改为3毫升即可达到检测要求，换言之，可以节省四分之一的试剂量，有利于降低化验成本。利用本发明产品进行检测，操作简单、迅速，具有优良的准确度和精密度。
实施例取组分A 硫酸铜 1克迭氮钠 0.25克组分B 酒石酸钾钠 3克磷酸钠 10克非离子表面活性剂Tween 80(聚乙氧基油酸山梨糖醇) 2克或Brij 35(聚氧乙烯月桂醚) 1克将组分A混匀，待用，将组分B混合后经电动搅拌机搅拌，充分混匀，将混勺后的湿润粉末置于真空干燥器中减压24小时，取出再次搅拌混匀，待用;将组分A和组分B分别用100毫升和200毫升蒸馏水溶解，边搅拌边将组分A缓缓加入组分B中，用力振摇再加水至500毫升混匀，即可装瓶备用。
另将测试管中放入血清50微升，标准管中放入标准液50微升，并在上述测试管、标准管和另取一空试管中各放入试剂3毫升，将各管混匀，37℃水浴20分钟，取出放置室温冷却5分钟，用波长628nm，1cm的比色杯，空白管调零点进行比色。
血清总蛋白浓度(g/dl)＝ (测试管OD)/(标准管OD) ×标准液浓度(g/dl)正常参考值为6～8g/dl本发明的固体试剂质量指标为精密度 批内 (n＝10) SD＝0.090 CV＝1.29%批间 (n＝25) SD＝0.094 CV＝1.31%准确度 回收率 97.6%线性范围 2～10g/dl呈色后稳定时间 60分钟固体状态保质期 1年(室温密闭保存)液体状态保质期 半年(室温密闭保存)
权利要求
1.一种测定血清总蛋白用的固体试剂，其特征在于它是由硫酸铜、酒石酸钾钠、磷酸钠、迭氮钠和非离子表面活性剂组成的固体试剂。
2.根据权利要求1所述的一种测定血清总蛋白用的试剂，其特征在于配成溶液后每升中的成分含量如下硫酸铜 2～4克/升酒石酸钾钠 4～8克/升磷酸钠 10～20克/升迭氮钠 0.5～1克/升非离子表面活性剂Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚)或Tween 20(聚氧乙烯山梨糖醇酐单月桂酸酯)或Tween 80(聚乙氧基油酸山梨糖醇) 2～4克/升或Brij 35(聚氧乙烯月桂醚) 1～3克/升蒸馏水 余量
全文摘要
本发明涉及的是一种测定血清总蛋白用的固体试剂，其主要成分为硫酸铜、酒石酸钾钠、磷酸钠、迭氮钠和非离子表面活性剂。本发明的固体试剂，其重量和体积均大大小于液体双缩脲试剂，操作简单，使用方便，呈色稳定，便于包装、运输和贮存，用于实践有着优良的准确度和精密度。
文档编号G01N33/50GK1057525SQ9110062
公开日1992年1月1日 申请日期1991年2月5日 优先权日1991年2月5日
发明者赵桂兰, 孙友波, 王凤林, 张晖, 林涛 申请人:中国人民解放军302医院