专利名称：一种富集水产品中天然四环素类抗生素的方法
技术领域：
本发明涉及食品安全分析领域，具体是涉及一种以表面修饰有苯酚或苯甲酸功能团的聚苯乙烯磁球富集水产品中天然四环素类抗生素的磁分散固相萃取方法。
背景技术：
四环素类抗生素(Tetracyclines, TCs)是由放线菌产生的一类广谱抗生素，分为天然品(金霉素、土霉素、四环素和强力霉素)与半合成品(多西环素、美它环素、米诺环素和胍哌四环素等)两类。四环素族的化学结构:
权利要求
1.一种富集水产品中天然四环素类抗生素的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)在水产品肌肉组织中加入适量0.1 mol/L ρΗ4.0的乙二胺四乙酸钠/Mcllvaine缓冲液，样品经匀浆后，离心至明显分层，取上清； 抽提上清液调整PH至5.0-6.0，溶液中加入一定量苯酚或者苯甲酸功能团修饰的聚苯乙烯磁球，充分混匀吸附3-5分钟，磁力架分离磁球，弃去上清； (2)1-5%甲醇水溶液洗涤磁球2-3次； (3)加适量内含20%乙腈以及10%的甲醇的0.01 mol/L草酸溶液至吸附有四环素类抗生素的磁球中，分离磁球，收集洗脱液。
2.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于每Ig水产品肌肉组织所需磁球剂量为 2-10 mgο
3.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于每Img吸附有四环素类抗生素的磁球中加入的洗脱液体积为40-80 μ 。
4.根据权利要求1所述的富集方法，其特征在于所述表面修饰了一定密度苯酚或者苯甲酸功能团的聚苯乙烯磁球，磁球粒径为70-300 nm之间。
5.根据权利要求1所述的富集方法在分析检测水产品中天然四环素类抗生素中的应用，其特征在于收集洗脱液，过滤，直接上高效液相色谱或液质联用进行定量定性分析。
6.根据权利要求Γ4任一所述的富集水产品中四环素类抗生素的方法，其特征在于所述苯酚或苯甲酸功能团修饰的磁球按照如下步骤制备: 化学共沉淀法合成超顺磁性Fe3O4纳米单颗粒，再将Fe3O4纳米颗粒表面油酸化，无水乙醇洗涤后氮气吹干；取5 g表面油酸化的Fe3O4纳米颗粒，用体积比15:1的苯乙烯-十六烷混合液5 mL悬浮Fe3O4纳米颗粒,超声5 10 min形成磁流体,将磁流体转入400 mL, 0.0lM含0.2 0.5%的SDS的NaHCO3溶液中，超声波频率为25KHz，超声功率为200-300 W条件下功率继续超声乳化30min，形成细乳液；细乳液中加0.1g K2S2O8于70°C反应1(T20 min后，然后加入0.5 g对乙烯基苯酚或对乙烯基苯甲酸，继续反应12 16 h;磁架吸附磁球，即获得内含超多个顺磁性Fe3O4纳米颗粒的苯酚或苯甲酸功能团修饰的磁球；磁架回收磁球，制备好的苯酚或苯甲酸功能团修饰的磁球依次采用饱和食盐水、3% NaOH以及3% HCl浸泡洗涤各I 3 h，，最后以0.01 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲液洗涤磁球至中性，并将磁球重悬于·0.01 mol/L pH 7.0磷酸盐缓冲液中于4 °C保存备用。
全文摘要
本发明公开了一种富集水产品中天然四环素类抗生素的方法，涉及食品安全分析领域中样品预处理。本发明方法包括样品经0.1mol/L的乙二胺四乙酸钠/Mcllvaine提取缓冲液预处理、苯酚或苯甲酸修饰的聚苯乙烯超顺磁球吸附、洗脱收集等步骤。洗脱液可以直接上液相或液质联用进行分析，与水产品中四环素类抗生素传统样品前处理方法相比，大大简化了样品前处理的操作流程，缩短了样品前处理时间，减少了吸附剂使用量少，提高了样品中四环素类抗生素的提取得率。
文档编号G01N30/08GK103076415SQ20121031588
公开日2013年5月1日 申请日期2012年8月31日 优先权日2011年11月15日
发明者许恒毅, 熊勇华, 梁语嫣, 罗薇, 郭亮, 徐峰, 赖卫华 申请人:南昌大学