专利名称：一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法
技术领域：
本发明涉及液相色谱技术，特别涉及一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法。
背景技术：
反相高效液相色谱是液相色谱中应用范围很广的一种色谱模式。等度洗脱技术是应用于液相色谱领域中比较简单的洗脱方法。然而当样品所含组分的极性相差很大时，如果流动相的洗脱能力比较弱，则保留能力强的组分洗脱时间很长，导致色谱峰展宽严重，峰高降低明显，检测灵敏度下降；如果流动相的洗脱能力比较强，保留能力弱的组分则在接近死体积下就被洗脱出色谱柱，分离效果很差。梯度洗脱解决了以上问题。在梯度洗脱过程中，流动相的强度随洗脱的进行而逐渐的增大。对于保留能力弱的组分，可以在较低的流动相强度下洗脱出来，并且产生很好的分离效果；在梯度洗脱的后期，随着流动相强度的增大，保留能力强的组分在色谱柱中的移动速率增加，加速洗脱，且分离效果不会降低。并且，有些在等度洗脱条件下出现严重拖尾的色谱峰，在梯度洗脱模式下拖尾情况明显减轻。根据调研和文献检索，国内外目前所应用的保留模型主要分两类:一类是比较严密的模型，这些模型试图对保留过程做出精确描述，但由于参数过多，实用性很低；另一类为简单实用型，在等梯度或梯度洗脱模式优化中经常使用，有双参数模型、三参数模型和四参数模型等，这些模型只能对保留过程做出简单的描述。

发明内容
本发明提供了一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，本方法不仅能够高精度的预测出任意梯度条件下的保留时间，而且预测过程简单，详见下文描述:一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，所述方法包括以下步骤:(I)获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程；(2)运用塔板理论对线性多阶梯度洗脱条件近似处理，获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数奶和对应的保留因子匕；(3)通过起始体积分数识和对应的保留因子Ici获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间。所述获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程具体包括:
权利要求
1.种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤: (1)获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程； (2)运用塔板理论对线性多阶梯度洗脱条件近似处理，获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数畀和对应的保留因子h； (3)通过起始体积分数奶和对应的保留因子Ici获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间。
2.据权利要求1所 述的一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，其特征在于，所述获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程具体包括:
3.据权利要求2所述的一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，其特征在于，所述获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数供和对应的保留因子h具体包括: 1)在多阶梯度洗脱条件下，计算多阶梯度洗脱总时间t；t = Σ thi+ti 其中thi为第i阶段梯度洗脱的终止体积分数保持时间，\为第i阶段梯度洗脱的需要时间，
4.据权利要求2所述的一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，其特征在于，所述通过起始体积分数供和对应的保留因子h获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间具体为: 1)利用第i次跳跃对应的保留因子匕，分别计算待测化合物在第1、2、3...η…N块塔板中固定相浓度Cgni和流动相浓度Clni ； 2)通过计算得到待测化合物第1-Ι次、第i次和第i+Ι次跳跃时，第N块塔板上流动相的浓度分别为C1N(i_D、C1Ni和C1N(i+1);当C1Ni>C1N(i_D，且同时C1Ni>C1N(+1)时，停止计算，从而确定跳跃次数i值，计算待测化合物保留时间。
5.据权利要求2所述的一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，其特征在于，化合物保留时间具体为:化合物保留时间与仪器滞留时间之和。
全文摘要
一种预测反相高效液相色谱梯度洗脱模式保留时间的方法，获取描述流动相组成和容量因子关系的保留方程；运用塔板理论对线性多阶梯度洗脱条件近似处理，获取第i阶段梯度洗脱的起始体积分数和对应的保留因子ki；通过起始体积分数和对应的保留因子ki获取待测化合物在流动相中的浓度，根据待测化合物在流动相中的浓度计算出待测化合物保留时间。本方法高精度的预测出任意梯度条件下的保留时间，且预测过程简单；通过三个实施例验证了本方法的可行性，且当保留时间考虑仪器的滞留时间时，进一步提高了保留时间的精度。
文档编号G01N30/86GK103091434SQ201310010200
公开日2013年5月8日 申请日期2013年1月10日 优先权日2013年1月10日
发明者范国樑, 陈硕, 文强, 龚彩荣 申请人:天津大学