专利名称：一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法的制作方法
技术领域：
本发明涉及医药卫生领域，尤其涉及一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法。
背景技术：
冬虫夏草，是麦角菌科真菌冬虫夏草寄生在蝙蝠蛾科昆虫幼虫上的子座及幼虫尸体的复合体，是一种传统的名贵滋补中药材，有调节免疫系统功能、抗肿瘤、抗疲劳等多种功效。主要产于中国青海、西藏、新疆、四川、云南、甘肃、贵州等省及自治区的高寒地带和雪山草原。冬虫夏草主要为中国大陆及海外华人区消费，其消费需求逐年递增，而市场上的假冒伪劣产品也层出不穷。目前，国内的《中国药典》及一些研究文献仅仅涉及冬虫夏草的传统意义上的性状鉴定，即通过外形和气味等经验性感官认识来鉴别冬虫夏草的真伪和品质高低，而国际上 甚至并无对冬虫夏草品质检测鉴别的方法研究。现有的技术方法原始粗糙，偶有对冬虫夏草的成分含量的研究，也并未形成系统的体系，不能在实践中加以应用。

发明内容
本发明的目的是提供一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法，以解决目前冬虫夏草品质检测鉴别领域所面临的问题。本发明的目的通过以下技术方案来实现
一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法，包括以下步骤
1)取完整的待鉴定的冬虫夏草，观察其虫体胸腹之间是否存在消化道残迹，根据消化道残迹的清晰和完整程度，再对待鉴定的冬虫夏草的腹足进行观测，判断其腹足是否明显、突出，消化道残迹的清晰、完整，腹足明显、突出的待鉴定冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
2)将待鉴定的冬虫夏草进行显微粉末鉴定，观测其是否存在虫体表皮碎片被锥形刚毛的特点，存在虫体表皮碎片被锥形刚毛的特点的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
3)采用核磁共振技术对待鉴定冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物进行检测，取得待鉴定冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物的核磁共振氢谱，并与标准冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物的核磁共振氢谱进行比对，核磁共振氢谱比对基本一致的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
4)采用气质联用法对待鉴定冬虫夏草的挥发性成分进行检测，并对气相色谱数据进行聚类分析，含有少量酯类和激素类挥发性成分种类的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
5)采用X射线对待鉴定冬虫夏草进行检测，存在重金属元素聚集现象或存在重金属元素粉末的待鉴定冬虫夏草即为劣质或假冒冬虫夏草，所述重金属元素为铅、钒、铬、钴、镍。本发明的有益效果为采用多种现代化的鉴别方法，以多个指标对冬虫夏草进行分析，避免了传统鉴别方法的仅通过外形和气味等经验性感官认识来鉴别所产生的误差，有效的避免了单一鉴定方法的不足，同时安全可靠，简单易行。
具体实施例方式下面通过具体实施例对本发明进行进一步说明。一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法，包括以下步骤
1)取完整的待鉴定的冬虫夏草，观察其虫体胸腹之间是否存在消化道残迹，根据消化道残迹的清晰和完整程度，再对待鉴定的冬虫夏草的腹足进行观测，判断其腹足是否明显、突出，消化道残迹的清晰、完整，腹足明显、突出的待鉴定冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
2)将待鉴定的冬虫夏草进行显微粉末鉴定，观测其是否存在虫体表皮碎片被锥形刚毛 的特点，存在虫体表皮碎片被锥形刚毛的特点的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
3)采用核磁共振技术对待鉴定冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物进行检测，取得待鉴定冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物的核磁共振氢谱，并与标准冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物的核磁共振氢谱进行比对，核磁共振氢谱比对基本一致的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；
4)采用气质联用法对待鉴定冬虫夏草的挥发性成分进行检测，并对气相色谱数据进行聚类分析，含有少量酯类和激素类挥发性成分种类的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草。采用气质联用法对12个样品的挥发性成分进行分析共检出156个成分，通过数据库检索，鉴定了其中的92个，对气相色谱数据进行聚类分析，发现冬虫夏草和凉山虫草所含的酯类和激素类挥发性成分种类偏少，而亚香棒虫草、蛹虫草等含该类成分种类较多；
5)采用X射线对待鉴定冬虫夏草进行检测，存在重金属元素聚集现象或存在重金属元素粉末的待鉴定冬虫夏草即为劣质或假冒冬虫夏草，所述重金属元素为铅、钒、铬、钴、镍。采用X射线分析冬虫夏草及其混伪品，在高档正品虫草中发现了明显的金属掺假，元素分析表明系采用金属铅粉末掺假。采用ICP-MS分别对该样品虫体、草体部分的营养元素、重金属元素等32种元素分析，其中钒、铬、钴、镍等26种元素在虫草相关研究中未见报道。本发明针对假冒伪劣情况较为突出的贵重药材冬虫夏草进行鉴定研究，选题具有很好的实用价值。符合国家中药材产业发展方向，具有显著的社会和经济效益。目前国内冬虫夏草产量约为120吨，市场规模300-500亿元，每年查获的假冒伪劣案件达千件，若仅以5%计算，涉及金额即达15-25亿元，因此本发明具有较大的应用价值。本发明已经应用于南京众合生物科技有限责任公司所采集和收购的冬虫夏草进行鉴定，对每批次的冬虫夏草进行抽检，准确率和企业满意率均达到100%。虽然以上仅描述了本发明的具体实施方式
范例，但是本领域的技术人员应当理解，这些仅是举例说明，本发明的保护范围是由所附权利要求书限定的。本领域的技术人员在不背离本发明的原理和实质的前提下，可以对这些实施方式做出多种变更或修改，但这些变更或修改均落入本发明的保护范围。
权利要求
1.一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法，其特征在于，包括以下步骤 1)取完整的待鉴定的冬虫夏草，观察其虫体胸腹之间是否存在消化道残迹，根据消化道残迹的清晰和完整程度，再对待鉴定的冬虫夏草的腹足进行观测，判断其腹足是否明显、突出，消化道残迹的清晰、完整，腹足明显、突出的待鉴定冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草； 2)将待鉴定的冬虫夏草进行显微粉末鉴定，观测其是否存在虫体表皮碎片被锥形刚毛的特点，存在虫体表皮碎片被锥形刚毛的特点的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一歩检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草； 3)采用核磁共振技术对待鉴定冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%こ醇提取物进行检测，取得待鉴定冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%こ醇提取物的核磁共振氢谱，并与标准冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%こ醇提取物的核磁共振氢谱进行比对，核磁共振氢谱比对基本一致的待鉴定的冬虫夏草即可进入下一步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草； 4)采用气质联用法对待鉴定冬虫夏草的挥发性成分进行检測，并对气相色谱数据进行聚类分析，含有少量酯类和激素类挥发性成分种类的待鉴定的冬虫夏草即可进入下ー步检测，其他则为劣质或假冒冬虫夏草；以及 5)采用X射线对待鉴定冬虫夏草进行检测，存在重金属元素聚集现象或存在重金属元素粉末的待鉴定冬虫夏草即为劣质或假冒冬虫夏草。
2.根据权利要求I所述的ー种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法，其特征在于步骤5)中，所述重金属元素为铅、银、铬、钴、镍。
全文摘要
本发明涉及一种冬虫夏草品质检测的五联鉴别法，包括整株观察、显微粉末鉴定、冬虫夏草的三氯甲烷提取物和80%乙醇提取物的核磁共振氢谱比对、气质联用法对待鉴定冬虫夏草的挥发性成分的检测和通过X射线对重金属元素的检测几大步骤。本发明的有益效果为采用多种现代化的鉴别方法，以多个指标对冬虫夏草进行分析，避免了传统鉴别方法的仅通过外形和气味等经验性感官认识来鉴别所产生的误差，有效的避免了单一鉴定方法的不足，同时安全可靠，简单易行。
文档编号G01N27/62GK102735685SQ201210198148
公开日2012年10月17日 申请日期2012年6月15日 优先权日2012年6月15日
发明者徐增莱, 陈云超 申请人:南京众合生物科技有限责任公司