专利名称:一种量子产率的测试方法
技术领域:
本发明涉及分析检测领域,尤其涉及一种量子产率的测试方法。
背景技术:
荧光材料的量子产率是其最基本和重要的性质参数。理论上量子产率定义为发射总光子数与吸收总光子数之比。目前,测定量子产率的直接方法有积分球法、热透镜法、光声光谱法等,这些方法需要直接测定光子数的专业仪器,一般的实验室很难进行。测定量子产率的间接方法有传统光谱参比法,这类方法简单快速,花费低,但是由于光谱测量需要高浓度样品溶液,其碰撞淬灭、重吸收、及内滤光效应降低了测量的准确性。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于,提供一种量子产率的测试方法,可以精确的测
试量子产率。为了解决上述技术问题,本发明的实施例提供了一种量子产率的测试方法,用于测试待测样品的量子产率Q,包括:提供一量子产率为Qr的参比样品;提供折射率为的第一溶剂和折射率为η的第二溶剂,将所述参比样品溶于所述第一溶剂,制备得到参 比样品溶液/胶体,将所述待测样品溶于所述第二溶剂,制备得到待测样品溶液/胶体;测试所述参比样品溶液/胶体和所述待测样品溶液/胶体的吸收光谱,获得所述参比样品溶液/胶体的吸光度K,和所述待测样品溶液/胶体的吸光度A ;分别稀释所述参比样品溶液/胶体和所述待测样品溶液/胶体,制备得到稀释因子为I;的参比样品稀释液,和稀释因子为T的待测样品稀释液;测试所述参比样品稀释液和所述待测样品稀释液的荧光图像,获得所述参比样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数凡和单个分子或粒子的荧光强度Ip和所述待测样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数N和单个分子或粒子的荧光强度I ;根据获得的上述参数,计算单分子水平下量子产率Q如下:
权利要求
1.一种量子产率的测试方法,用于测试待测样品的量子产率Q,其特征在于,包括: 提供一量子产率为Qr的参比样品; 提供折射率为^的第一溶剂和折射率为η的第二溶剂,将所述参比样品溶于所述第一溶剂,制备得到参比样品溶液/胶体,将所述待测样品溶于所述第二溶剂,制备得到待测样品溶液/胶体; 测试所述参比样品溶液/胶体和所述待测样品溶液/胶体的吸收光谱,获得所述参比样品溶液/胶体的吸光度K,和所述待测样品溶液/胶体的吸光度A ; 分别稀释所述参比样品溶液/胶体和所述待测样品溶液/胶体,制备得到稀释因子为Tr的参比样品稀释液,和稀释因子为T的待测样品稀释液; 测试所述参比样品稀释液和所述待测样品稀释液的荧光图像,获得所述参比样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数Nr和单个分子或粒子的荧光强度Ir,和所述待测样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数N和单个分子或粒子的荧光强度I ; 根据获得的上述参数,计算单分子水平下量子产率Q如下:
2.如权利要求1所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述提供一量子产率为Qr的参比样品包括: 将所述待测样品溶于所述第二溶剂中,制备得到所述待测样品溶液/胶体,并测量所述待测样品溶液/胶体的吸收光谱和发射光谱,以查表择取所述参比样品,所述参比样品溶液/胶体的最大吸收峰所覆盖的范围与所述待测样品溶液/胶体的最大吸收峰所覆盖的范围一致,或所述参比样品溶液/胶体的最大发射峰所覆盖的范围与所述待测样品溶液/胶体的最大发射峰所覆盖的范围一致,所述参比样品溶液/胶体的量子产率为Qp
3.如权利要求1所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述第一溶剂为水、乙醇、环己烷、氯仿或甲苯中的一种,所述第二溶剂为水、乙醇、环己烷、氯仿或甲苯中的一种。
4.如权利要求1所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述吸收光谱包括紫外可见吸收光谱和红外吸收光谱,所述参比样品溶液/胶体的吸光度K和所述待测样品溶液/胶体的吸光度A均小于0.1。
5.如权利要求1所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述测试所述参比样品稀释液和所述待测样品稀释液的荧光图像,获得所述参比样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数凡和单个分子或粒子的荧光强度Iy和所述待测样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数N和单个分子或粒子的荧光强度I包括: 滴加所述参比样品稀释液于第一玻片上,滴加所述待测样品稀释液于第二玻片上,所述参比样品稀释液和所述待测样品稀释液的体积相等; 采用单分子荧光检测设备分别测试所述参比样品稀释液和所述待测样品稀释液的荧光图像,所述单分子荧光检测设备的激发光波长、激光功率、曝光时间和发射滤光片范围均相等; 选取测量范围相同的所述参比样品稀释液和所述待测样品稀释液的所述荧光图像各10-20 张; 采用模拟软件分别对每张所述图像中的分子或粒子个数进行计数,并计算平均值,以得到所述参比样品稀释液的分子或粒子数队和所述待测样品稀释液的分子或粒子数N ; 采用所述模拟软件分别对每张所述图像中的分子或粒子的荧光强度进行测量,并计算平均值,以获得所述参比样品稀释液的单个分子或粒子的荧光强度^和所述待测样品稀释液的单个分子或粒子的荧光强度I。
6.如权利要求5所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述单分子荧光检测设备包括全内反射突光显微镜和激光共聚焦突光显微镜。
7.如权利要求5所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述模拟软件包括Matlab、IDL 或 Image J 软件。
8.如权利要求1所述的量子产率的测试方法,其特征在于,所述参比样品包括染料罗丹明101,所述待测样品包括 高氯酸恶嗪、605量子点、罗丹明6G或655量子点。
全文摘要
公开了一种量子产率的测试方法,用于测试待测样品的量子产率Q,包括提供量子产率为Qr的参比样品;提供折射率为nr的第一溶剂和折射率为n的第二溶剂,获得参比样品溶液/胶体和待测样品溶液/胶体;获得参比样品溶液/胶体的吸光度Ar,和待测样品溶液/胶体的吸光度A;制备稀释因子为Tr的参比样品稀释液,和稀释因子为T的待测样品稀释液;获得参比样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数Nr和单个分子或粒子的荧光强度Ir,和待测样品稀释液的荧光图像的分子或粒子个数N和单个分子或粒子的荧光强度I;计算单分子水平下的量子产率该测试方法简单,测量准确性较高,为量子产率计算提供了理论方法。
文档编号G01N21/64GK103226100SQ20131012063
公开日2013年7月31日 申请日期2013年4月9日 优先权日2013年4月9日
发明者张春阳, 胡娟 申请人:深圳先进技术研究院