专利名称：一种新型的血型和配血试验检测方法
技术领域：
本发明旨在研制一项简捷快速、敏感性高、重复性好、结果判读清晰客观、易于标准化和自动化的一种用于ABO血型分类、反向ABO血型分类、1 显型分析、直接库姆斯氏及交叉配血等一种凝胶柱过滤免疫实验方法，该发明属医学实验领域。
背景技术：
输血是抢救和治疗患者的一种紧急的必要手段之一。目前血型及配血等鉴定主要是应用红细胞抗原抗体凝结反应原理。过去手工法血型配血鉴定常用的是玻片和试管凝结法，目前已发展为用半自动或全自动仪器完成的实验方法，此法可避免人为操作可能造成的差错并提高工作效率。全自动血型配血检测仪器的工作方法主要有两种一种是凝胶柱法，另一种是微孔板法。凝胶柱法原理为凝胶分离的空隙只能让未凝集的红细胞通过。凝集的红细胞则被阻隔于分离凝胶柱外。当凝胶中含有特异性A、B、Rh血型的抗血清或其他抗人同种球蛋白抗体时，加入测试者红细胞，经离心后，如发生抗原抗体反应则红细胞发生凝集被阻隔于分离凝胶柱外，如无抗原抗体反应，则单个的红细胞经过凝胶空隙被离心沉至管底。其结果肉眼观察明显，判断也准确。另一种是微孔板法，是根据红细胞凝结和不凝结的图像不同，由自动化仪器根据透光率或图象不同而分析结果，这种方法有时会因二者区别不明显而判断困难。因此凝胶柱法在半自动或全自动血型和配血仪器中使用较为普遍。现各种全自动血型和配血仪器均为专用设备，设计结构复杂，价格昂贵，应用成本较高， 不能普及。如能有一种通用性强，并能高通量用仪器判读，快速准确的血型鉴定和配血试验方法，无疑将大大减轻劳动强度，提高实验的准确性。本发明可对半自动和全自动化血型配血系统提供一种低成本，并能实现高通量，结果快而准独特的凝胶柱结果判读实验方法。

发明内容
设计一排8孔，上部与96孔U型规格化酶标板孔径一致，底部延长为12毫米，内径缩小为3毫米左右的柱状板条，此板条可整排拆装于96孔U型规格化的板架中。用脂溶性或非水溶性的蓝色、红色染料分别将凝胶颗粒染成蓝色或红色的凝胶体，也可由生产凝胶厂定制成蓝色和红色凝胶颗粒。柱管底部加蓝色凝胶颗粒，上中部加红色凝胶颗粒，形成底部蓝色，上部红色的凝胶柱状体。该双色凝胶柱状体内有A、B血型或其他抗体成分，当加入红细胞悬液，经离心后，红细胞凝结则在凝胶上面形成红色圆点，若不发生凝结则在凝胶底部形成聚集的蓝色圆点。其原因是由于柱管底部有蓝色凝胶将红细胞盖住，红细胞被蓝色凝胶遮盖成非红色的蓝色圆点，而凝胶上面是红色凝胶，加之红细胞本色即为红色，因此红细胞成红色圆点。判断结果由上而下观察，形成边缘整齐蓝色圆点的为红细胞不凝结，判为阴性结果。形成边缘不太整齐红色、暗淡红色圆点的表示红细胞发生凝结，凝结的红细胞在红色凝胶的表面、中部或中下部，此现象用肉眼观察或通过透光率或图象分析很容易区别。


图1是与现有96孔酶标仪板规格一样为一排8孔，并且孔底部延长为12毫米，内径缩小为3毫米左右的柱状板条。将管内底部装入含有蓝色的过滤胶体或其他过滤颗粒，上部装入红色的过滤凝胶体或其他过滤颗粒，形成上部五分之三为红色，底部五分之二为蓝色的双色过滤柱。
图2是板架可插入12排上述双色过滤柱，成与现有96孔酶标仪板规格一样的过滤柱比色板，并可根据检测项目多少自由拆卸组装。
具体实施例方式定制一排8孔可整排拆装的与现有96孔酶标仪板规格一样，并且孔底部延长为12 毫米，内径缩小为3毫米左右的柱状板条。将圆柱状管内底部装入30微升左右含有脂溶性蓝色染料半固态状的凝胶体(凝胶体的凝胶颗粒及浓度，缓冲盐水对和防腐剂配制等均能达到血型配血的抗原抗体反应要求，经一定离心力离心后，能达到凝结红细胞不能通过凝胶而停留在其表层，不凝结红细胞能通过凝胶到达其底部等系列实验要求)，上部装入含有脂溶性红色染料的半固态状凝胶体，形成上部五分之三为红色，底部五分之二为蓝色的双色凝胶柱。柱管内加有A、B血型抗血清或其他抗体以及受试者血桨，实验时加入一定浓度受试者、供血者红细胞或标准A、B型红细胞的生理盐水混悬液，离心后，若红细胞凝结则在凝胶上面形成红色圆点，若不发生凝结则在凝胶底部形成蓝色圆点，仪器自上而下扫描，根据在某波长的透光率或拍摄图像，根椐颜色及图像来分析判读结果；有红色、暗红的圆点的为阳性，有蓝色圆点的为阴性。具体实例1血型鉴定1. 1 方法将30份待检受血者和30份供血者抗凝血离心，吸取各管抗凝血下层红细胞，用生理盐水制成3%红细胞悬液。将双色凝胶柱管内加有A、B血型标准抗血清，每管柱内加入50微升上述受血者和供血者的3%红细胞悬液，1500r/min离心2min，由上而下肉眼观察或仪器自上而下扫描或拍摄图像，根椐管内红细胞圆点的颜色及图像来分析判读结果。若红细胞凝结则在凝胶上面形成红色圆点，若不发生凝结则在凝胶底部形成蓝色圆点，有红色、暗红色圆点者为阳性，有蓝色圆点者为阴性。如一份测试血加A血型标准抗血清的管柱内凝胶底部形成蓝色圆点，加B血型标准抗血清的管柱内凝胶上面形成红色圆点则为A型血；如加A血型标准抗血清的管柱内凝胶上面形成红色圆点，加B血型标准抗血清的管柱内凝胶内底部形成蓝色圆点为B型血；若二者凝胶上面均形成红色圆点者为AB型血，如二者凝胶内底部均形成蓝色圆点者为0型血。1.2 结果:将30份待检受血者和30份供血者抗凝血用双色凝胶柱管法鉴定的血型结果与常规试管凝结法鉴定的血型结果作比较，二者鉴定结果符合率达成协议100 %。
权利要求
1.一种新型的血型和配血试验检测方法，是一种新的血型及配血等鉴定用的凝胶柱过滤免疫实验方法。将过滤用的凝胶柱制成上层红色和底层蓝色的双色凝胶柱。血型鉴定时， 凝集的红细胞被阻隔在上面由红色凝胶层衬托成红色圆点，不凝集的红细胞通过凝胶在底层被蓝色凝胶遮盖成非红色的蓝色圆点，判定实验结果可由上而下观察。
2.按照权利要求1所述，新型的血型和配血试验是在微柱管中进行，微管8个一联排， 并可放入现有规格化的比色板架中，可与平板离心机、半自动和全自动化酶标仪器(增加一些软件功能和设备)及全自动血型配血系统配套使用。实验结果可由上而下或由下而上观察，根据透光率或拍摄的颜色和图象不同而分析其结果。
3.按照权利要求1所述，该凝胶柱为上下双色层凝胶柱，双层颜色可为不同颜色；凝胶颗粒可用染料或色素染色成为有色凝胶，也可事先由生产厂商定制成各种有色的凝胶颗粒。
全文摘要
一种新型的血型和配血试验检测方法，是一种新的血型及配血等鉴定用的凝胶柱过滤免疫实验方法，属医学实验领域。凝胶柱的管底部加蓝色凝胶颗粒，上中部加红色凝胶颗粒，形成底部蓝色，上部红色的凝胶柱状体。该双色凝胶柱状体内有A、B血型或其他抗体成分，当加入红细胞悬液，经离心后，红细胞凝结则在凝胶上面形成红色圆点，若不凝结则在凝胶底部形成聚集的蓝色圆点。实验结果可由上而下或由下而上观察，并可根据透光率或拍摄的颜色和图象不同而分析其结果。本发明可对半自动和全自动化血型配血系统提供一种低成本，并能实现高通量，结果快而准的凝胶柱结果判读实验方法。
文档编号G01N33/80GK102466731SQ201010550150
公开日2012年5月23日 申请日期2010年11月19日 优先权日2010年11月19日
发明者张文丽, 曹宁, 李晓兰, 王礼文 申请人:南京神州英诺华医疗科技有限公司