专利名称：测定海参中多糖含量的方法
技术领域：
本发明涉及一种测定海参中多糖含量的方法。
背景技术：
海参(Holothutia)为棘皮动物门(Echinodermata)海参纲(Holothurioidea)。全世界约有900种，我国约有140种；全世界约有40种可供食用，我国约20种。在我国海参一向被视为佐膳佳品，明代以后，海参收入本草，列为补益药。海参成为养生食品源远流长，其味道鲜美、营养丰富是众所周知的。近年来海参多糖的功效引起国内外人们的密切关注，药理研究也证明了它有多种药效，如抗凝降血脂、抑制血小板聚集、防止老年痴呆、抗肿瘤活性、防治急性放射性损伤等，并可明显促进造血功能的恢复和增强，是一种作用较强的免疫促进剂。其功效的主要成分为酸性粘多糖，因此如何定量判断海参中多糖的含量是人们所关注的。但测定海参中多糖含量的方法还未见过报道。

发明内容
本发明的目的是提供一种测定海参中多糖含量的方法，它能弥补现有技术的上述不足。
一种测定海参中多糖含量的方法，其特征是称取粉碎的海参样品，加入样品量35-45倍重量的3％-5％碱的水溶液，40-50℃下在超声波清洗仪中反应1.5-2.5小时；用酸调pH值至中性；以8000-12000rpm离心15-25min，取上清液；在搅拌下加入乙醇，使乙醇浓度达到55-65％，静置过夜；以4000-4500rpm离心20-30min，弃去上清夜；用水溶解所得沉淀物，在搅拌下加入乙醇，使乙醇浓度达到80-90％，静置过夜；以恒重的垂融坩埚抽滤，依次用无水乙醇、丙酮，各洗涤脱水三遍；干燥至恒重，冷却到室温；称重。
本发明采用二次乙醇沉淀对样品进行纯化；以超声波清洗仪为反应器；选择垂融坩埚为重量分析容器，操作简单，稳定可靠，重现性好，准确度高，为不同品种海参多糖的测定提供了可靠方法。
具体实施例方式
称取1克粉碎的梅花参(Thelenota ananas)样品，准确至0.0001克；放入100ml的烧杯内，加入3％(重量百分浓度，下同)KOH的水溶液40克，45℃下在超声波清洗仪中反应2h；用冰醋酸调pH值在6.8-7.2范围内；10000rpm，4℃离心25min，取上清液，到入250ml离心杯中；在搅拌下缓缓加入95％的乙醇，使其中的乙醇浓度达到60％，静置过夜；以4500rpm离心30min，弃去上清夜；沉淀物多糖用10g蒸馏水溶解，在搅拌下缓缓加入95％的乙醇85g，静置过夜；以恒重G4垂融坩埚抽滤，依次用无水乙醇、丙酮，各洗涤脱水三次；50℃下干燥至恒重，置干燥器内冷却到室温；称重为0.2031克。
本实施例中的KOH可以改用LiOH或NaOH，其效果类似。
本发明的方法操作简单，除去了残余的盐及色素，准确度高。用超声波清洗仪进行反应，减少了样品的损失。垂融坩埚是重量分析的容器，选择G4垂融坩埚经实验证明样品中的糖不被损失，表明本发明的方法操作简单，准确，可行。
权利要求
1.一种测定海参中多糖含量的方法，其特征是称取粉碎的海参样品，加入样品量35-45倍重量的3％-5％碱的水溶液，40-50℃下在超声波清洗仪中反应1.5-2.5小时；用酸调pH值至中性；以8000-12000rpm离心15-25min，取上清液；在搅拌下加入乙醇，使乙醇浓度达到55-65％，静置过夜；以4000-4500rpm离心20-30min，弃去上清夜；用水溶解所得沉淀物，在搅拌下加入乙醇，使乙醇浓度达到80-90％，静置过夜；以恒重的垂融坩埚抽滤，依次用无水乙醇、丙酮，各洗涤脱水三遍；干燥至恒重，冷却到室温；称重。
全文摘要
一种测定海参中多糖含量的方法，其特征是称取粉碎的海参样品，加入样品量35－45倍重量的3％－5％碱的水溶液，40－50℃下在超声波清洗仪中反应1.5－2.5小时；用酸调pH值至中性；以8000－12000rpm离心15－25min，取上清液；在搅拌下加入乙醇，使乙醇浓度达到55－65％，静置过夜；以4000－4500rpm离心20－30min，弃去上清液；用水溶解所得沉淀物，在搅拌下加入乙醇，使乙醇浓度达到80－90％，静置过夜；以恒重的垂融坩埚抽滤，依次用无水乙醇、丙酮，各洗涤脱水三遍；干燥至恒重，冷却到室温；称重。本发明采用二次乙醇沉淀对样品进行纯化；以超声波清洗仪为反应器；选择垂融坩埚为重量分析容器，操作简单，稳定可靠，重现性好，准确度高，为不同品种海参多糖的测定提供了可靠方法。
文档编号G01N1/34GK1624450SQ200410036250
公开日2005年6月8日 申请日期2004年11月9日 优先权日2004年11月9日
发明者王远红, 吕志华, 郭少媛 申请人:中国海洋大学