一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法
【专利摘要】本发明涉及一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，该方法包括以下步骤：(1)原药吡虫啉溶解到丙酮中稀释成5个浓度；(2)稀释药液注入指型管底，倾斜放平转动指形管；(3)将苹果绣线菊蚜用毛笔轻挑转至指型管，检查结果，获得LC60，LC70和LC80等；(4)以LC60，LC70和LC80浓度的吡虫啉均匀展布在指型管中，将苹果绣线菊蚜用毛笔轻挑转至指型管，检查结果，初步确定诊断剂量及符合度；(5)利用诊断剂量测定田间苹果绣线菊蚜的抗药性。本发明使用玻璃指型管，提高了抗性监测结果的准确性，降低药剂的使用量节约成本。本发明测定试剂盒，适合于果园中直接测定苹果绣线菊蚜对吡虫啉的抗药性，操作简单，方便，能快速测定结果。
【专利说明】一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，属于农药学【技术领域】。
【背景技术】
[0002]苹果绣线菊姆(Aphiscitricola Vander Goot)属于同翅目(Homoptera)虫牙科(Aphididae aphids),主要寄主有苹果、梨、山植、绣线菊等植物，是我国北方果园中为害果树的主要害虫之一。杨军玉等(2013)称苹果绣线菊蚜各省均有发生，发生严重的省份是河北、河南、山西和山东，甘肃、辽宁、云南和陕西发生较轻；杀虫剂使用概率从高到低分别为吡虫啉、阿维菌素和高效氯氰菊酯。由于多年的化学防治为主，致使其产生一定的抗药性。为了延缓苹果绣线菊蚜抗药性的发展，及时制定抗性治理措施，抗药性监测成为准确获知苹果绣线菊蚜在某地抗性水平的有效手段。在国内外关于苹果绣线菊蚜抗药性是1977年Brader最初报道的，姚洪渭(2002)对世界上报道的同翅目抗性害虫种类作了粗略估计，其中苹果黄蚜在韩国己对有机磷和氨基甲酸醋类杀虫剂产生了抗性。王金信等(1998)等采用点滴法测定了河北沧州、河南商丘、山东蒙阴、辽宁朝阳、山东泰安、河北昌黎、安徽砀山、山东荣城等地苹果绣线菊蚜对氰戊菊酯和氧化乐果的抗药性。徐琴等(2002)采用点滴法测定了山西省晋中、忻州和运城三地苹果黄蚜对7种菊酯类杀虫剂的抗药性测定。彭波等(2010)采用点滴法对山东省潍坊市、烟台市、泰安市、荣成市、文登市、龙口市、莱西市、平度市、费县、蒙阴县、栖霞市和沂源县等地对顺式氯氰菊酯、吡虫啉、氧化乐果和啶虫脒进行了抗药性测定。封云涛(2012年)采用浸溃法对山西运城地区苹果绣线菊蚜对啶虫脒、吡虫啉、联苯菊酯、高效氯氰菊酯、氰戊菊酯、辛硫磷和马拉硫磷进行了抗药性测定。
[0003]上述苹果绣线菊蚜的抗药性测定工作确实为其田间防治及抗性治理提供了极大的帮助，但是测定方法多采用点滴法和浸溃法，存在操作不易掌握和繁琐以及方法不规范的问题。

【发明内容】

[0004]本发明的目的在于针对现有监测方法中存在的不足，在已有研究方法的基础供一种简便、快速、准确的抗性监测方法，以满足当前果园抗药性监测的需要。
[0005]为了实现上述目的，本发明的技术方案如下。
[0006]一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，该方法包括以下步骤:
[0007](I)原药吡虫啉溶解到丙酮中稀释成5个浓度；
[0008](2)稀释药液注入指型管底，小心倾斜放平转动指形管直至无液滴，室温放置2h ；
[0009](3)将苹果绣线菊蚜用毛笔轻挑转至指型管，一定时间后检查结果，获得LC6tl, LC70和LC8tl等，初步获得备选诊断剂量；
[0010](4)以LC6tl, LC70和LC8tl浓度的吡虫啉均匀展布在指型管中，将苹果绣线菊蚜用毛笔轻挑转至指型管，一定时间后检查结果，初步确定诊断剂量及符合度；[0011](5)利用诊断剂量测定田间苹果绣线菊蚜的抗药性。
[0012]进一步地,所述步骤(2)中稀释药液注入指型管中(长度*内径=75mm*16mm),体积数为220uL，轻放平，此时药液正好流至管口而不外溢，室温滚动，直至丙酮全部挥发。并且在室温放置2h后方能进行苹果绣线菊蚜的抗药性测定。
[0013]进一步地，所述步骤(3)中苹果绣线菊蚜从足轻挑，放置于指型管中，不能伤及口针。室温放置2h后观察苹果绣线菊蚜死亡情况，苹果绣线菊蚜不能自由爬行即为死亡，自由爬行即为存活。
[0014]该发明的有益效果在于:
[0015](I)本发明使用玻璃指型管(长度*内径=75mm*16mm),利于药剂的均匀附着,提高了抗性监测结果的准确性；同时降低药剂的使用量节约成本。
[0016](2)本发明苹果绣线菊蚜抗药性测定试剂盒，适合于果园中直接测定苹果绣线菊蚜对吡虫啉的抗药性，操作简单，方便，快速测定结果。
【具体实施方式】
[0017]下面结合实施例对本发明的【具体实施方式】进行描述，以便更好的理解本发明。
[0018]实施例
[0019]一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，具体包括以下方面:
[0020](I)试剂盒诊断剂量的初步确定:
[0021]称取计算质量为0.1042g的96%的吡虫啉原药，用IOOmL丙酮溶解，配成IOOmg/L的吡虫啉母液，后用丙酮稀释成25.6，12.8，6.4，1.6，0.4和0.lmg/L,丙酮为对照，每个处理3次重复。然后用微量移液器吸取220uL药液注入指型管底(75mm*16mm)，小心倾斜放平指形管，药液随着丙酮的挥发而固着在玻璃管整个内壁上，待丙酮全部挥发后，玻璃管药膜放置室温2h。轻挑苹果绣线菊蚜(青岛农业大学试验田)放入管中，每管内15~20头，用纱布盖住管口。处理后试虫放置在温度25°C、光周期L: D = 14h: IOh的培养箱内饲养，2h后检查试虫死亡数和存活数，根据毒力方程计算LC5tl、选取连续三次LC5tl最为接近、测定结果稳定的结果进行数据合并，然后计算LC6(1、LC70和LC8tlt5
[0022]此次试验由于快速检测仅2h后即查结果，故检查时所用具体的死亡判定标准非常重要，经过多次试验最终确定标准为:苹果绣线菊蚜不能爬行即为死亡，自由爬行即为存活。
[0023]结果如下:
[0024]对青岛农业大学标本园苹果绣线菊蚜种群采用指形管药膜法进行生物测定，选取连续三次LC5tl最为接近、测定结果稳定的结果进行数据合并(见表1)，采用Probit软件进行数据处理，分别计算LC6(1、LC70, LC80所对应的浓度，并作为备选诊断剂量。
[0025]表1:
[0026]
【权利要求】
1.一种苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，其特征在于:该方法包括以下步骤: (1)原药吡虫啉溶解到丙酮中稀释成5个浓度； (2)稀释药液注入指型管底，倾斜放平转动指形管直至无液滴，室温放置2h； (3)将苹果绣线菊蚜用毛笔轻挑转至指型管，检查结果，获得LC6tl,LC7tl和LC8tl等，初步获得备选诊断剂量； (4)以LC6tl,LC7tl和LC8tl浓度的吡虫啉均匀展布在指型管中，将苹果绣线菊蚜用毛笔轻挑转至指型管，检查结果，初步确定诊断剂量及符合度； (5)利用诊断剂量测定田间苹果绣线菊蚜的抗药性。
2.根据权利要求1所述的苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，其特征在于:所述步骤⑵中稀释药液注入指型管中(长度*内径=75mm*16mm)，体积数为220uL，轻放平，此时药液正好流至管口而不外溢，室温滚动，直至丙酮全部挥发，并且在室温放置2h后进行苹果绣线菊蚜的抗药性测定。
3.根据权利要求1所述的苹果绣线菊蚜对吡虫啉抗药性的监测方法，其特征在于:所述步骤(3)中苹果绣线菊蚜从足轻挑，放置于指型管中，不能伤及口针；室温放置2h后观察苹果绣线菊蚜死亡情况，苹果绣线菊蚜不能自由爬行即为死亡，自由爬行即为存活。
【文档编号】G01N33/48GK103776992SQ201410043998
【公开日】2014年5月7日 申请日期:2014年1月26日 优先权日:2014年1月26日
【发明者】王俊平, 郑长英 申请人:青岛农业大学