专利名称：血液中多巴胺的电化学快速检测方法
技术领域：
本发明涉及到临床医学检测技术领域，特别是血液中多巴胺的检测方法。
技术背景
多巴胺是存在于生命体内的小分子物质。它的检测具有重要的医学参考价值。
多巴胺(DA)是哺乳动物体内一种非常重要的神经递质，用来帮助细胞传送脉冲化学物质。它广泛分布于中枢神经系统，中脑和人体体液中。主要负责大脑的感情、感觉， 传递兴奋及开心的信息，与上瘾也有关。由于吸烟和吸毒都可以增加多巴胺的分泌，从而使上瘾者感到开心及兴奋。而多巴胺不足则会令人失去控制肌肉的能力，严重会令人的手脚不自主地震动导致帕金森氏症或者失去控制个人情绪的能力而导致精神分裂症、双相情感障碍、和阿尔兹海默症等多种精神类疾病。此外，多巴胺是去甲基肾上腺素的前体物质， 是下丘脑和脑垂体腺中的一种关键神经递质，中枢神经系统中多巴胺的浓度受精神因素的影响；多巴胺作为中脑的神经原物质，则直接影响人们的情绪。所以人之所以有思想，有感觉，对一些事物有热烈追求，这都来自我们大脑内多巴胺的化学作用，所以多巴胺的不足还会令人失去控制个人情绪的能力，这是由于多巴胺在人体中特定区域内浓度分布的多寡会直接影响到垂体内分泌作用的协调，并直接作用于神经系统的一系列活动，从而达到调节情绪的能力。
另外，多巴胺还具有兴奋心脏、增加肾血流量的作用，可用于治疗心肌梗塞、肾功能衰竭、充血性心力衰竭等引起的休克综合征。因此，对其测定方法的研究无论是在神经生理学研究还是在疾病诊断及相关药物的质量控制和临床应用方面都有重要意义。目前，测定多巴胺的方法有色谱法和荧光光度法。用于修饰电极测定DA也有报道、电聚合膜法、自组装膜法。因为多巴胺分子内含有两个容易被氧化的酚羟基，具有很高的电化学活性，所以可用电化学方法直接测定。但是，多巴胺氧化产物的吸附会使电极污染，而导致电化学测定多巴胺的选择性和重现性较差。
然而，在以碳材料、贵金属材料等各类基体电极作为电化学检测器时，多巴胺的电化学检测却常常受到体内共存组分抗坏血酸和尿酸的干扰。因此通过化学修饰电极法提高测定多巴胺的选择性成为该类研究的热点。发明内容
本发明目的在于发明一种成本低、便捷式快速检测血液中多巴胺的方法。
本发明采用电化学法，以修饰多壁碳纳米管/胆碱的玻碳电极为工作电极，将血液样品用中性磷酸缓冲溶液稀释，在-0. 4V 0. 8V的电位范围内做循环伏安扫描，根据所得电化学曲线，对血液中多巴胺的含量进行初步定性分析和定量分析。
如被检测的血液样品中含有多巴胺，则经电化学扫描后，多巴胺会吸附在修饰后的工作电极表面发生氧化还原反应。采用循环伏安法，在循环伏安曲线上0.2V左右如出现相应的氧化还原峰，则证明血液样品中含有多巴胺；如无，则说明血液样品中不含这个物质。
因此，初步鉴定血液样品中是否含有多巴胺只需1 lOmin，本发明快捷、准确、方便。
多壁碳纳米管具有抗污染，稳定性好等特点。因此，使用过的修饰电极只需用超纯水冲洗即可再次使用。
在检测限内，如血液样品中含有多巴胺，在制得的循环伏安曲线中，在-0.4V 0.8V电位范围内就会出现相应的氧化还原峰。反之就没有峰。多巴胺的测量方法是峰电流与相应的多巴胺的浓度成正比，可用标准加入法或工作曲线法或其它方法定量检测血液样品中多巴胺的含量。
故，本发明样品不需预处理，检测方法简单，测定时间只需1 lOmin，较现行方法快速。且抗干扰能力强，成本低，不需要复杂的仪器设备。
本发明所述工作电极为经过多壁碳纳米管/胆碱修饰的玻碳电极。
稀释缓冲溶液为中性磷酸缓冲溶液。


图为含有多巴胺血液样品的循环伏安图。
具体实施方式
一、定性检测
检测方法电化学法，如循环伏安法。
电极工作电极为经多壁碳纳米管/胆碱修饰的玻碳电极。对电极用钼片电极，参比电极用银-氯化银电极或饱和甘汞电极。
电解质溶液中性磷酸缓冲溶液
操作方法、初步分析
循环伏安法
将三电极插入用中性磷酸缓冲溶液稀释的血液样品中，循环伏安扫描，制得循环伏安图，观察在-0. 4V 0. 8V电位范围内是否有相应的氧化还原峰。
结果
若再-0. 4V 0. 8V电位范围内出现相应的氧化还原峰，如图所示，表明血液样品中含有多巴胺。
若无，表明在检测限内血液样品中不含多巴胺。
二、定量测定
检测方法电化学法，如循环伏安法。
电极工作电极为经多壁碳纳米管/胆碱修饰的玻碳电极。对电极用钼片电极，参比电极用银-氯化银电极或饱和甘汞电极。
电解质溶液中性磷酸缓冲溶液
操作方法
将经过以上使用的工作电极，经超纯水清洗后，再移入一系列浓度多巴胺的中性磷酸缓冲溶液中，作出循环伏安扫描或差分脉冲扫描或线性伏安扫描或方波伏安扫描图。
结果
在循环伏安图上在-0. 4V 0. 8V电位范围内有相应的氧化还原峰，如图所示，表明血液样品中含有多巴胺。如用循环伏安扫描或线性伏安扫描或方波伏安扫描，则在伏安曲线图上-0. 4V 0. 8V电位范围内有相应的氧化峰或还原峰，表明血液样品中有多巴胺。 峰电流与多巴胺的浓度成正比，与多巴胺的标准样的峰电流值进行比较，用标准加入法或工作曲线法或其它方法定量检测血液样品中的多巴胺的含量。
三、样品的处理
将得到的血液样品用中性磷酸缓冲溶液稀释到一定浓度即可。
权利要求
1.血液中多巴胺的电化学快速检测方法，其特征在于采用电化学法，以修饰多壁碳纳米管/胆碱的玻碳电极为工作电极，将血液样品用中性磷酸缓冲溶液稀释，在-0. 4V 0. 8V 的电位范围内做循环伏安扫描，根据所得电化学曲线，对血液中多巴胺的含量进行初步定性分析和定量分析。
2.根据权利要求1所述血液中多巴胺的电化学快速检测方法，其特征在于将经过多壁碳纳米管/胆碱修饰的玻碳电极移入溶有一定浓度的多巴胺的中性磷酸缓冲溶液中作循环伏安扫描或差分脉冲扫描或线性伏安扫描或方波伏安扫描，根据制得的伏安曲线对多巴胺进行准确的定性和定量分析。
3.根据权利要求1和2所述血液中多巴胺的电化学快速检测方法，其特征在于所述工作电极为经过多壁碳纳米管/胆碱修饰的玻碳电极。
4.根据权利要求1和2所述血液中多巴胺的电化学快速检测方法，其特征在于所述中性溶液为磷酸缓冲溶液。
全文摘要
血液中多巴胺的电化学快速测定方法，涉及到临床医学检测技术领域，特别是血液中多巴胺的检测方法。采用电化学方法，以修饰多壁碳纳米管/胆碱的玻碳电极为工作电极，将多巴胺溶于中性磷酸缓冲溶液中，在-0.4V～0.8V的电位范围内做循环伏安扫描，根据所得电化学曲线，对血液中多巴胺的含量进行初步定性分析和定量分析。观察在循环伏安曲线上0.2V左右如出现相应的氧化还原峰，则证明血样中含有多巴胺；如无，则说明血样中不含这种物质。因此，初步鉴定血样中是否含有多巴胺只需1～10min，本发明快捷、准确、方便。
文档编号G01N27/48GK102495126SQ201110406860
公开日2012年6月13日 申请日期2011年12月9日 优先权日2011年12月9日
发明者丁振东, 夏晓莉, 季文艳, 宋启霞, 张华 , 王海军, 许冰冰, 马洁 申请人:江南大学