专利名称：植物样品中果胶含量的测定方法
技术领域：
本发明涉及植物组分的提取，尤其涉及一种植物样品中果胶含量的测定方法。
技术背景
在植物中果胶含量的测定中，常需用到显色法检测，但在显色法检测时，由于色素 会有一定吸光度，从而对显色法造成干扰，同时糖会与显色剂反应形成有色物质，这也会对 显色法造成干扰，所以在测定过程中，通常都需要先进行除糖、除色素的前处理。在植物中 果胶含量的测定中，常用的样品前处理方法是将植物粉末样品用浓度为80%的乙醇溶液 加热回流1小时，去除滤液，余下滤渣再做进一步的提取处理，用于其它检测，此种方法一 般称为乙醇处理法，但这种乙醇处理法存在的问题是只能除去小分子水溶性糖，同时对色 素的提取也有一定局限性。而在滤渣处理时，有时候需要用酸液提取，这就造成之前来被提 取出来的多糖水解而被提取出来，而由于酸的作用破坏了细胞壁，使之前来能溶解出来的 色素也被提取出来，从而影响最终检测结果。在进行完前处理后，要对经过前处理的样品进 行检测。现有的检测方法有重量法，由于果胶不是单纯半乳糖醛酸的聚合，在采用重量法检 测时，支链上的中性糖和a-L-(l —2)鼠李糖，以及甲酯化基团、乙酰化基团同时被沉淀下 来，所以其重量必然高于对半乳糖醛酸累计量。因此，重量法检测结果无法反映出样品中的 半乳糖醛酸含量情况，即无法反映出样品中表征果胶特性的半乳糖醛酸支链骨架的含量情 况。发明内容
本发明要解决的技术问题是克服现有技术存在的缺陷，提供一种植物样品中果胶 含量的测定方法，检测结果更加准确。
本发明提供的一种植物样品中果胶含量的测定方法，包括如下步骤
1)在植物样品中加入酸性醇溶液，随后在水浴中加热回流，再进行一次过滤；
2)将一次过滤得到的滤渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加热回流，再进行二次过滤， 冷却后定容，得到滤液待用；
3)往二次过滤后的滤渣加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液处理，再加入果胶酶溶液，在 水浴中加热振荡，然后进行三次过滤，得到滤液待用；
4)将步骤2、中得到的滤液依次加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液、果胶酶溶液，然后在 水浴中加热振荡，得到酶解液，在酶解液中合并步骤幻得到的滤液，定容，得到待测液；
5)将待测液吸入到连续流动分析仪中，所述待测液与吸入到连续流动分析仪中的 强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在490nm MOnm波长下进行检测。
优选地，步骤1)中，以体积百分比计，酸性醇溶液的醇浓度为60% 80%;而氢离 子浓度为0. 005mol/L 0. 02mol/L，酸性醇溶液加入量为1克样品加入约50 200mL酸性醇溶液。
优选地，步骤1)中，所述水浴中加热回流的温度为80°C 100°C，时间为10分 钟 1小时。
优选地，所述酸溶液是浓度为0. 05mol/L 0. lmol/L的盐酸，水浴中加热回流的 温度为80°C 100°C，时间为30分钟 2小时，对于1克植物样品，定容后滤液体积控制 在 200mL 250mLo
优选地，乙酸/乙酸钠缓冲液和果胶酶溶液加入量为1克植物样品，加入缓冲液 15mL 20mL、加入果胶酶溶液ImL 2mL，其中，每毫升果胶酶溶液的酶活性300个酶活力 单位以上；所述水浴中加热振荡的温度为40°C 60°C，时间为1小时 2小时。
优选地，ImL滤液中加入缓冲液15 20mL、加入果胶酶溶液1 2mL，其中，每毫 升果胶酶溶液的酶活性为300个酶活力单位以上，所述水浴中加热振荡的温度为40°C 60°C，时间为1小时 2小时。
优选地，步骤5)中将待测液与强酸性分解试剂通过螺旋管混合，在待测液与强酸 性分解试剂反应过程中加热，而后冷却。
优选地，所述植物样品为粉末状。
优选地，步骤1)中，所述植物样品体积较大时，加入酸性醇溶液后先搅拌成桨，再 进行水浴加热回流。
优选地，所述显色剂为对羟基联苯溶液，所述对羟基联苯溶液中的各组分配比为 IOOOmL蒸馏水中溶解300mg 500mg对羟基联苯及3g 5g氢氧化钠。
优选地，所述强酸性分解试剂为含有四硼酸钠的浓硫酸溶液，其中，四硼酸钠与浓 硫酸的配比为1000mL浓度为92% 99%的浓硫酸中溶解3g 6g的四硼酸钠。
优选地，在待测液与强酸性分解试剂反应过程中加热的温度为90°C 99°C。
优选地，冷却采用匝数为20匝 50匝的冷却管冷却。
优选地，以体积百分比计，步骤幻、步骤4)中的果胶酶溶液的浓度为300u/mL 600u/mLo
与现有技术相比，本发明具有如下优点
一、由于在步骤1)中，采用酸性醇溶液处理取代现有技术的醇溶液处理，除糖效 果更高、处理时间更短，并有利于减少其后步骤2)中酸溶液浸泡、加热回流处理的所需时 间。同时，整个处理过程，由于不需要离子色谱法中为适合于低含量样品检测的特点而对样 品进行大量稀释处理，所以也减少了多项稀释定容等处理步骤，减少了操作的复杂程度，提 高了效率。
二、由于采用连续流动法对经过处理得到的待测液进行检测，将待测液吸入连续 流动分析仪中，与强酸性分解试剂反应，对待测液中果胶进行腐化、分解，转化为可以显色 的衍生物，从而更便于光度检测，因而使得检测过程更加容易。


图1是本发明植物中果胶含量的连续流动测定方法的流程图2是本发明中利用连续流动分析仪的检测流程图3是半乳糖醛酸标准溶液显色后的吸光度扫描谱图4是样品提取液显色后的吸光度扫描谱图5是分析仪吸光度扫描图之一；
图6是标准曲线描图之一；
图7是分析仪吸光度扫描图之二 ；
图8是标准曲线扫描图之二。
具体实施方式
为使本发明的发明目的、技术方案更加清楚，以下通过实施例进行详细说明。
参见图1，本发明的植物样品中果胶含量的测定方法，包括如下步骤
Si、在植物样品中加入酸性醇溶液，随后在水浴中加热回流，再进行一次过滤；
S2、将一次过滤得到的滤渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加热回流，再进行二次过 滤，冷却后定容，得到滤液待用；
经过过滤得到的滤渣，再用酸溶液冲洗多次，可以将滤渣上附着的滤液极大程度 地去除；
通过此步骤，将大部分果胶组分提取到滤液中；
S3、往二次过滤后的滤渣中加入一定量的乙酸/乙酸钠缓冲溶液处理，再加入一 定量的果胶酶溶液，在水浴中加热振荡，然后进行三次过滤，得到滤液待用；
通过此步骤，使得滤渣中来被提取的果胶被提取液提取出来，并分解为半乳糖醛 酸；
S4、将步骤S2中得到的滤液依次加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液、果胶酶溶液，然后在 水浴中加热振荡，得到酶解液，在酶解液中加入步骤S3得到的滤液，定容，得到待测液；
通过此步骤，使得酸液提取液中的果胶充分水解为半乳糖醛酸，并与滤渣中残留 的果胶提取液混合，使提取得到的果胶能够充分收集，得到待测液，以使最终检测结果更加 准确；
S5、将待测液吸入到连续流动分析仪中，所述待测液与吸入到连续流动分析仪中 的强酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在490 MOnm波长下进行检测。
待测液通过与强酸性分解试剂反应，使得果胶腐化，转化为可以显色的衍生物，从 而更便于光度检测；
其中，显色剂为对羟基联苯溶液，该对羟基联苯溶液中的各组分配比为1000mL 蒸馏水中溶解300mg 500mg (优选400mg)对羟基联苯及3g 5g氢氧化钠(优选4g)。
其中，强酸性分解试剂为含有四硼酸钠的浓硫酸溶液，其中，四硼酸钠与浓硫酸的 配比为1000mL浓度为92% 99%的浓硫酸中溶解3 6g (优选4. 8g)的四硼酸钠。
其中，强酸性分解试剂采用两根泵管或三根泵管并联向连续流动分析仪进样；单 泵管流量控制在0. 6ml/min 1. 2ml/min,总流量控制为1. 6ml/min 3. Oml/min,强酸性 分解试剂的流量与进样量的比例关系是13. O 1 30 1(优选是16 1 20 1)。 以此克服，强酸性分解试剂粘度大，在流动分析管路中流动困难的问题。
下面通过具体的实施例对本发明进行进一步描述。
实施例一
1)在植物样品中加入乙醇体积百分比为60%、盐酸浓度为0. Olmol/L的酸性醇溶6液，随后在90°C水浴中加热回流20分钟，再进行一次过滤；
2)将一次过滤得到的滤渣用0. 05mol/L的盐酸溶液浸泡，并在90°C的水浴中加热 回流30分钟，再进行二次过滤，冷却后定容到250mL，得到滤液待用；
3)往二次过滤后的滤渣加入20mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸钠缓冲溶液 处理，再加入ImL的300u/mL的果胶酶溶液，在55°C的低温水浴中加热振荡1小时，然后进 行三次过滤，得到滤液待用；
4)将步骤2)中得到的滤液移取lmL，依次加入20mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸 /乙酸钠缓冲溶液，ImL的300u/mL的果胶酶溶液，然后在55°C的低温水浴中加热振荡1小 时，得到酶解液，在酶解液中合并步骤幻得到的滤液，以质量百分比为0. 苯甲酸溶液定 容到100mL，得到待测液；
5)将待测液(试样)吸入到连续流动分析仪中，与吸入到连续流动分析仪中的含 有十水四硼酸钠的浓硫酸溶液一同经过螺旋管混合，然后加热至90°C，待测液与含有十水 四硼酸钠的浓硫酸溶液发生反应，分解转变为糠醛碱的衍生物，而后冷却，与加入的显色剂 通过螺旋管混勻，与显色剂反应显色，在500nm波长下进行检测。
其中，所有过滤处理都不能采用普通滤片，而需要采用玻璃纤维滤片，也可采用其 它不含植物纤维的滤片代替。
其中，步骤5)中的检测流程参见图2。
其中，步骤幻中的显色剂为对羟基联苯溶液，该对羟基联苯溶液中的各组分配比 为1000mL蒸馏水中溶解400mg对羟基联苯及4g氢氧化钠。
其中，含有四硼酸钠的浓硫酸溶液中，四硼酸钠与浓硫酸的配比为1000mL浓度 为93%的浓硫酸中溶解3. 5g的四硼酸钠。
其中，步骤幻中加热采用的加热器，其内部设置的加热螺旋管匝数为64匝。
其中，步骤5)中采用水浴冷却，冷却管匝数为30匝(冷却水入口直接连接到水龙 头处，冷却水流量和螺旋管匝数的设置，以使冷却后流程管路温度接近室温为适宜)。
实施例二
1)在植物样品中加入乙醇体积百分比为80%、盐酸浓度0. 01mol/L的酸性醇溶 液，随后在89°C的水浴中加热回流25分钟，再进行一次过滤；
2)将一次过滤得到的滤渣用0. lmol/L的盐酸溶液浸泡，并在92°C的水浴中加热 回流30min，再进行二次过滤，得到滤液待用；
3)往二次过滤后的滤渣加入20mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸钠缓冲溶液 清洗，再加入ImL的400u/mL的果胶酶溶液，在50°C的低温水浴中加热振荡1.证，然后进行 三次过滤，得到滤液待用；
4)将步骤2)中得到的滤液移取lmL，依次加入20mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸 /乙酸钠缓冲溶液，ImL的400u/mL的果胶酶溶液，然后在55°C低温水浴中加热振荡lh，得 到酶解液，在酶解液中合并步骤幻得到的滤液，以质量百分比为0. 苯甲酸溶液定容到 250mL，得到待测液；
5)将待测液(试样)吸入到连续流动分析仪中，与吸入到连续流动分析仪中的含 有十水四硼酸钠的浓硫酸溶液一同经过螺旋管混合，然后加热至95°C，待测液与含有十水 四硼酸钠的浓硫酸溶液发生反应，分解转变为糠醛碱的衍生物，而后冷却，与加入的显色剂通过螺旋管混勻，与显色剂反应显色，在530nm波长下进行检测。
其中，步骤5)中的检测流程参见图2。
其中，步骤幻中的显色剂为对羟基联苯溶液，该对羟基联苯溶液中的各组分配比 为1000mL蒸馏水中溶解300mg对羟基联苯及3g氢氧化钠。
其中，含有四硼酸钠的浓硫酸溶液中，四硼酸钠与浓硫酸的配比为1000mL浓度 为92%的浓硫酸中溶解3g的四硼酸钠。
其中，步骤幻中加热采用的加热器，其内部设置的加热螺旋管匝数为35匝。
其中，步骤5)中采用水浴冷却，冷却管匝数为25匝。
实施例三
1)在植物样品中加入乙醇体积百分比为80%、盐酸浓度0. 005mol/L的酸性醇溶 液，随后在88°C的水浴中加热回流35分钟，再进行一次过滤；
2)将一次过滤得到的滤渣用0. OSmol/L的酸溶液浸泡，并在89°C的水浴中加热回 流lh，再进行二次过滤，得到滤液待用；
3)往二次过滤后的滤渣加入25mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸钠缓冲溶液 清洗，再加入ImL的400u/mL的果胶酶溶液，在45°C的低温水浴中加热振荡池，然后进行三 次过滤，得到滤液待用；
4)将步骤2)中得到的滤液移取lmL，依次加入25mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸/ 乙酸钠缓冲溶液，ImL的400u/mL的果胶酶溶液，然后在低温水浴中加热振荡池，得到酶解 液，在酶解液中合并步骤3)得到的滤液，以质量百分比为0. 苯甲酸溶液定容到250mL， 得到待测液；
5)将待测液(试样)吸入到连续流动分析仪中，与吸入到连续流动分析仪中的含 有十水四硼酸钠的浓硫酸溶液一同经过螺旋管混合，然后加热至96°C，待测液与含有十水 四硼酸钠的浓硫酸溶液发生反应，分解转变为糠醛碱的衍生物，而后冷却，与加入的显色剂 通过螺旋管混勻，与显色剂反应显色，在520nm波长下进行检测。
其中，步骤5)中的检测流程参见图2。
其中，步骤幻中的显色剂为对羟基联苯溶液，该对羟基联苯溶液中的各组分配比 为1000mL蒸馏水中溶解360mg对羟基联苯及5g氢氧化钠。
其中，含有四硼酸钠的浓硫酸溶液中，四硼酸钠与浓硫酸的配比为1000mL浓度 为94%的浓硫酸中溶解6g的四硼酸钠。
其中，步骤幻中加热采用的加热器，其内部设置的加热螺旋管匝数为35匝。
其中，步骤5)中采用水浴冷却，冷却管匝数为40匝。
实施例四
1)将植物样品加入乙醇体积百分比为80%、盐酸浓度为0. 02mol/L酸性的醇溶 液，先搅拌成桨，随后在91°C的水浴中加热回流21分钟，再进行一次过滤；
2)将一次过滤得到的滤渣用0. OlOmol/L的酸溶液浸泡，并在86°C的水浴中加热 回流1小时，再进行二次过滤，得到滤液待用；
3)往二次过滤后的滤渣加入25mL的0. lmol/L、pH 4. 0的乙酸/乙酸钠缓冲溶液 清洗，再加入ImL的300u/mL的果胶酶溶液，在48°C低温水浴中加热振荡1. 8小时，然后进 行三次过滤，得到滤液待用；8
4)将步骤2)中得到的滤液移取lmL，依次加入25mL的0. lmol/L、pH4. 0的乙酸/ 乙酸钠缓冲溶液，ImL的300u/mL的果胶酶溶液，然后在低温水浴中加热振荡lh，得到酶解 液，在酶解液中合并步骤3)得到的滤液，以质量百分比为0. 苯甲酸溶液定容到250mL， 得到待测液；
5)将待测液(试样)吸入到连续流动分析仪中，与吸入到连续流动分析仪中的含 有十水四硼酸钠的浓硫酸溶液一同经过螺旋管混合，然后加热至93°C，待测液与含有十水 四硼酸钠的浓硫酸溶液发生反应，分解转变为糠醛碱的衍生物，而后冷却，与加入的显色剂 通过螺旋管混勻，与显色剂反应显色，在490nm波长下进行检测。
其中，步骤5)中的检测流程参见图2。
其中，步骤幻中的显色剂为对羟基联苯溶液，该对羟基联苯溶液中的各组分配比 为1000mL蒸馏水中溶解400mg对羟基联苯及4. 5g氢氧化钠。
其中，含有四硼酸钠的浓硫酸溶液中，四硼酸钠与浓硫酸的配比为1000mL浓度 为95%的浓硫酸中溶解5g的四硼酸钠。
其中，步骤幻中加热采用的加热器，其内部设置的加热螺旋管匝数为64匝。
其中，步骤5)中采用水浴冷却，冷却管匝数为30匝。
以下通过实验证明本发明植物样品中果胶含量的测定方法的效果。
一、萃取试样基底颜色的干扰
前处理准确称取0. Ig植物粉末样品，用IOOmL氢离子浓度为0. Olmol/L、醇含量 80%的盐酸-乙醇溶液，在90°C水浴条件下加热回流20min，过滤除去糖类组分和色素，将 滤渣供下一步提取待测组分用。
酸溶液处理方案和酶解提取方案与前述实施例相同，在此不再详细叙述。
实验方案将待测液(即提取了果胶的提取液)作为试样注入连续流动分析仪中， 在不加入显色剂的情况下，用紫外-可见分光光度计对分析仪流出(与除显色剂外的其他 溶剂混合后)的溶液进行吸光度扫描，检测结果见表1。
表1 待测试验流经分析仪后的吸光度扫描结果
样品不同测定波长下的吸光度值，A500nm510nm520nm530nm540nm1#0.00030.00020.00030.00060.00112#0.00050.00060.00080.00110.0013
由表2的实验数据可知，待测液中所含色素极少，待测液的本底颜色在果胶检测 波长范围附近对显色检测法的干扰很小，不会对拟采用的光度检测法造成干扰。这说明酸 性醇溶液除色素效果理想。
二、测定波长的设定
实验方案1 移取ImL半乳糖醛酸标准溶液(半乳糖醛酸浓度为50mg/L)置于20mL 具塞试管，加入四硼酸钠-硫酸溶液6mL，待冷却后用移液枪加入ImL间羟基联苯溶液(显 色剂)，混勻后超声振摇5min除去气泡。以ImL蒸馏水同上操作制得空白液调零，用紫外可 见分光光度计在350nm SOOnm波长范围内扫描。扫描结果如图3所示。
实验方案2 按照前述实施例所述的方法提取果胶，得到待测液。分别取Iml两种 不同的待测液，置于20mL具塞试管中。而后分别加入6ml四硼酸钠-硫酸溶液，待其冷却 后，加入Iml间羟基联苯溶液，混勻后超声振摇5min除去气泡。以ImL蒸馏水同上操作制 得空白液调零，用紫外可见分光光度计在400-650nm波长范围内扫描，确定最大吸收波长， 扫描结果见图4。
由图3可见半乳糖醛酸标准溶液显色后最大吸收波长为520. 89nm ；参见图4，曲 线B为采取酸醇溶液除糖的样品扫描结果，曲线C为采取醇溶液除糖的样品扫描结果，由 图4可见，不论何种前处理方式，待测液中果胶组分显色后的最大吸收波长约为510nm(分 别为507. 90nm和508. 03nm)。而在490nm MOnm波长范围内，测定波长变动5nm，样品 显色出峰值波动小于5%。因此，合适的测定波长范围是490nm MOnm，优选波长范围是 5IOnm 520nmo
三、糖含量对检测结果的干扰
经过试验检测，待测液(即提取了果胶的提取液)中，糖的含量低干2.5%。试验 方案与结果如下
试验方案采用烤烟(1#)和白肋烟(2#)两个样品，按照本发明的方法进行处理， 制得待测液，将待测液采用连续流动分析法测定其中的水溶性总糖含量。
表2 酸解样品的糖含量检测结果
权利要求
1.一种植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，包括如下步骤1)在植物样品中加入酸性醇溶液，随后在水浴中加热回流，再进行一次过滤；2)将一次过滤得到的滤渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加热回流，再进行二次过滤，冷却 后定容，得到滤液待用；3)往二次过滤后的滤渣加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液处理，再加入果胶酶溶液，在水浴 中加热振荡，然后进行三次过滤，得到滤液待用；4)将步骤幻中得到的滤液依次加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液、果胶酶溶液，然后在水浴 中加热振荡，得到酶解液，在酶解液中合并步骤幻得到的滤液，定容，得到待测液；5)将待测液吸入到连续流动分析仪中，所述待测液与吸入到连续流动分析仪中的强 酸性分解试剂反应，分解成糠醛碱的衍生物，而后与加入的显色剂反应显色，在490nm MOnm波长下进行检测。
2.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中， 以体积百分比计，酸性醇溶液的醇浓度为60% 80% ；而氢离子浓度为0. 005mol/L 0. 02mol/L，酸性醇溶液加入量为1克样品加入约50mL 200mL酸性醇溶液。
3.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中，所 述水浴中加热回流的温度为80°C 100°C，时间为10分钟 1小时。
4.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤幻中， 所述酸溶液是浓度为0. 05mol/L 0. lmol/L的盐酸，水浴中加热回流的温度为80°C IOO0C，时间为30分钟 2小时，对于1克植物样品，定容后滤液体积控制在200mL 250mL。
5.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤幻中，乙 酸/乙酸钠缓冲液和果胶酶溶液加入量为1克植物样品，加入缓冲液15mL 20mL、加入果 胶酶溶液ImL 2mL，其中，每毫升果胶酶溶液的酶活性300个酶活力单位以上；所述水浴 中加热振荡的温度为40°C 60°C，时间为1小时 2小时。
6.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤4)中， ImL滤液中加入缓冲液15 20mL、加入果胶酶溶液1 2mL，其中，每毫升果胶酶溶液的酶 活性为300个酶活力单位以上，所述水浴中加热振荡的温度为40°C 60°C，时间为1小 时 2小时。
7.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤幻中将 待测液与强酸性分解试剂通过螺旋管混合，在待测液与强酸性分解试剂反应过程中加热， 而后冷却。
8.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，所述植物样 品为粉末状。
9.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，步骤1)中，所 述植物样品体积较大时，加入酸性醇溶液后先搅拌成桨，再进行水浴加热回流。
10.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，所述显色剂 为对羟基联苯溶液，所述对羟基联苯溶液中的各组分配比为1000mL蒸馏水中溶解300 500mg对羟基联苯及3g 5g氢氧化钠。
11.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，所述强酸性 分解试剂为含有四硼酸钠的浓硫酸溶液，其中，四硼酸钠与浓硫酸的配比为1000mL浓度为92% 99%的浓硫酸中溶解3g 6g的四硼酸钠。
12.根据权利要求7所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，在待测液与 强酸性分解试剂反应过程中加热的温度为90°C 99°C。
13.根据权利要求7所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，冷却采用匝 数为20匝 50匝的冷却管冷却。
14.根据权利要求1所述的植物样品中果胶含量的测定方法，其特征在于，以体积百分 比计，步骤幻、步骤4)中的果胶酶溶液的浓度为300u/mL 600u/mL。
全文摘要
本发明公开一种植物样品中果胶含量的测定方法，包括如下步骤1)在植物样品中加入酸性醇溶液，随后在水浴中加热回流，再进行一次过滤；2)将一次过滤得到的滤渣用酸溶液浸泡，并在水浴中加热回流，再进行二次过滤，冷却后定容，得到滤液待用；3)往二次过滤后的滤渣中加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液处理，再加入果胶酶溶液，在水浴中加热振荡，然后进行三次过滤，得到滤液待用；4)将步骤2)中得到的滤液依次加入乙酸/乙酸钠缓冲溶液、果胶酶溶液，然后在水浴中加热振荡，得到酶解液，在酶解液中加入步骤3)得到的滤液，定溶，得到待测液；5)将待测液吸入到连续流动分析仪中进行检测。本发明具有检测结果准确的优点。
文档编号G01N5/04GK102033050SQ20111000705
公开日2011年4月27日 申请日期2011年1月13日 优先权日2011年1月13日
发明者孔浩辉, 金保锋, 黄翼飞 申请人:广东中烟工业有限责任公司