专利名称：蓝花药的质量控制方法
技术领域：
本发明涉及一种由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石 膏、儿茶、胡黄连10味中药材制成的蓝花药的质量控制方法，尤其是一种用高 效液相色谱法测定青黛含量、用气相色谱法测定冰片含量以及用薄层色谱法对 冰片、儿茶进行定性鉴别的蓝花药的质量控制方法。
背景技术：
蓝花药是一种用于治疗急慢性扁桃腺炎、齿龈红肿、咽喉疼痛及小儿疳症
的中成药，该产品收载于部颁标准中药成方制剂第三册(WS3-B-0647-91)，由
硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶和胡黄连十味 药材制成。在其质量标准中，具体规定了蓝花药的处方、制法、性状及鉴别方 法，但是仅有青黛、硼砂、冰片的化学鉴别法，专属性不强，尚无所含药味的 薄层鉴别及含量测定方法，局限性很大，难以较全面地控制该药物的质量。对
此，《时珍国医国药》第2006年第17巻第5期所公开的"蓝花药的质量标准研 究"对该药物的质量控制方法作了补充，但是也只有采用显微鉴别法对蓝花药 中石膏(偏光)、青黛、儿茶、琥珀、滑石、冰片(升华产物)进行显微鉴别； 采用薄层色谱法对处方中的青黛、冰片进行定性鉴别；采用滴定法测定硼砂中 Na2B407的含量，还是没有测定青黛、冰片的含量，所述的对冰片进行定性鉴 别是用乙醚超声提取。乙醚属于低沸点溶剂，在超声提取时极易挥发，在实际 应用中难以操作。

发明内容
本发明是为了克服现有技术的不足，提供一种用高效液相色谱法测定青黛 含量、用气相色谱法测定冰片含量以及用薄层色谱法对冰片、儿茶进行定性鉴 别，简单易行，具有可操作性的蓝花药的质量控制方法。
本发明的技术解决方案是 一种蓝花药的质量控制方法，其特征在于是用 高效液相色谱法对青黛含量进行测定，操作步骤如下
色谱条件以十八烷基硅垸键合硅胶为填充剂；
以体积比73: 27的甲醇一水为流动相；
检测波长为289 nm;
理论板数按靛玉红峰计算应不低于7000;
对照品溶液的制备精密称取靛玉红对照品5mg，置25ml量瓶中，加三氯 甲垸使靛玉红溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取lml置10ml量瓶中用甲醇稀 释至刻度，摇匀，即得每lml中含靛玉红20ug的对照品溶液；
供试品溶液的制备取蓝花药研细，精密称取0.25g，置具塞锥形瓶中， 精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定 重量，用三氯甲垸补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5n 1，注入液相色谱仪， 测定，每lg蓝花药含青黛以靛玉红计，不得少于80ug。
本发明的特征是用气相色谱法对冰片含量进行测定，操作步骤如下-
色谱条件聚乙二醇(PEG) -20M毛细管柱(柱长30m，内径0. 32mm，膜 厚度O. 5pm)，柱温为14(TC;理论板数按龙脑峰计算应不低于30000;
校正因子测定精密称取水杨酸甲酯对照品加无水乙醇制成每lml含2mg 的溶液，作为内标溶液;精密称取冰片对照品，加内标溶液制成每lml含2mg的 溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液0.5^1，注入气相色谱仪，计算校正 因子；
供试品溶液的制备取蓝花药研细，精密称取0.5g置锥形瓶中，精密加入 内标溶液5ml，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用无水乙醇补充减 失的重量，滤过，准确吸取续滤液0.5 ml，再精密加0.5 ml内标溶液，混匀作 为供试品溶液；
测定法精密吸取对照品溶液和供试品溶液各0.5 |il，注入气相色谱仪， 测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得冰片含量，每lg蓝花药含冰片 (d。H180)不得少于15mg。
本发明的特征是用薄层色谱法对冰片进行定性鉴别，操作步骤如下-取蓝花药1.5g研细，加三氯甲垸15ml摇匀，浸渍2小时，滤过，滤液作 为供试品溶液；取冰片对照品，加三氯甲烷制成每lml含2mg的溶液，作为对 照品溶液。照薄层色谱法，吸取上述二种溶液各4iU，分别点于同一硅胶G薄 层板上，以体积比为9: 1的苯-丙酮为展开剂展开，取出，晾干，喷以5%香草 醛硫酸溶液，于105"C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照品色谱 相应的位置上显相同颜色的主斑点。
本发明的特征是用薄层色谱法对儿茶进行定性鉴别，操作步骤如下
取蓝花药8g研细，加乙酸乙酯40ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干 后的残渣加甲醇3 ml使其溶解，作为供试品溶液；另取儿茶对照药材50mg， 加甲醇10ml，浸渍20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。照薄层色谱法， 吸取供试品溶液6nl、对照品溶液5tU，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体 积比为20: 5: 2的三氯甲垸-甲醇-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，喷以5% 香草醛硫酸溶液，在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药 材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
本发明弥补了现有技术的不足，完善的质量控制标准能够保证药品质量的 可靠性和均一性。
① 增加青黛的定量测定方法，靛玉红是青黛中的一种的主要有效成分， 具有良好的抗菌活性，本发明利用高效液相色谱法测定该药物中靛玉红的含量， 结果准确，重现性好；
② 增加冰片的定量测定方法，本发明利用高效气相色谱法测定该药物中冰 片的含量，方法简便，结果准确，重现性好；
③ 改变冰片的薄层色谱定性鉴别方法，是用三氯甲烷作为提取溶剂，其挥 发性远低于乙醚，具有易于操作、安全性高的优点。并经方法学试验确认方法 专属、可行、阴性无干扰；
④ 增加儿茶的薄层色谱定性鉴别方法，并经方法学试验确认方法专属、可 行、阴性无干扰。
具体实施方式
-实施例1:
按照标准制法，制成蓝花药(由大连美罗中药厂有限公司提供，批号 20070502)。
对照品及对照药材均由中国药品生物制品检定所提供。 照中国药典2005年版一部附录VID高效液相色谱法对青黛含量进行测定， 操作步骤如下
色谱条件以十八垸基硅垸键合硅胶为填充剂；
以体积比73: 27的甲醇一水为流动相； 检测波长为289 nm;
理论板数按靛玉红峰计算应不低于7000;
对照品溶液的制备精密称取靛玉红对照品5mg，置25ml量瓶中，加三氯 甲烷使靛玉红溶解并稀释至刻度，摇匀；精密量取lml置10ml量瓶中用甲醇稀 释至刻度，摇匀，即得每lml中含靛玉红20ug的对照品溶液；
供试品溶液的制备取蓝花药研细，精密称取0.25g，置具塞锥形瓶中， 精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定 重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1，注入液相色谱仪， 测定，每lg蓝花药含青黛以靛玉红计，为110"g。
实施例2:
在实施例1的基础上，照中国药典2005年版一部附录VIE气相色谱法对冰 片含量进行测定，操作步骤如下
色谱条件聚乙二醇(PEG) -20M毛细管柱(柱长30m ，内径0. 32mm， 膜厚度0.5pm)，柱温为14(TC;理论板数按龙脑峰计算应不低于30000;
校正因子测定精密称取水杨酸甲酯对照品加无水乙醇制成每lml含2mg 的溶液，作为内标溶液;精密称取冰片对照品，加内标溶液制成每lml含2mg的 溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液0.5^1，注入气相色谱仪，计算校正 因子；
供试品溶液的制备取蓝花药研细，精密称取0.5g置锥形瓶中，精密加入 内标溶液5ml，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用无水乙醇补充减 失的重量，滤过，准确吸取续滤液0.5 ml，再精密加0.5 ml内标溶液，混匀作 为供试品溶液；
测定法精密吸取对照品溶液和供试品溶液各0.5 ^，注入气相色谱仪， 测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得冰片含量，每lg蓝花药含冰片 (Cu)HisO)为21.7mg。 实施例3:
在实施例1或实施例2的基础上，照中国药典2005版一部附录VI B中薄 层色谱法对冰片进行定性鉴别，操作步骤如下
取蓝花药1.5g研细，加三氯甲垸15ml摇匀，浸渍2小时，滤过，滤液作 为供试品溶液；取冰片对照品，加三氯甲垸制成每lml含2mg的溶液，作为对 照品溶液；吸取上述二种溶液各4P1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积 比为9: 1的苯-丙酮为展开剂展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于
105t:加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相
同颜色的主斑点。
实施例4:
在实施例3的基础上，照中国药典2005版一部附录VI B中薄层色谱法对
儿茶进行定性鉴别，操作步骤如下
取蓝花药8g研细，加乙酸乙酯40ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干 后的残渣加甲醇3 ml使其溶解，作为供试品溶液；另取儿茶对照药材50mg， 加甲醇10ml，浸渍20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液。吸取供试品溶液 6ul、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20: 5: 2 的三氯甲烷-甲醇-甲酸为展开剂展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液， 在105'C加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点。
权利要求
1. 一种蓝花药的质量控制方法，其特征在于是用高效液相色谱法对青黛含量进行测定，操作步骤如下色谱条件以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂； 以体积比7327的甲醇一水为流动相； 检测波长为289nm； 理论板数按靛玉红峰计算应不低于7000；对照品溶液的制备精密称取靛玉红对照品5mg，置25ml量瓶中，加三氯甲烷使靛玉红溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取1ml置10ml量瓶中用甲醇稀释至刻度，摇匀，即得每1ml中含靛玉红20μg的对照品溶液；供试品溶液的制备取蓝花药研细，精密称取0.25g，置具塞锥形瓶中，精密加入三氯甲烷25ml，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用三氯甲烷补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，测定，每1g蓝花药含青黛以靛玉红计，不得少于80μg。
2. 根据权利要求1所述的蓝花药的质量控制方法，其特征在于是用气相色 谱法对冰片含量进行测定，操作步骤如下色谱条件聚乙二醇(PEG) -20M毛细管柱(柱长30m，内径0. 32ram，膜 厚度0.5pm)，柱温为14(TC;理论板数按龙脑峰计算应不低于30000;校正因子测定精密称取水杨酸甲酯对照品加无水乙醇制成每lml含2mg 的溶液，作为内标溶液;精密称取冰片对照品，加内标溶液制成每lml含2mg的 溶液，作为对照品溶液；吸取对照品溶液0.5)^1，注入气相色谱仪，计算校正 因子；供试品溶液的制备取蓝花药研细，精密称取0.5g置锥形瓶中，精密加入 内标溶液5ml，称定重量，超声处理5分钟，再称定重量，用无水乙醇补充减 失的重量，滤过，准确吸取续滤液0.5 ml，再精密加0.5 ml内标溶液，混匀作 为供试品溶液；测定法精密吸取对照品溶液和供试品溶液各0.5^1，注入气相色谱仪， 测定，以龙脑、异龙脑峰面积之和计算，即得冰片含量，每lg蓝花药含冰片 (dO)不得少于15mg。
3. 根据权利要求1或2所述的蓝花药的质量控制方法，其特征在于是用薄层色谱法对冰片进行定性鉴别，操作步骤如下取蓝花药1.5g研细，加三氯甲垸15ml摇匀，浸渍2小时，滤过，滤液作 为供试品溶液；取冰片对照品，加三氯甲烷制成每lml含2mg的溶液，作为对 照品溶液；吸取上述二种溶液各4yl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积 比为9: 1的苯-丙酮为展开剂展开，取出，晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液，于 105"C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相 同颜色的主斑点。
4. 根据权利要求3所述的蓝花药的质量控制方法，其特征在于是用薄层色 谱法对儿茶进行定性鉴别，操作步骤如下取蓝花药8g研细，加乙酸乙酯40ml，超声处理10分钟，滤过，滤液蒸干 后的残渣加甲醇3 ml使其溶解，作为供试品溶液；另取儿茶对照药材50mg， 加甲醇10ml，浸渍20分钟，滤过，滤液作为对照药材溶液；吸取供试品溶液 6p1、对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20: 5: 2 的三氯甲垸-甲醇-甲酸为展开剂展开，取出、晾干，喷以5%香草醛硫酸溶液， 在105"C加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置 上，显相同颜色的斑点。
全文摘要
本发明公开了一种由硼砂、冰片、青黛、玄明粉、滑石粉、琥珀、枯矾、石膏、儿茶、胡黄连10味中药材制成的蓝花药的质量控制方法，是用高效液相色谱法测定青黛含量、用气相色谱法测定冰片含量以及用薄层色谱法对冰片、儿茶进行定性鉴别的蓝花药的质量控制方法。弥补了现有技术的不足，完善的质量控制标准能够保证药品质量的可靠性和均一性，简单易行，具有可操作性。
文档编号G01N30/36GK101390984SQ200810013418
公开日2009年3月25日 申请日期2008年9月27日 优先权日2008年9月27日
发明者刘志昆, 周文波, 伟 姜, 张成海, 李延成, 石桂芳, 心 陈 申请人:大连美罗中药厂有限公司