专利名称：实验用动物易碎组织快速稳定取材方法
技术领域：
本发明涉及一种实验用动物易碎组织快速稳定取材方法。
背景技术：
在动物实验过程中，肉眼下切取所需的实验用动物易碎组织如脑组织是常用的实验操作技术。目前实验人员常用的方法即将现剥下的鼠脑置于冰盒上的塑料器皿上直接切取，由于鼠脑质地软，在周围无阻挡物，无法固定的情况下，在切取脑组织时易致鼠脑游动、塌陷等从而费时费力，影响了所取组织的质量
发明内容

本发明的目的在于提供一种方便操作、形态良好的实验用动物易碎组织快速稳定取材方法。本发明提出的实验用动物易碎组织快速稳定取材方法，通过取材装置实现，所述取材装置由圆形或矩形塑料器皿和实验用动物易碎组织琼脂糖凝胶阴模构成，具体制作步骤如下
(1)所需组织石膏阳模的制作
①取实验用动物组织；
②按粉、水比例10克粉20-25ml水先后将齿科藻酸盐印模材和蒸馏水加入皮碗内，用调刀做“8”字形调和并略施压力，调和40s ;将搅拌均匀的混合膏料置于塑料器皿中，将动物组织放置于塑料器皿中央，轻轻加压使之陷入藻酸盐中，使藻酸盐与整个动物组织顶端齐平或略高出组织顶端。室温下待藻酸盐印模材凝固后取出易碎组织，则所需组织的藻酸盐阴模制作完成；
③按水、粉比例20-25ml水100克先后将蒸馏水和超硬石膏加入皮碗内，用调刀调拌不超过50秒，将其置于制作完好的藻酸盐阴模内，可适当振荡使石膏流至阴模内，分布均匀。使石膏平面稍高于藻酸盐平面以方便取出，待石膏凝固后取出即所需组织石膏阳模完成；
④在制作完成的组织石膏模型上滴上薄薄一层蜡油，方便后续操作中石膏模型与琼脂糖凝胶分离不粘连；
(2)实验用动物易碎组织快速稳定取材装置制作
①根据具体实验目的选择溶液与琼脂糖粉配制浓度合适的凝胶(琼脂糖凝胶硬度与所取组织硬度近似)。②将现配的稍冷却后的琼脂糖胶先倒部分于塑料器皿中，凝胶高度为0. 45-0. 55cm ;待其凝固后，将剩下的凝胶微波炉加热恢复液态再稍冷却后倾倒于已凝固的一层胶上，再将制备好的组织石膏阳模放置于其中并被胶所没过，可室温待其凝固或直接置于4°C冰箱速凝，小心取出石膏阳模并完好保存可反复使用。本发明中，所述溶液为PBS缓冲液(Western Blot实验)或DEPC水(RT-PCR实验)坐寸O本发明中，所述圆形塑料器皿直径为6cm、高为I. 5cm，所述矩形塑料器皿长为6cm、宽为 5cm、高为 I. 5cm。本发明的有益效果在于本发明操作简便，易于掌握，成本低廉，实验中一次性使用。


图I示所取实验用组织。图2示所取组织超硬石膏阳模。图3示实验用动物易碎组织快速稳定取材装置。图4为实验小鼠脑组织。图5为实验小鼠脑组织快速稳定取材装置。
具体实施例方式下面通过实施例结合附图进一步说明本发明。实施例I :
(I)小鼠脑组织石膏阳模制作 ①取出灌流固定后的实验小鼠脑组织，如图5所示。②按粉、水比例10克粉20-25ml水先后将齿科藻酸盐印模材和蒸馏水加入皮碗内，用调刀做“8”字形调和并略施压力，调和40s。将搅拌均匀的混合膏料立即置于直径约6cm、高约I. 5cm的圆形塑料器皿中，将取下的脑组织放置于塑料器皿中央，轻轻加压使之陷入藻酸盐中，使藻酸盐与整个组织顶端齐平或略高出组织顶端。室温下待藻酸盐印模材凝固后取出脑组织，则实验小鼠脑组织的藻酸盐阴模制作完成。③按水、粉比例20_25ml水100克先后将蒸馏水和超硬石膏加入皮碗内，用调刀调拌不超过50秒，将其置于制作完好的藻酸盐阴模内，可适当振荡使石膏流至阴模内，分布均匀。使石膏平面稍高于藻酸盐平面以方便取出，待石膏凝固后取出即小鼠脑组织石膏阳模完成，如图2所示。④在制作完成的小鼠脑组织石膏模型上滴上薄薄一层蜡油。(2)实验用小鼠脑组织快速稳定取材装置制作完成
①WesternBlot实验中琼脂糖凝胶选用PBS缓冲液配制，浓度为1%，即PBS缓冲液琼脂糖粉为100ml lg ；
②将现配的稍冷却后的琼脂糖胶先倒部分于直径约6cm、高约I.5cm的圆形塑料器皿中，胶约0. 5cm高。待其凝固后，将剩下的凝胶微波炉加热恢复液态再稍冷却后倾倒于已凝固的一层胶上，再将制备好的小鼠脑组织石膏模放置于其中并被胶所没过，直接置于4°C冰箱速凝预冷20min后取出石膏阳模，使用时将该装置置于冰盒上，取出灌流固定后的小鼠脑对应放在该装置中的琼脂糖凝胶阴模中，用刀片切下所需要的脑组织结构即可，如图5所示。
权利要求
1.一种实验用动物易碎组织快速稳定取材方法，其特征在于通过取材装置实现，所述取材装置由圆形或矩形塑料器皿和实验用动物易碎组织琼脂糖凝胶阴模构成，具体制作步骤如下 (1)所需组织石膏阳模的制作 ①取实验用动物组织； ②按粉、水比例10克粉20-25ml水先后将齿科藻酸盐印模材和蒸馏水加入皮碗内，用调刀做“8”字形调和40s ;将搅拌均匀的混合膏料置于塑料器皿中，将动物组织放置于塑料器皿中央，轻压使之陷入藻酸盐中，使藻酸盐与整个动物组织顶端齐平或略高出组织顶端；室温下待藻酸盐印模材凝固后取出易碎组织，则所需组织的藻酸盐阴模制作完成； ③按水、粉比例20-25ml水100克先后将蒸馏水和超硬石膏加入皮碗内，用调刀调拌不超过50秒，将其置于制作完好的藻酸盐阴模内，分布均匀；使石膏平面稍高于藻酸盐平面以方便取出，待石膏凝固后取出即所需组织石膏阳模完成； ④在制作完成的组织石膏模型上滴上薄薄一层蜡油； (2)实验用动物易碎组织快速稳定取材装置制作 ①根据具体实验目的选择溶液与琼脂糖粉配制浓度合适的凝胶； ②将现配的稍冷却后的琼脂糖胶先倒部分于塑料器皿中，凝胶高度为O.45-0. 55cm ；待其凝固后，将剩下的凝胶微波炉加热恢复液态再稍冷却后倾倒于已凝固的一层胶上，再将制备好的组织石膏阳模放置于其中并被胶所没过，室温待其凝固或置于4°C冰箱速凝，取出石膏阳模并完好保存，反复使用。
2.根据权利要求I所述的方法，其特征在于WesternBlot实验，所述溶液为PBS缓冲液，对于RT-PCR实验所述溶液为DEPC水。
全文摘要
本发明涉及一种实验用动物易碎组织快速稳定取材方法。由矩形塑料器皿和实验用动物易碎组织琼脂糖凝胶阴模构成，具体为塑料容器中有一琼脂糖凝胶形成的阴模，可固定实验动物脑等易碎组织。塑料容器的大小和高度可根据实验所取的组织大小而选择。透明的琼脂糖凝胶方便各方向观察所取组织结构。动物易碎组织快速稳定取材装置可4℃预冷，放置在冰上操作，防止组织中蛋白或RNA降解。该装置能方便完整切下所取组织，且琼脂糖凝胶硬度可根据实验取材需要调整。实验用动物易碎组织的石膏阳模可反复使用。可根据具体实验目的用不同的溶液配比琼脂糖凝胶，如含有蛋白酶抑制剂的PBS缓冲液、对核酶有抑制作用的DEPC水等。本发明操作简便，易于掌握，成本低廉，实验中一次性使用。
文档编号G01N1/04GK102798540SQ20121025173
公开日2012年11月28日 申请日期2012年7月20日 优先权日2012年7月20日
发明者耿莹, 韩雯斐, 苏俭生 申请人:同济大学