专利名称：凝血系统分析方法和凝血系统分析设备的制作方法
凝血系统分析方法和凝血系统分析设备
背景技术：
本技术涉及凝血系统分析方法(bloodcoagulation system analyzing methods)和凝血系统分析设备(blood coagulation system analyzing devices)。特别地，本发明涉及基于凝血过程中测量的复介电常数谱(complex permittivity spectrum)来获取涉及血凝固性(blood coagulability)的信息的凝血系统分析方法。具有血栓形成风险的患者或健康人被预防性地给予抗血小板聚集药物(anti-platelet aggregation drug)或抗凝血剂(anticoagulant)。具有血栓形成风险的患者的例子包括患有糖尿病、动脉硬化、癌症、心脏病和呼吸疾病的患者，手术期间的患者，和正在采用免疫抑制剂的患者。具有血栓形成风险的健康人的例子包括孕妇和老年人。乙酰水杨酸等等被用作抗血小板聚集药物。华法林、肝素、活化的凝血因子X(Xa因子)抑制 剂等等被用作抗凝血剂。在针对血栓形成的抗血小板聚集药物或抗凝血剂的预防性施用中，存在过多的剂量提高出血风险的副作用。为了获得足够的预防效果又防止该副作用，必须进行下述药物施用，其中随时评估药物接受者的血凝固性，并且适当地选择和设定药物与剂量。作为血凝固性测试存在多种方法，例如凝血酶原时间-国际标准化比例(prothrombin time-international normalized ratio, PT-INR)和活化的部分促凝血酶原激酶时间(activated partial thromboplastin time, APTT)。作为血小板聚集性(aggregability)测试存在下述方法,其中向通过血的离心获得的富含血小板的血衆(PRP)中添加诱导血小板聚集的物质，并测量与聚集相关联的透光率或吸光度的改变，从而测定聚集性是否良好。就本发明的技术而言，日本专利特许公开号2010_181400(Japanese PatentLaid-open No. 2010-181400，下文称作专利文献I)公开了从血的介电常数获得与凝血相关的信息的技术，并且描述了“一种凝血系统分析设备，其具有电极对、以预定的时间间隔对所述电极对应用交流电压的应用部分(applying section)、测量置于所述电极对之间的血的介电常数的测量部分、和在抗凝血剂对血的影响被释放后通过使用以所述时间间隔测量的血的介电常数来分析凝血系统活动程度的分析部分”。在所述凝血系统分析设备中，可以基于粘弹性动力学方面凝血起始时间之前介电常数的时间改变来分析凝血系统的早期活动。

发明内容
在相关领域的血凝固性测试例如PT-INR和APTT中，基本上仅可评价与过量施用抗凝血剂造成的血低凝固性(hypocoagulability)相关的出血风险,而与血高凝固性(hypercoagulability)相关的血栓风险无法被评价。另外，在使用PRP的现有血小板聚集性测试中，离心程序(procedure)是必要的。另外，由于所述程序中的血小板的活化，不能获得精确的测试结果，并且所述操作也是麻烦的。需要本发明的技术来提供下述凝血系统分析方法，所述方法能够容易地通过使用全血来评价血高凝固性和低凝固性二者。根据本发明的技术的一个实施方案，提供了下述凝血系统分析方法，所述方法包括以对血添加使血小板活化或失活的物质而导致的凝血过程中测量的复介电常数谱中产生的改变为基础，来获得与血凝固性相关的信息。在所述凝血系统分析方法中，如果使用血小板活化物质作为所述物质，则可以基于与所述物质导致的血小板活化相关联的复介电常数谱中产生的改变，来获得与失活状态下血中包括的血小板的聚集性相关的信息。另外，如果使用血小板失活物质作为所述物质，则可以基于与所述物质导致的血小板失活相关的复介电常数谱中产生的改变，来获得与失活状态下血中包括的血小板的聚 集性相关的信息。该凝血系统分析方法被有利地用于在施用了抗血小板聚集药物和/或抗凝血剂(例如乙酰水杨酸、华法林、肝素和活化的凝血因子X抑制剂)的受试者中评价药效。根据本发明技术的另一实施方案，提供了下述凝血系统分析设备，所述设备包括被配置为基于下述差异测定血凝固性的分析部分(section)，所述差异是在添加了使血小板活化或失活的物质的血的凝固过程中测量的复介电常数谱与不添加所述物质的血的凝固过程中测量的复介电常数谱之间的差异。在本发明技术的实施方案中，术语“复介电常数”还包括与复介电常数相当的电量(electrical quantity)。与复介电常数相当的电量的例子包括复阻抗、复导纳、复电容和复电导。可以通过简单的电量转换将它们彼此转换。另外，“复介电常数”的测量还包括仅测量实部(real part)或仅测量虚部(imaginary part)。本发明技术的实施方案提供了能够通过使用全血容易地评价血高凝固性和低凝固性的凝血系统分析方法。附图概述图I是用于解释复介电常数谱的测量实例的绘图代替图(drawing-substitutegraph)(三维)；图2是用于解释复介电常数谱的测量实例的绘图代替图(二维)；图3是用于解释添加血小板活化剂时复介电常数谱的改变实例的绘图代替图；图4是用于解释(当与凝血过程相关联的峰显著时)从复介电常数谱提取的特征实例的绘图代替图；图5是用于解释(当与凝血过程相关联的峰不显著时)从复介电常数谱提取的特征实例的绘图代替图；图6是用于解释添加血小板失活剂时复介电常数谱的改变实例的绘图代替图；图7是用于解释根据本发明技术的一个实施方案的凝血系统分析设备的示意构造(schematic configuration)的不意图；图8是显示未添加ADP(二磷酸腺苷)的健康人样品血的电介质应答结果(测试例I)的绘图代替图；图9是显示添加了 ADP的健康人样品血的电介质应答结果(测试例I)的绘图代替图；图10是由于添加了 ADP导致的健康人血样品的复介电常数谱(频率10. 7MHz)中产生的改变(测试例I)的绘图代替图；图11是显示由于添加ADP导致的血小板减少症患者样品血的复介电常数谱(频率10. 7MHz)中产生的改变(测试例I)的绘图代替图；图12是显示通过流变仪测量的添加和未添加ADP的健康人样品血的粘弹性改变(测试例I)的绘图代替图；和图13是显示通过流变仪测量的添加和未添加ADP的血小板较差血(plateletpoor blood)的粘弹性改变(测试例I)的绘图代替图。优选的实施方案的详述下文将参照


用于进行本发明技术的一个优选的实施方案。下文所述的实施方案显示了本发明技术的代表性实施方案的一个例子，并且本发明技术的范围不因所述例子而被狭义地解释。说明的顺序如下。I.凝血系统分析方法(I)测量程序(2)分析程序(2-1)使用血小板活化剂的情况(2-2)使用血小板失活剂的情况2.凝血系统分析设备(I)设备的整体构造(2)分析部分I.凝血系统分析方法(I)测量程序在测量程序中，作为分析受试者的血(下文中称作“样品血”)被保持在容器中，所述容器包含对血应用电压的电极，并且对所述电极应用交流电，以测量样品血的复介电常数。在本程序中，关于样品血的测量在其中添加使血小板活化或失活的物质的条件下，和在其中不添加所述物质的条件下进行。作为使血小板活化的物质(下文称作“血小板活化剂”)，可以使用二磷酸腺苷(ADP)、胶原、花生四烯酸、肾上腺素(印in印hrine)、瑞斯托菌素、血栓素A2 (TXA2)、肾上腺素(adrenaline)等等。作为使血小板失活的物质(下文称作“血小板失活剂”)，可以使用乙酰水杨酸、GPIIb/IIIa抑制剂、磷酸二酯酶抑制剂、噻吩并吡啶衍生物、前列腺素配制物等等。下文中，血小板活化剂和血小板失活剂将被总称为“血小板活化剂等等”。测量结果可作为下述坐标上的三维复介电常数谱获得，所述坐标的各个坐标轴表示频率、时间和介电常数(图I)，或作为下述坐标上的二维复介电常数谱获得，所述坐标的各个坐标轴表示选自频率、时间和介电常数中的二者(图2)。图中的Z轴表示每个时间和每个频率处的复介电常数的实部。图2对应于通过在760kHz处切割图I中所示三维谱获得的二维谱。图2中的符号(A)展示了与血红细胞的钱串形成(rouleaux formation)相关联的峰，(B)展示了与凝血过程相关联的峰。本发明人在上文所述的专利文献I中明确了 血介电常数的时间改变反映了血的凝固过程。因此，通过本程序获得的复介电常数谱发挥指数的作用，其定量地指示血的凝固性，并且与血凝固性相关的信息例如凝固时间、凝固速率和凝固强度可基于复介电常数谱的改变而获得。在一些情况下，在本程序之前进行样品血的收集程序。在收集程序中，根据常见方法从作为凝血系统分析受试者而被测试的人中收集血。(2)分析程序在分析程序中，以测量程序中测量的样品血的复介电常数谱为基础，获得与样品血的凝固性相关的信息。特别地，首先将关于添加了血小板活化剂等等的样品血所测量的复介电常数谱与关于未添加的样品血所测量的复介电常数谱进行比较。然后，以添加血小板活化剂等等导致产生的复介电常数谱中的改变为基础，获得与样品血凝固性相关的信肩、O 关于未添加血小板活化剂等等的样品血所测量的复介电常数谱会广泛地反映涉及多个因素的血凝固性。特别地，复介电常数谱广泛地反映以血小板聚集性为基础的凝血，以血浆和血细胞组分的凝固效应为基础的凝血，和测量中可能发生的血沉的影响导致的凝血。在根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法中，可通过使用血小板活化剂等等，将与血小板的聚集性相关的信息特别地挑出并从这些因素中获得。在下文中将关于使用血小板活化剂的情况和使用血小板失活剂的情况单独地说明分析程序。(2-1)使用血小板活化剂的情况如果对血添加血小板活化剂，则凝血反应由于血小板的活化而加速，并且凝血时间缩短。因此，在添加血小板活化剂的血的复介电常数谱中，与未添加血小板活化剂的血的复介电常数谱相比，到达与凝血相关联的谱峰P出现的时间(凝血时间)t被缩短(见图3)。在所述图中，符号Pc^Ptci分别指出不添加血小板活化剂时的谱峰和凝血时间。符号P1和h分别指示添加血小板活化剂时的谱峰和凝血时间。因此，根据所述凝血时间t的缩短宽度At UtTt1)，可以获得关于失活状态下样品血中包括的血小板的聚集性程度的信息。特别地，如果样品血中包括的失活血小板的聚集性高,则在血小板被血小板活化剂活化的样品血中，凝血反应被大幅加速,并且凝血时间也被大幅缩短。如果样品血中包括的失活血小板的凝聚性低，则凝血反应的反应速率很难改变，即使在血小板被血小板活化剂活化时也是如此，因此也未发现凝血时间的缩短。如果提前使用已知具有正常凝固性的血设定作为基础(参照值)的凝血时间的缩短宽度Ats，则可根据样品血凝血时间的缩短宽度At是大于还是小于Ats(参照值)来测定血小板的聚集性是否良好。特别地，如果样品血的凝血时间的缩短宽度At比Ats(参照值)更大，则可以评价血小板的聚集性较高。相反，如果缩短宽度At比Ats更小，则可以评价血小板的聚集性较低。在患有血小板功能障碍或血小板减少症的患者和采用抗血小板聚集药物如乙酰水杨酸或抗凝血剂如华法林、肝素或活化的凝血因子X(Xa因子)抑制剂的人中，血小板的聚集性(止血能力)被降低，出血风险提高。因此，对这些患者等等而言，必须进行疾病管理和药物管理，及时地评价血小板的聚集性。在根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法中，可以如上文所述，以添加血小板活化剂所造成的复介电常数谱的改变(特别地，凝血时间的缩短宽度At)为基础，容易地评价血小板的聚集性。因此，根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法可用于评价患有血小板功能障碍或血小板减少症的患者的血小板功能。另外，如果通过使用根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法来评价采用抗血小板聚集药物或抗凝血剂的人的血小板功能，则还允许进行药效评价，例如理解过量给药造成的凝固性的过量降低，剂量不足造成的易凝状态(hypercoagulable state)的持续等等。在上述方法中，作为复介电常数谱中的改变，使用到达与凝血相关联的谱峰P出现的时间(凝血时间)t的改变作为指数用于分析。另外，以添加血小板活化剂造成的凝血时间t缩短的宽度At为基础评价血小板的聚集性。在根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法中，用作分析指数的复介电常数谱的改变不受具体的限制，只要其为从复介电常数谱中提取的特征的改变即可。所述特征的特定例子在下文中展示。以关于这些特征的改变提前设定的参照值和添加血小板活化剂造成的从样品血复介电常数谱中提取的特征中产生的改变的宽度为基础，能够测定血小板的聚集性是否良好。所述特征的特定例子包括在表示复介电常数谱的曲线上绘制的外推线(extrapolated line)(图4和图5中符号L1到L4)，外推线交线(intersections)的坐标 (符号M1到M4),外推线的斜率，在表示复介电常数谱的曲线上绘制的切线的斜率(介电常数的衍生值(derivative value)),给出预定介电常数E (例如最大值、局部最大值、中间值)的时间T及其组合。所述特征的特定例子还包括通过分析图像模式的三维复介电常数谱获得的特征，通过使用能够改装图像模式的函数表达式的参数拟合获得的特征，和通过使用谱数据中大量数据的簇分析获得的特征。(2-2)使用血小板失活剂的情况如果对血添加血小板失活剂，则血中包含的活化的血小板导致的凝血效应被阻抑，使得凝固反应速率降低，并且凝血时间延长。因此，在添加了血小板失活剂的血的复介电常数谱中，与未添加血小板失活剂的血的复介电常数谱相比，到达与凝血相关的谱峰P出现的时间(凝血时间)t被延迟(见图6)。在所述图中，符号Ptl和h分别指出未添加血小板失活剂时的谱峰和凝血时间。符号P2和t2分别指示添加了血小板失活剂时的谱峰和凝血时间。因此，根据该凝血时间t的延迟宽度Λ t (t2-t0)，能够获得关于活性状态的样品血中包含的血小板的聚集性程度的信息。特别地，如果添加血小板失活剂造成凝血时间被大幅延迟，则可以认为样品血中的血小板的聚集性较高，并且样品血中包含大量活化的血小板。如果凝血时间几乎不改变，甚至在添加血小板失活剂时也是如此，则可以认为样品血中的血小板的聚集性较低，并且样品血中几乎不包含活化的血小板。如果通过使用已知具有正常凝固性的血提前设定作为基础(参照值)的凝血时间的延迟宽度Ats，则可以根据样品血的凝血时间的延迟宽度At是大于还是小于Ats(参照值)来测定血小板的聚集性是否良好。特别地，如果样品血的凝血时间的延迟宽度At比Ats(参照值)更大，则可以评价血小板的聚集性较高。相反，如果延迟宽度At比Ats更小，则可以评价血小板的聚集性较低。在根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法中，通过这种方式，能够以添加血小板失活剂造成的复介电常数谱中的改变(特别地，凝血时间的延迟宽度At)为基础，来容易地评价血小板的聚集性。因此，根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法可用于评价患有糖尿病的患者和具有血栓形成风险的健康人(例如孕妇)的血小板功能，并研究有多少本来不应被活化的血小板被活化。在根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法中，用作分析指数的复介电常数谱中的改变可以是任何改变，只要其为从复介电常数谱中提取的特征的改变即可，并且不限于如上文所述的凝血时间的延迟宽度。2.凝血系统分析设备(I)设备的整体构造图7展示了根据本发明的一个实施方案的凝血系统分析设备的示意构造。凝血系统分析设备包括用于保持血的样品药筒2，对样品药筒2中保持的样品应用电压的电极11和12的对，对电极11和12应用AC电压的电源3，和用于测量血的介电常数的测量部分41。测量部分41配置有信号处理部分4与分析部分42，它们一起接收来自测量部分41的测量结果输出，并测定血的凝固性。在样品药筒2中，可以提供用于对所保持的血添加血小板活化剂的药物引入口。提前与血小板活化剂等等混合后，可将血置于样品药筒2中。电源3从(作为起始时间的)接收到开始测量的命令时或电源被开启时应用电压。特定地，电源3以设定的测量间隔对电极11和12应用具有预定频率的AC电压。测量部分41从(作为起始时间的)接收到开始测量的命令时或电源被开启时测量复介电常数、其频散(frequency dispersion)等等。特别地,例如如果测量介电常数,贝U测量部分41以预定的循环测量电极11和12之间的电流或阻抗，并从测量值推导出介电常数。对于介电常数的推导而言，使用显示电流或阻抗和介电常数之间关系的已知函数和关系表达式。以测量间隔，从测量部分41对分析部分42给予指出推导的介电常数的数据(下文也称作“介电常数数据”)。分析部分42相应从测量部分41给予的介电常数，开始测定血凝固性等等。分析部分42报告凝固性等等的结果和介电常数数据之一或二者。所述报告例如通过将信息转化成图并在监视器上展示或在预定的介质上打印来进行。(2)分析部分下文将说明分析部分42对血凝固性的测定步骤的一个特定例子。分析部分42以来自测量部分41的介电常数数据输出为基础，执行关于添加了血小板活化剂等等的样品血而测量的复介电常数谱与关于未添加的样品血测量的复介电常数谱之间比较的处理。另外，分析部分42以谱模式中的差异为基础，测定样品血的凝固性。首先，分析部分42在关于添加了血小板活化剂等等的样品血所测量的复介电常数谱与关于未添加的样品血所测量的复介电常数谱之间进行比较。谱模式的比较可以基于从作为比较受试者的复介电常数谱提取的特征来进行，并可从所述特征中的差异检测谱模式中的差异。使用例如到达与凝血相关的谱峰出现的时间(凝血时间)作为所述特征。在这种情况下，分析部分42根据添加了血小板活化剂等等的样品血的凝血时间的缩短宽度(或延迟宽度)At比参照值(Ats)更大还是更小来测定血小板的聚集性是否良好。特别地，如果添加了血小板活化剂的样品血的凝血时间的缩短宽度At比参照值(Ats)更大，则分析部分42测定血小板的聚集性较高。相反，如果缩短宽度At比参照值(Ats)更小，则分析部分42测定血小板的聚集性较低。或者，如果添加了血小板失活剂的样品血的凝血时间的延迟宽度At比参照值(Ats)更大，则分析部分42测定血小板的聚集性较高。相反，如果延迟宽度At比参照值(Ats)更小，则分析部分42测定血小板的聚集性较低。[高凝固性(hypercogulability)]如果未添加血小板活化剂等等的样品血的凝血时间t比参照值(ts)更短，则分析部分42测定血凝固性较高并且报告所述结果。所述结果可以在监视器上或预定的介质上展示为血栓形成的风险。在这种情况下，如果添加了血小板活化剂的样品血的凝血时间的缩短宽度At比Δ ts (参照值)更大，则分析部分42测定血小板的聚集性较高，并且测定血高凝固性归因于血小板聚集性的异常增强。该测定结果可在监视器上或预定的介质上展示为血小板功能异常造成的血栓形成风险。另一方面，如果添加了血小板活化剂的样品血的凝血时间的缩短宽度At比 Δ ts (参照值)更小，则分析部分42测定血小板的聚集性较低，并且测定血高凝固性不依赖于血小板功能而发生。所述测定结果可在监视器上或预定的介质上展示为除血小板功能之外的因素异常造成的血栓形成风险。[低凝固性]同时，如果添加了血小板活化剂的样品血的凝血时间t比参照值(ts)更长，则分析部分42血凝固性较低并报告所述结果。所述结果可以在监视器上或预定的介质上展示为出血倾向。在这种情况下，如果添加了血小板活化剂的样品血的凝血时间的缩短宽度At比Δ ts (参照值)更小，则分析部分42测定血小板的聚集性较低，并且测定血低凝固性归因于血小板聚集性的异常降低。该测定结果可在监视器上或预定的介质上展示为血小板功能异常造成的出血倾向的风险。另一方面，如果添加了血小板活化剂的样品血的凝血时间的缩短宽度At比Δ ts (参照值)更大，则分析部分42测定血小板的聚集性较高，并且测定血低凝固性不依赖于血小板功能而发生。所述测定结果可在监视器上或预定的介质上展示为除血小板功能之外的因素异常造成的出血倾向的风险。在上述实例中，关于添加了血小板活化剂的样品血所测量的复介电常数谱与关于未添加的样品血所测量的复介电常数谱之间谱模式的比较以到达与凝血相关联的谱峰出现的时间(凝血时间)为基础。谱模式比较的特征不受具体限制，只要其为从复介电常数谱中提取的特征的改变即可。所述特征的特定实例在下文中展示。分析部分42以关于这些特征的改变宽度提前设定的参照值和添加血小板活化剂等等造成的从样品血复介电常数谱中提取的特征中产生的改变的宽度为基础，测定样品血的凝固性。所述特征的特定例子包括在表示复介电常数谱的曲线上绘制的外推线(图4和图5中符号L1到L4)，外推线交线的坐标(符号M1到M4)，外推线的斜率，在表示复介电常数谱的曲线上绘制的切线的斜率(介电常数的衍生值)，给出预定介电常数E(例如最大值、局部最大值、中间值)的时间T及其组合。所述特征的特定例子还包括通过分析图像模式的三维复介电常数谱获得的特征，通过使用能够改装图像模式的函数表达式的参数拟合获得的特征，和通过使用谱数据中大量数据的簇分析获得的特征。
如上文所述，根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析设备测定是否存在血高凝固性和低凝固性，并且还测定它们是否归因于血小板功能的异常。因此，提示血栓形成风险时，通过根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析设备获得用于决定是否进行抗血小板治疗或进行抗凝血治疗的重要信息。工作实施例<测试实施例1>I.使用血小板活化剂的凝血系统分析方法通过使用健康人和患有血小板减少症的患者的样品血，研究添加血小板活化剂对血凝固性的影响。
(I)材料和方法(1-1)血收集和样品制备通过使用用作为抗凝血剂的柠檬酸钠处理的真空血液收集管，收集来自健康人和患有血小板减少症(I μ L血中血小板的数量为I. 2 X IO4)的患者的血作为全血样品。另外，从全血样品中分离血细胞和血小板，以制备贫血小板血浆(platelet poorplasma)。在500G和5分钟的条件下对样品血离心，从而将其分离成血细胞和富血小板血浆(PRP)。在2000G和30分钟的条件下对血浆离心并引起血小板的沉降，从而获得贫血小板血浆(PPP)。(1-2)电介质测量接着，对温度保持在37 °C的样品血添加O. 25M氯化钙水溶液(每ImL血85 μ L)，并开始凝血反应。添加血小板活化剂(ADP)，使其被混合在氯化钙水溶液中(每ImL血10 μ Μ)。凝血反应开始后立即在以下条件下通过使用阻抗分析仪(Agilent Corporation,4294A)进行60分钟的测量温度为370C ;频率范围为40Hz到IlOMHz ;测量时间间隔为I分钟。(1-3)通过流变仪测量通过使用自由阻尼振荡型(free damped oscillation type)的流变仪进行测量。通过观察粘弹性中的改变并与电介质测量的结果比较，获得凝固时间。(2)结果图8展示了未添加ADP的健康人的样品血的电介质应答结果。图9展示了添加了ADP的健康人的样品血的电介质应答结果。在图中的Z轴上展示了每个时间和每个频率下复介电常数的实部，从而通过除以零时间(测量开始后即刻)和每个频率下复介电常数的实部而被标准化。在图8和图9之间进行比较时，显示ADP的添加造成电介质应答的三维模式明显改变。图10展示了 10. 7MHz的频率下复介电常数的时间改变。符号㈠指出未添加ADP的样品血的电介质应答,符号(+)指出添加了 ADP的样品血的电介质应答。显示添加ADP时，与不添加ADP的情况相比，与凝血对应的介电常数中的阶梯状(step-like)改变朝向更短时间侧偏移。在多个健康人中共同观察到ADP添加造成的此类凝固时间的缩短。添加ADP时凝固时间的均值为17分钟，不添加时凝固时间的均值为31分钟。图11展示了在10. 7MHz的频率下，患有血小板减少症的患者样品血的复介电常数的时间改变。符号㈠指出未添加ADP的样品血的电介质应答，符号⑴指出添加了 ADP的样品血的电介质应答。尽管发现了 ADP的添加造成的凝固时间的缩短，但是凝固时间为38分钟。因此，显示所述时间比健康人的凝固时间均值(17分钟)明显更长。这会是因为样品血中的血小板数量较小，因此ADP对凝血反应的促进受到了限制。图12和图13展示了使用流变仪的互补性实验的结果。图12展示了添加⑴和未添加(_)ADP的健康人样品血粘弹性的时间改变。图13展示了对通过对分离的贫血小板血浆(PPP)添加洁净的红细胞获得的贫血小板血添加ADP时(+)和不添加时(-)粘弹性的时间改变。在使用健康人样品血的实验中，使用电介质测量的结果发现ADP添加造成的凝固时间的缩短。相反，在使用贫血小板血的实验中，未观察到ADP添加造成的凝固时间的改变。上述本发明测试实施例的结果揭示，以添加血小板活化剂导致产生的复介电常数谱中的改变为基础，能够容易地评价样品血中血小板的聚集性。通过根据本发明技术的实施方案的凝血系统分析方法，能够测定是否存在血高凝固性和低凝固性，还能够测定它们是否与血小板的聚集性相关。所述方法可用于评价患有糖尿病、动脉硬化、癌症、心脏病、呼吸疾病等等的患者，手术期间的患者，正在采用免疫抑制剂的患者，孕妇，老年人等等的血栓风险。另外，在针对这些患者和健康人的抗血小板聚集药物或抗凝血剂的预防给药中，所述方法也可被用于评价由于过量施用造成的出血倾向的风险。本申请含有与2011年3月7日在日本专利局递交的日本优先权专利申请JP2011-058810中公开的相关的主题，所述专利申请的整体内容通过引用并入本文。本领域技术人员应当理解，根据设计需要和其他因素可以发生多种修饰、组合、亚组合和改变，只要它们在附带的权利要求书或其等同物的范围内即可。权利要求
1.一种凝血系统分析方法，所述方法包括 以对血添加使血小板活化的物质而导致的凝血过程中测量的复介电常数谱中产生的改变为基础，获得与血凝固性相关的信息。
2.根据权利要求I所述的凝血系统分析方法，其中 以与所述物质对血小板的活化相关联的复介电常数谱中产生的改变为基础，获得与失活状态下血中包括的血小板的聚集性相关的信息。
3.根据权利要求2所述的凝血系统分析方法，其中 所述血收集自施用了抗血小板聚集药物的受试者，和 基于所述改变来评价所述抗血小板聚集药物的药效。
4.根据权利要求3所述的凝血系统分析方法，其中 所述抗血小板聚集药物是乙酰水杨酸。
5.根据权利要求2所述的凝血系统分析方法，其中 所述血收集自施用了抗凝血剂的受试者，和 基于所述改变来评价所述抗凝血剂的药效。
6.根据权利要求5所述的凝血系统分析方法，其中 所述抗凝血剂选自华法林、肝素和活化的凝血因子X抑制剂。
7.根据权利要求2所述的凝血系统分析方法，其中 所述血从施用了抗血小板聚集药物和抗凝血剂的受试者中收集，和 基于所述改变评价所述抗血小板聚集药物和抗凝血剂的药效。
8.根据权利要求7所述的凝血系统分析方法，其中 所述抗血小板聚集药物是乙酰水杨酸，所述抗凝血剂选自华法林、肝素和活化的凝血因子X抑制剂。
9.凝血系统分析方法，所述方法包括 以对血添加使血小板失活的物质而导致的凝血过程中测量的复介电常数谱中产生的改变为基础，获得与血凝固性相关的信息。
10.根据权利要求9所述的凝血系统分析方法，其中 以与所述物质对血小板的失活相关联的复介电常数谱中产生的改变为基础，获得与活化状态下血中包括的血小板的聚集性相关的信息。
11.凝血系统分析设备，所述设备包括 被配置为基于下述差异测定血凝固性的分析部分，所述差异是在添加了使血小板活化的物质的血的凝固过程中测量的复介电常数谱与不添加所述物质的血的凝固过程中测量的复介电常数谱之间的差异。
12.凝血系统分析设备，所述设备包括 被配置为基于下述差异测定血凝固性的分析部分，所述差异是在添加了使血小板失活的物质的血的凝固过程中测量的复介电常数谱与不添加所述物质的血的凝固过程中测量的复介电常数谱之间的差异。
全文摘要
本发明提供了一种凝血系统分析方法和凝血系统分析设备，所述凝血系统分析方法包括以对血添加使血小板活化或失活的物质而导致的凝血过程中测量的复介电常数谱中产生的改变为基础，获得与血凝固性相关的信息。
文档编号G01N27/00GK102680523SQ20121006569
公开日2012年9月19日 申请日期2012年3月9日 优先权日2011年3月17日
发明者佐藤一雅, 大森真二, 林义人, 胜本洋一, 马克奥雷尔·布鲁恩 申请人:索尼公司