一种疏风止咳的中药组合物的质量检测方法及其应用的制作方法
【专利摘要】本发明提供了一种疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，通过选择合适的色谱条件，特定选择流动相组成以及梯度洗脱程序，可以同时对该药物组成中的芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸铵、柴胡皂苷B2等有效成分进行鉴别，克服了由于中药药味繁多、化学成分复杂造成的干扰以致不能全面的、清楚的对所述疏风止咳的中药组合物的质量进行检测的缺陷，实现了对所述疏风止咳的中药组合物质量的稳定性和一致性的控制。
【专利说明】一种疏风止咳的中药组合物的质量检测方法及其应用

【技术领域】
[0001] 本发明属于中药制剂的质量检测领域，具体涉及一种疏风止咳的中药组合物的质 量检测方法及其应用。

【背景技术】
[0002] 咳嗽变异性哮喘（Coughvariantasthma,CVA)又称隐匿型哮喘或咳嗽性哮喘，是 一种特殊类型的哮喘，咳嗽是其唯一或主要临床表现，无明显喘息、气促等症状或体征，但 是由于哮喘患者的呼吸道持续存在变态反应性的炎症，支气管上皮肿胀，使得气道内皮下 的刺激感受器兴奋阀值低于正常人，因此有气道高反应性，对各种外界刺激物的感应性增 高，稍有刺激就发生哮喘，并且难以治愈，容易反复发作，如感冒、冷空气、灰尘、油烟等容易 诱发或加重咳嗽。
[0003] 咳嗽变异性哮喘主要临床表现为刺激性干咳，通常咳嗽比较剧烈，夜间咳嗽为其 重要特征。感冒、冷空气、灰尘、油烟等容易诱发或加重咳嗽。
[0004] 咳嗽变异性哮喘虽不会危及生命但是因其长期持续且多在夜间发作或加剧的特 征极大地降低了患者的生活质量，若不进行正确的早期干预治疗，不仅易复发，而且易发展 成典型哮喘。又由于CVA几乎没有任何喘息和呼吸困难症状，故常被漏诊、误诊、误治，许多 患者因长期反复无效的使用抗生素和镇咳药物，导致病情迀延加重。
[0005] 咳嗽变异性哮喘的发病机制目前尚不完全清楚，其发病机制与典型支气管哮喘相 同，其病理机制是由于大量细胞因子、粘附分子、炎性细胞和炎性介质参与气道变应性炎 症的调节。现代医学对本病的治疗，多以支气管扩张剂、吸入激素、白三烯受体调节为主，此 类药物短期疗效尚可，但是停药后咳嗽易复发，且易产生耐药和毒、副作用，患者依从性差， 也不能从根本上使气道慢性炎症得到有效控制，使得气道高反应性下降、咳嗽敏感性降低。 因而探索和寻找更有效的治疗方法和药物一直是该病研宄的一个重点。
[0006] 近年来，经过中医药广泛深入的研宄和临床医师多年的临床实践，证实其不但具 有良好的临床疗效，且弥补了西药临床疗效不佳及副作用较大等不足。但是鉴于中药是一 个由多种成分、多种因素构成的复杂体系，其化学成分的多样性与复杂性是其疗效的物质 基础，该物质基础长久以来处于一种模糊的状态；复方的质量优劣难以以明确的指标进行 评价，然而中药复方的质量不稳定性、不可控性，直接导致了中药复方治疗效果的不稳定、 不可控性。而中药的质量控制方法必须能对起效的全部成分如有机成分、无机成分或络合 物成分进行控制，只有这样，所建立的质量控制体系才能真正达到控制中药质量、保证中药 用药安全有效地目的。因此，建立符合中医药特点的现代质量控制体系，攻克中药质量分析 与评价的难题，改进中药现有质量控制方法已经成为人们积极研宄的课题。


【发明内容】

[0007] 为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种疏风止咳的中药组合物的质量检 测方法及其应用，克服了由于中药药味繁多、化学成分复杂造成的干扰以致不能全面的、清 楚的对所述疏风止咳的中药组合物的质量进行检测的缺陷，提高了所述疏风止咳的中药组 合物质量的稳定性、一致性和可控性。
[0008] 为解决上述技术问题，本发明提供了一种疏风止咳的中药组合物的质量检测方 法，所述疏风止咳的中药组合物的原料药组成为：柴胡6-10重量份、黄芩6-10重量份、荆芥 6-10重量份、防风6-10重量份、蜜款冬花6-10重量份、炒苦杏仁6-9重量份、炒白芍10-15 重量份、乌梅6_10重量份、穿山龙10-15重量份、虎杖10-15重量份、射干6_10重量份、生 甘草3-6重量份；
[0009] 所述中药组合物的质量检测方法包括如下含量检测的步骤：
[0010] A、芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸铵、柴胡皂苷氏的含量检 测：
[0011] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入体积浓度为90-100%的甲 醇溶液10-30ml，超声处理0. 5-1小时，放冷，摇勾，滤过，取续滤液，即得；
[0012] 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷 对照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度为 90-100%的甲醇溶液制成每Iml分别含芍药苷150μg、升麻素苷30μg、虎杖苷130μg、甘 草苷30μg、射干苷25μg、甘草酸按30μg和柴胡阜苷Β225μg的混合溶液，即得；
[0013] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定：色谱柱：以十八烷基硅烷 键合娃胶为填充剂，柱长为l〇cm，内径为4. 6mm，粒径为2. 6μπι;流动相：以乙腈为流动相 Α，以0. 05%磷酸溶液为流动相Β，按照以下程序进行梯度洗脱：0-25min，流动相A:流动相 B的体积比为10% :90% - 10% :90% ;25-26min，流动相A:流动相B的体积比为10% : 90% - 14% :86% ;26-35min，流动相A:流动相B的体积比为 14% :86% - 14% :86% ; 35_36min，流动相A:流动相B的体积比为14% :86%- 34% :66% ;36_54· 5min，流动相A: 流动相B的体积比为34% :66% - 34% :66% ;54. 5-55min，流动相A:流动相B的体积比 为 34% :66%- 10% :90% ;55-60min，流动相A:流动相B的体积比为 10% :90%- 10% : 90% ;控制流动相流速为0. 5-1. 5ml/min;控制柱温为20-40°C;检测波长：240-260nm;
[0014] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算。
[0015] 优选的，所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的质量 检测方法包括如下含量检测步骤：
[0016]Α、芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸铵、柴胡皂苷氏的含量检 测：
[0017] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入甲醇20ml，超声处理 40min，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0018] 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷 对照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度为 100 %的甲醇溶液制成每Iml分别含苟药苷150μg、升麻素苷30μg、虎杖苷130μg、甘草苷 30μg、射干苷25μg、甘草酸铵30μg和柴胡皂苷Β225μg的混合溶液，即得；
[0019] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定：色谱柱：以十八烷基硅烷 键合娃胶为填充剂，柱长为l〇cm，内径为4. 6mm，粒径为2. 6μπι;流动相：以乙腈为流动相 A，以0. 05 %磷酸溶液为流动相B进行梯度洗脱；控制流动相流速为0. 8ml/min;控制柱温 为30°C;检测波长：250nm;
[0020] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算。
[0021 ] 所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的质量检测方法 还包括如下含量测定方法中的至少一种：
[0022] B、黄芩的含量测定：
[0023] 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物0. 5克，精密加入60-80%乙醇溶液 40-60ml，超声处理0. 5-1小时，放冷，用60-80%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取 续滤液，即得；
[0024] 对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加90-100%甲醇溶液制成 每Iml含150μg黄芩苷的溶液，即得；
[0025] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填 充剂；以体积比为18-26% :74-82%的乙腈-0. 05%磷酸溶液为流动相：控制流动相流速为 0. 5-1. 5ml/min;控制柱温为20-40°C;检测波长：270-290nm，理论塔板数按黄芩苷峰计算 不低于2000;
[0026] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-5μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算，即得；或
[0027]C、炒白芍的含量测定：
[0028] 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物1克，精密加入体积浓度为60-80% 乙醇溶液20-30ml，超声处理0. 5-1小时，放冷，用体积浓度为60-80%乙醇溶液补足减失的 重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0029] 对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加体积浓度为90-100%的 甲醇溶液制成每Iml含100μg芍药苷的溶液，即得；
[0030] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填 充剂；以体积比为8-16% :84-92%的乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相；控制流动相流速为 0. 5-1. 5ml/min;控制柱温为20-40°C;检测波长240-260nm;理论塔板数按芍药苷峰计算不 低于2000;
[0031] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算，即得。
[0032] 优选的，所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的质量 检测方法还包括如下含量测定方法中至少一种：
[0033]B、黄芩的含量测定：
[0034] 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物0. 5克，精密加入70%乙醇溶液 50ml，超声处理40min，所述超声的功率为200-300W，频率为30-50kHz，放冷，用70 %乙醇溶 液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0035] 对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含150μg 黄芩苷的溶液，即得；
[0036]色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填 充剂；以体积比为22% :78 %的乙腈-0. 05 %磷酸溶液为流动相：控制流动相流速为lml/min;控制柱温为25°C;检测波长：280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计算不低于2000。
[0037] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-5μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算，即得；或
[0038]C、炒白芍的含量测定：
[0039] 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物1克，精密加入体积浓度为70%乙 醇溶液25ml，超声处理40min，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，放冷，用体积 浓度为70%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；
[0040] 对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加体积浓度为90-100%的 甲醇溶液制成每Iml含100μg芍药苷的溶液，即得；
[0041] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填 充剂；以体积比为12% :88%的乙腈-0. 05%磷酸溶液为流动相；控制流动相流速为Iml/ min;控制柱温为25°C;检测波长250nm;理论塔板数按苟药苷峰计算不低于2000 ;
[0042] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算，即得。
[0043] 所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的质量检测方法 还包括如下至少一种定性鉴别的方法：
[0044] D、乌梅的鉴别：
[0045] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为1-3 :1的乙醚-甲醇 溶液20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，然后加入体积比为1-3:1-3的甲 醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得；
[0046] 对照品溶液的制备：另取乌梅对照药材lg，加体积浓度为90-100%的甲醇溶液 20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，加水10-30ml溶解残渣，随后加体积浓 度为90-100%乙醚溶液振摇提取1-3次，每次10-30ml，合并乙醚液，蒸干，用30?60°C的 石油醚浸泡残渣1-3次，每次10_30ml，浸泡约1-3分钟，倾去石油醚，向所述残渣中加入无 水乙醇l-3ml溶解，即得；
[0047] 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各 1-5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为18-22 :3-7 :6-10 :0. 1-0. 3的环己 烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，然后取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液， 在102-108°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显 相同颜色的斑点；或
[0048]E、炒苦杏仁的鉴别：
[0049] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物2g，研细，加20-40ml的30?60°C水溶解， 冷却，离心，取上清液通过DlOl型大孔吸附树脂柱，所述大孔吸附树脂柱内径为I. 5cm，柱 高为l〇cm，用70-90ml水洗脱，弃去水洗脱液，再用70-90ml体积浓度为10-30%的乙醇溶 液洗脱，弃去乙醇洗脱液，再次用90-1IOml体积浓度为40-60%的乙醇溶液洗脱，收集所述 乙醇洗脱液，减压浓缩，向所得残渣中加体积浓度为90-100%甲醇溶液l-3ml溶解，即得；
[0050] 对照品溶液的制备：另取苦杏仁苷对照品，加体积浓度为90-100%的甲醇溶液制 成每Iml含2mg苦杏仁苷的溶液，即得；
[0051] 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各 1-3μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为18-22 :8-12 :1-5 :1-3的三氯甲 烷-甲醇-冰醋酸-水溶液为展开剂，展开，然后取出，晾干，喷以含有0. 5-1. 0%磷钼酸的 10-20 %的硫酸乙醇溶液，在102-108°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照 品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；或
[0052]F、蜜款冬花的鉴别：
[0053] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为1-3 :1的乙醚-甲醇 溶液20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，然后加入体积比为1-3:1-3的甲 醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得；
[0054] 对照品溶液的制备：取蜜款冬花、款冬花对照药材各2g，加体积浓度为90-100% 的甲醇溶液20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，加水10-30ml溶解残渣，随 后加体积浓度为90-100 %乙醚溶液振摇提取1-3次，每次加入10-30ml，合并所述乙醚液， 蒸干，用30?60°C的石油醚浸泡残渣1-3次，每次加入10-30ml，浸泡约1-3分钟，倾去石 油醚，向所述残渣中加入无水乙醇l_3ml溶解，即得蜜款冬花、款冬花对照品溶液；
[0055] 鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1?5μ1，分别点 于同一娃胶G薄层板上，以体积比为1-5:1的60?90°C的石油醚一丙酮为展开剂，展开二 次，取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液，在102-108°C下加热至斑点显色清晰；供试品色 谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0056] 优选的，所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的质量 检测方法还包括如下至少一种定性鉴别的方法：
[0057]D、乌梅的鉴别：
[0058] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为2 :1的乙醚-甲醇溶 液30ml，超声处理30分钟，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，滤过，蒸干所得 滤液，然后加入体积比为1:1的甲醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得；
[0059] 对照品溶液的制备：另取乌梅对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过， 蒸干所得滤液，加水20ml溶解残渣，随后加乙醚振摇提取2次，每次20ml，合并乙醚液，蒸 干，用30?60°C的石油醚浸泡残渣2次，每次15ml，浸泡约1. 5分钟，倾去石油醚，向所述 残渣中加入无水乙醇2ml溶解，即得；
[0060] 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各 1-5μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 :5 :8 :0. 1的环己烷-三氯甲烷-乙 酸乙酯-甲酸为展开剂展开，然后取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C下加热至斑 点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；或
[0061]E、炒苦杏仁的鉴别：
[0062] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物2g，研细，加30ml的50 °C水溶解，冷却， 离心，取上清液通过DlOl型大孔吸附树脂柱，所述大孔吸附树脂柱内径为I. 5cm，柱高为 10cm，用80ml水洗脱，弃去水洗脱液，再用80ml体积浓度为20 %的乙醇溶液洗脱，弃去乙醇 洗脱液，再次用IOOml体积浓度为50 %的乙醇溶液洗脱，收集所述乙醇洗脱液，减压浓缩， 向所得残渣中加甲醇溶液Iml溶解，即得；
[0063] 对照品溶液的制备：另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每Iml含2mg苦杏仁苷的溶 液，即得；
[0064] 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各 1-3μ1，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 :10 :3 :1的三氯甲烷-甲醇-冰醋 酸-水溶液为展开剂，展开，然后取出，晾干，喷以含有0.8%磷钼酸的15%硫酸乙醇溶液， 在105°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜 色的斑点；或
[0065]F、蜜款冬花的鉴别：
[0066] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为2 :1的乙醚-甲醇溶 液30ml，超声处理30分钟，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，滤过，蒸干所得 滤液，然后加入体积比为1:1的甲醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得；
[0067] 对照品溶液的制备：取蜜款冬花、款冬花对照药材各2g，加甲醇30ml，超声处理30 分钟，滤过，蒸干所得滤液，加水20ml溶解残渣，随后加乙醚振摇提取2次，每次加入20ml， 合并乙醚液，蒸干，用30?60°C的石油醚浸泡残渣2次，每次加入15ml，浸泡约1. 5分钟， 倾去石油醚，向所述残渣中加入无水乙醇2ml溶解，即得蜜款冬花、款冬花对照品溶液；
[0068] 鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1?5μ1，分别点 于同一娃胶G薄层板上，以体积比为3:1的60?90°C的石油醚一丙酮为展开剂，展开二次， 取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与 对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
[0069] 所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的原料药组成 为：柴胡8重量份、黄芩8重量份、荆芥8重量份、防风8重量份、蜜款冬花8重量份、炒苦杏 仁7重量份、炒白芍13重量份、乌梅8重量份、穿山龙13重量份、虎杖13重量份、射干8重 量份、生甘草4重量份；或
[0070] 柴胡6重量份、黄苳10重量份、荆芥6重量份、防风10重量份、蜜款冬花6重量份、 炒苦杏仁9重量份、炒白苟10重量份、乌梅10重量份、穿山龙10重量份、虎杖15重量份、 射干6重量份、生甘草6重量份；或
[0071] 柴胡10重量份、黄苳6重量份、荆芥10重量份、防风6重量份、蜜款冬花10重量 份、炒苦杏仁6重量份、炒白芍15重量份、乌梅6重量份、穿山龙15重量份、虎杖10重量份、 射干10重量份、生甘草3重量份；或
[0072] 柴胡7重量份、黄苳9重量份、荆芥7重量份、防风9重量份、蜜款冬花7重量份、 炒苦杏仁8重量份、炒白芍12重量份、乌梅9重量份、穿山龙12重量份、虎杖14重量份、射 干7重量份、生甘草5重量份；或
[0073] 柴胡9重量份、黄苳7重量份、荆芥9重量份、防风7重量份、蜜款冬花9重量份、 炒苦杏仁7重量份、炒白芍14重量份、乌梅7重量份、穿山龙14重量份、虎杖11重量份、射 干9重量份、生甘草4重量份。
[0074] 所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，还包括制备所述中药组合物的方 法，包括如下步骤：
[0075] (1)按照选定重量份数称取柴胡、黄苳、荆芥、防风、蜜款冬花、炒苦杏仁、炒白芍、 乌梅、穿山龙、虎杖、射干、生甘草，分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细粉，过筛备 用；
[0076] (2)取上述细粉加水提取，合并并过滤所得提取液，将所得滤液减压浓缩获得清 膏；
[0077] (3)将获得的清膏进行干燥，制成干膏粉，然后选择性的加入常规辅料，按照常规 工艺制成临床上可接受的剂型。
[0078] 所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，制备所述中药组合物的方法，包 括如下步骤：
[0079] (1)按照选定重量份数称取柴胡、黄苳、荆芥、防风、蜜款冬花、炒苦杏仁、炒白芍、 乌梅、穿山龙、虎杖、射干、生甘草，分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细粉，过筛备 用；
[0080] ⑵取上述细粉加水煎煮1-3次，每次1-3小时，每次加入8-12倍所述细粉重量的 水，合并并过滤所得煎煮液，将所得滤液减压浓缩至50°C下相对密度为1. 10-1. 15的清膏；
[0081] (3)将获得的清膏进行干燥，制成干膏粉，然后选择性的加入常规辅料，按照常规 工艺制成临床上可接受的剂型。
[0082] 本发明提供一种所述的质量检测方法在中药组合物或药物制剂质量检测领域中 的用途。
[0083] 本发明的上述技术方案相比现有技术具有以下优点：
[0084] (1)本发明所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，通过严格控制高效液 相色谱的条件，选择流动相组成以及梯度洗脱的程序，有力的克服了由于中药药味繁多、化 学成分复杂造成的干扰以致不能全面的、清楚的对所述疏风止咳的中药组合物的质量进行 检测的缺陷，得到以对该药物组成中的芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸 铵、柴胡皂苷B2等有效成分的色谱峰，从而实现了全面的、清楚的对所述疏风止咳的中药组 合物进行质量检测，进一步实现了所述疏风止咳的中药组合物质量的控制，且该质量检测 方法具有简单快速、稳定可靠、精密度高、重现性好、易于掌握的优势；
[0085] (2)本发明所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，通过对供试品溶液或 对照品溶液进行超声处理，特定选择了适于所述疏风止咳的中药组合物的超声功率、频率 以及处理时间，使得获得的供试品溶液或对照品溶液更有利于药物的质量检测，使得检测 得到的色谱更精确、稳定可靠，且该超声处理方法具有方便，时间短，操作简单的优点；
[0086] (3)本发明所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，通过对黄芩和/或白 芍的含量测定，使得对所述疏风止咳的中药组合物的质量检测更全面，更完善的表征了药 物的有效活性组分及其质量，有利于对活性成分的全面监控，保证了所述疏风止咳的中药 组合物质量的稳定性、一致性和可控性，并确保了所述中药组合物的安全性和有效性；
[0087] (4)本发明所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，通过对乌梅和/或苦 杏仁的鉴别，使得对所述疏风止咳的中药组合物的质量检测更全面，更完善的表征了药物 的有效活性组分及其质量，有利于对活性成分的全面监控，进一步保证了所述疏风止咳的 中药组合物质量的稳定性、一致性和可控性，并确保了所述中药组合物的安全性和有效性。

【专利附图】

【附图说明】
[0088] 为了使本发明的内容更容易被清楚的理解，下面根据本发明的具体实施例并结合 附图，对本发明作进一步详细的说明，其中
[0089] 图1是本发明实施例2中对照品的检测色谱图；
[0090] 图2是本发明实施例2中所述疏风止咳的中药组合物的检测色谱图；
[0091] 图3是本发明实施例5中对照品的检测色谱图；
[0092] 图4是本发明实施例5中所述疏风止咳的中药组合物的检测色谱图；
[0093] 图5是本发明实施例5中所述的回归方程的曲线图；
[0094] 图6是本发明实施例8中对照品的检测色谱图；
[0095] 图7是本发明实施例8中所述疏风止咳的中药组合物的检测色谱图；
[0096] 图8是本发明实施例8中所述的回归方程的曲线图；
[0097] 图9是本发明实施例11中所述疏风止咳的中药组合物的薄层色谱图；
[0098] 图10是本发明实施例14中所述疏风止咳的中药组合物的薄层色谱图；
[0099] 图11是本发明实施例17中所述疏风止咳的中药组合物的薄层色谱图。

【具体实施方式】
[0100] 实施例1
[0101] 本实施为所述疏风止咳的中药组合物的制备，具体如下：
[0102] 【处方】柴胡8重量份、黄芩8重量份、荆芥8重量份、防风8重量份、蜜款冬花8重 量份、炒苦杏仁7重量份、炒白芍13重量份、乌梅8重量份、穿山龙13重量份、虎杖13重量 份、射干8重量份、生甘草4重量份。
[0103] 【制备方法】（1)按照选定重量份数称取柴胡、黄芩、荆芥、防风、蜜款冬花、炒苦杏 仁、炒白芍、乌梅、穿山龙、虎杖、射干、生甘草，分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细 粉，过筛备用；
[0104] (2)取上述细粉加水煎煮2次，每次2小时，第一次加入10倍所述细粉重量的水， 第二次加入8倍所述细粉重量的水，合并并过滤所得煎煮液，将所得滤液减压浓缩至50°C 下相对密度为1. 13的清膏；
[0105](3)将获得的清膏进行干燥，制成干膏粉，然后加入甜菊素3g和二氧化硅3g和适 量糊精混合均匀，按照常规工艺制成临床上可接受的颗粒剂。
[0106] 实施例2
[0107] 本实施例对所述中药组合物的芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸 铵、柴胡皂苷B2的含量进行检测。
[0108] 取实施例1制备的所述中药组合物进行质量检测，具体包括如下步骤：
[0109] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入体积浓度为100%的甲醇 溶液20ml，超声处理40min，所述超声的功率为250w，频率为40kHz，放冷，摇匀，滤过，取续 滤液，即得；
[0110] 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷 对照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度为 100 %的甲醇溶液制成每Iml分别含苟药苷150μg、升麻素苷30μg、虎杖苷130μg、甘草苷 30μg、射干苷25μg、甘草酸铵30μg和柴胡皂苷Β225μg的混合溶液，即得；
[0111] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂，柱长为l〇cm，内径为4. 6mm，粒径为2. 6μπι;以乙腈为流动相A，以0. 05%磷酸溶 液为流动相B，按照以下程序进行梯度洗脱：0-25min，流动相A:流动相B的体积比为10%: 90% - 10% :90% ;25-26min，流动相A:流动相B的体积比为 10% :90% - 14% :86% ; 26_35min，流动相A:流动相B的体积比为14% :86%- 14% :86% ;35_36min，流动相A:流 动相B的体积比为14% :86%- 34% :66% ;36-54. 5min，流动相A:流动相B的体积比为 34% :66%-34% :66% ;54.5-55min，流动相A:流动相B的体积比为 34% :66%- 10% : 90% ;55-60min，流动相A:流动相B的体积比为10% :90%- 10% :90% ;控制流动相流速 为0· 8ml/min;控制柱温为30°C;检测波长：250nm;
[0112] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算。所述对照品的谱图见图1所示，所述供试品检测所得到的谱图见图2所示。
[0113] 可见，本实施例所述检测方法可有效将芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干 苷、甘草酸铵、柴胡皂苷B2-次性的定性鉴别。
[0114] 实施例3
[0115] 本实施例对所述中药组合物的芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸 铵、柴胡皂苷B2的含量进行检测。
[0116] 取实施例1制备的所述中药组合物进行质量检测，具体包括如下步骤：
[0117] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入体积浓度为90%的甲醇溶 液30ml，超声处理0. 5小时，所述超声的功率为200w，频率为50kHz，放冷，摇勾，滤过，取续 滤液，即得；
[0118] 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷 对照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度为 90%的甲醇溶液制成每Iml分别含苟药苷150μg、升麻素苷30μg、虎杖苷130μg、甘草苷 30μg、射干苷25μg、甘草酸铵30μg和柴胡皂苷Β225μg的混合溶液，即得；
[0119] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂，柱长为l〇cm，内径为4. 6mm，粒径为2. 6μπι;以乙腈为流动相A，以0. 05%磷酸溶 液为流动相Β，按照以下程序进行梯度洗脱：0-25min，流动相A:流动相B的体积比为10%: 90% - 10% :90% ;25-26min，流动相A:流动相B的体积比为 10% :90% - 14% :86% ; 26_35min，流动相A:流动相B的体积比为14% :86%- 14% :86% ;35_36min，流动相A:流 动相B的体积比为14% :86%- 34% :66% ;36-54. 5min，流动相A:流动相B的体积比为 34% :66%-34% :66% ;54.5-55min，流动相A:流动相B的体积比为 34% :66%- 10% : 90% ;55-60min，流动相A:流动相B的体积比为10% :90%- 10% :90% ;控制流动相流速 为I. 5ml/min;控制柱温为20°C;检测波长：260nm;
[0120] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算。
[0121] 实施例4
[0122] 本实施例对所述中药组合物的芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸 铵、柴胡皂苷B2的含量进行检测。
[0123] 取实施例1制备的所述中药组合物进行质量检测，具体包括如下步骤：
[0124] 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入体积浓度为95%的甲醇溶 液IOml，超声处理1小时，所述超声的功率为300w，频率为30kHz，放冷，摇匀，滤过，取续滤 液，即得；
[0125] 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷 对照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度 为95 %的甲醇溶液制成每Iml分别含苟药苷150μg、升麻素苷30μg、虎杖苷130μg、甘草 苷30μg、射干苷25μg、甘草酸铵30μg和柴胡皂苷Β225μg的混合溶液，即得；
[0126] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶 为填充剂，柱长为l〇cm，内径为4. 6mm，粒径为2. 6μπι;以乙腈为流动相A，以0. 05%磷酸溶 液为流动相Β，按照以下程序进行梯度洗脱：0-25min，流动相A:流动相B的体积比为10%: 90% - 10% :90% ;25-26min，流动相A:流动相B的体积比为 10% :90% - 14% :86% ; 26_35min，流动相A:流动相B的体积比为14% :86%- 14% :86% ;35_36min，流动相A:流 动相B的体积比为14% :86%- 34% :66% ;36-54. 5min，流动相A:流动相B的体积比为 34% :66%-34% :66% ;54.5-55min，流动相A:流动相B的体积比为 34% :66%- 10% : 90% ;55-60min，流动相A:流动相B的体积比为10% :90%- 10% :90% ;控制流动相流速 为0· 5ml/min;控制柱温为40°C;检测波长：240nm;
[0127] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算。
[0128] 实施例5
[0129] 对实施例1制备的所述中药组合物中的黄芩进行含量测定，具体包括如下步骤：
[0130] 供试品溶液的制备：取装量差异项下的所述中药组合物，研细，取约0.5克，精 密称定，精密加入70 %乙醇溶液50ml，超声处理40min，所述超声的功率为250w，频率为 40kHz，放冷，用体积浓度为70 %乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得；以 上述方法制备3个批次的样品的供试溶液进行检测；
[0131] 对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每Iml含150μg 黄芩苷的溶液，即得；
[0132] 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填 充剂；以体积比为22% :78%的乙腈-0. 05 %磷酸溶液为流动相：控制流动相流速为Iml/ min;控制柱温为25°C;检测波长：280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计算不低于2000 ;
[0133] 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-5μ1，注入液相色谱仪，测 定并计算，即得。所述对照品的谱图见图3所示，所述供试品检测所得到的谱图见图4所示。
[0134] 可见，本实施例所述检测方法可有效将黄芩进行一次性的检测，计算并拟合待测 物的回归方程，黄芩苷〇. 01820μg?1. 8202μg范围内进样量与峰面积有呈良好的线性关 系，所述回归方程为Y= 3091x+11.03，R= 0. 9995,所述回归方程的曲线图见图5所示，用 外标一点法计算供试品中黄芩苷的含量即可。计算得到的黄芩苷含量见下表1。
[0135] 表1样品中黄芩苷的含量
[0136]

【权利要求】
1. 一种疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述疏风止咳的中药组 合物的原料药组成为：柴胡6-10重量份、黄芩6-10重量份、荆芥6-10重量份、防风6-10重 量份、蜜款冬花6-10重量份、炒苦杏仁6-9重量份、炒白芍10-15重量份、乌梅6-10重量份、 穿山龙1〇_15重量份、虎杖10-15重量份、射干6_10重量份、生甘草3_6重量份； 所述中药组合物的质量检测方法包括如下含量检测的步骤： A、芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸铵、柴胡皂苷B2的含量检测： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入体积浓度为90-100%的甲醇溶 液10-30ml，超声处理0. 5-1小时，放冷，摇勾，滤过，取续滤液，即得； 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷对 照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度为 90-100%的甲醇溶液制成每lml分别含芍药苷150 y g、升麻素苷30 y g、虎杖苷130 y g、甘 草苷30 y g、射干苷25 y g、甘草酸按30 y g和柴胡阜苷B225 y g的混合溶液，即得； 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为 填充剂；以乙腈为流动相A，以0. 05 %磷酸溶液为流动相B，按照以下程序进行梯度洗脱： 〇-25min，流动相A :流动相B的体积比为10%:90% - 10%:90%;25_26min，流动相A :流动 相B的体积比为10% :90%- 14% :86% ;26-35min，流动相A :流动相B的体积比为14% : 86%- 14% :86% ;35-36min，流动相 A:流动相 B 的体积比为 14% :86%-34% :66% ; 36-54. 5min，流动相A :流动相B的体积比为34% :66%- 34% :66% ;54. 5-55min，流动相 A :流动相B的体积比为34% :66%- 10% :90% ;55-60min，流动相A :流动相B的体积比 为10% :90%- 10% :90% ;控制流动相流速为0. 5-1. 5ml/min ;控制柱温为20-40°C ;检测 波长：240-260nm ; 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10 y 1，注入液相色谱仪，测定并 计算。
2. 根据权利要求1所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所述 中药组合物的质量检测方法包括如下含量检测步骤： A、芍药苷、升麻素苷、虎杖苷、甘草苷、射干苷、甘草酸铵、柴胡皂苷B2的含量检测： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物1克，研细，加入甲醇20ml，超声处理40min，所 述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，放冷，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 对照品溶液的制备：另取芍药苷对照品、升麻素苷对照品、虎杖苷对照品、甘草苷对 照品、射干苷对照品、甘草酸铵对照品、柴胡皂苷B2对照品适量，精密称定，加体积浓度为 100%的甲醇制成每lml分别含苟药苷150 y g、升麻素苷30 y g、虎杖苷130 y g、甘草苷 30 y g、射干苷25 y g、甘草酸铵30 y g和柴胡皂苷B225 y g的混合溶液，即得； 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基硅烷键合硅胶为填 充剂；以乙腈为流动相A，以0. 05 %磷酸溶液为流动相B进行梯度洗脱；控制流动相流速为 0. 8ml/min ;控制柱温为30°C ;检测波长：250nm ; 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2-10 y 1，注入液相色谱仪，测定并 计算。
3. 根据权利要求1或2所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，所 述中药组合物的质量检测方法还包括如下含量测定方法中的至少一种： B、 黄芩的含量测定： 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物〇. 5克，精密加入体积浓度为60-80%乙 醇溶液40-60ml，超声处理0. 5-1小时，放冷，用体积浓度为60-80%乙醇溶液补足减失的重 量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加体积浓度为90-100 %甲醇溶 液制成每lml含150 y g黄芩苷的溶液，即得； 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填充 剂；以体积比为18-26% :74-82%的乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相；控制流动相流速为 0. 5-1. 5ml/min ;控制柱温为20-40°C ;检测波长：270-290nm，理论塔板数按黄芩苷峰计算 不低于2000 ; 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-5 y 1，注入液相色谱仪，测定并 计算，即得；或 C、 炒白芍的含量测定： 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物1克，精密加入体积浓度为60-80%乙醇 溶液20-30ml，超声处理0. 5-1小时，放冷，用体积浓度为60-80%乙醇溶液补足减失的重 量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加体积浓度为90-100 %的甲醇 溶液制成每lml含100 y g芍药苷的溶液，即得； 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填充 剂；以体积比为8-16% :84-92%的乙腈-0.05%磷酸溶液为流动相；控制流动相流速为 0. 5-1. 5ml/min ;控制柱温为20-40°C ;检测波长240-260nm ;理论塔板数按芍药苷峰计算不 低于2000 ; 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3-10 y 1，注入液相色谱仪，测定并 计算，即得。
4.根据权利要求1-3任一所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在 于，所述中药组合物的质量检测方法还包括如下含量测定方法中至少一种： B、 黄芩的含量测定： 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物〇. 5克，精密加入体积浓度为70%乙醇 溶液50ml，超声处理40min，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，放冷，用体积浓 度为70%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 对照品溶液的制备：取黄芩苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含150 y g黄芩 苷的溶液，即得； 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填充剂； 以体积比为22% :78%的乙腈-0. 05%磷酸溶液为流动相：控制流动相流速为lml/min ;控 制柱温为25°C ;检测波长：280nm，理论塔板数按黄芩苷峰计算不低于2000 ; 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1-5 y 1，注入液相色谱仪，测定并 计算，即得；或 C、 炒白芍的含量测定： 供试品溶液的制备：精密称定所述中药组合物1克，精密加入体积浓度为70%乙醇溶 液25ml，超声处理40min，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，放冷，用体积浓度 为70%乙醇溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得； 对照品溶液的制备：取芍药苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含100 y g芍药 苷的溶液，即得； 色谱条件与系统适用性试验：照高效液相色谱法测定，以十八烷基键合硅胶为填充剂； 以体积比为12% :88%的乙腈-0. 05 %磷酸溶液为流动相；控制流动相流速为lml/min ;控 制柱温为25°C ;检测波长250nm ;理论塔板数按芍药苷峰计算不低于2000 ; 测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各3-10 y 1，注入液相色谱仪，测定并 计算，即得。
5.根据权利要求1-4任一所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在 于，所述中药组合物的质量检测方法还包括如下至少一种定性鉴别的方法： D、 乌梅的鉴别： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为1-3 :1的乙醚-甲醇溶 液20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，然后加入体积比为1-3:1-3的甲 醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得； 对照品溶液的制备：另取乌梅对照药材lg，加体积浓度为90-100 %的甲醇溶液 20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，加水10-30ml溶解残渣，随后加体积 浓度为90-100%乙醚溶液振摇提取1-3次，每次加入10-30ml，合并所述乙醚液，蒸干，用 30?60°C的石油醚浸泡残渣1-3次，每次加入10-30ml，浸泡约1-3分钟，倾去石油醚，向所 述残渣中加入无水乙醇l_3ml溶解，即得； 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各1-5 y 1， 分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为18-22 :3-7 :6-10 :0. 1-0. 3的环己烷-三 氯甲烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂展开，然后取出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液，在 102-108°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点；或 E、 炒苦杏仁的鉴别： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物2g，研细，加20-40ml的30?60°C的水溶解，冷 却，离心，取上清液通过D101型大孔吸附树脂柱，所述大孔吸附树脂柱内径为1. 5cm，柱高 为10〇11，用70-901111水洗脱，弃去水洗脱液，再用70-901111体积浓度为10-30%的乙醇溶液 洗脱，弃去乙醇洗脱液，再次用90-110ml体积浓度为40-60%的乙醇溶液洗脱，收集所述乙 醇洗脱液，减压浓缩，向所得残渣中加体积浓度为90-100%甲醇溶液l-3ml溶解，即得； 对照品溶液的制备：另取苦杏仁苷对照品，加体积浓度为90-100%的甲醇溶液制成每 lml含2mg苦杏仁苷的溶液，即得； 鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1-3 yl，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以体积比为18-22 :8-12 :1-5 :1-3的三氯甲烷-甲醇-冰醋酸-水溶 液为展开剂，展开，然后取出，晾干，喷以含有〇. 5-1. 0%磷钼酸的10-20%硫酸乙醇溶液， 在102-108°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相 同颜色的斑点；或 F、 蜜款冬花的鉴别： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为1-3 :1的乙醚-甲醇溶 液20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，然后加入体积比为1-3:1-3的甲 醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得； 对照品溶液的制备：分别取蜜款冬花、款冬花对照药材各2g，加体积浓度为90-100% 的甲醇溶液20-40ml，超声处理10-60分钟，滤过，蒸干所得滤液，加水10-30ml溶解残渣，随 后加体积浓度为90-100 %乙醚溶液振摇提取1-3次，每次加入10-30ml，合并所述乙醚液， 蒸干，用30?60°C的石油醚浸泡残渣1-3次，每次加入10-30ml，浸泡约1-3分钟，倾去石 油醚，向所述残渣中加入无水乙醇l_3ml溶解，即得蜜款冬花、款冬花对照品溶液； 鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1?5 y 1，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以体积比为1-5:1的60?90°C的石油醚一丙酮为展开剂，展开二次，取 出，晾干，喷以8-12%硫酸乙醇溶液，在102-108°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中， 在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
6.根据权利要求1-5任一所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在 于，所述中药组合物的质量检测方法还包括如下至少一种定性鉴别方法： D乌梅的鉴别： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为2 :1的乙醚-甲醇溶液 30ml，超声处理30分钟，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，滤过，蒸干所得滤 液，然后加入体积比为1:1的甲醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得； 对照品溶液的制备：另取乌梅对照药材lg，加甲醇30ml，超声处理30分钟，滤过，蒸干 所得滤液，加水20ml溶解残渣，随后加乙醚振摇提取2次，每次加入20ml，合并乙醚液，蒸 干，用30?60°C的石油醚浸泡残渣2次，每次加入15ml，浸泡约1. 5分钟，倾去石油醚，向 所述残渣中加入无水乙醇2ml溶解，即得； 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述对照品溶液和供试品溶液各1-5 y 1，分 别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 :5 :8 :0. 1的环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲 酸为展开剂展开，然后取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在l〇5°C下加热至斑点显色清 晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；或 E、炒苦杏仁的鉴别： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物2g，研细，加30ml的50°C水溶解，冷却，离心， 取上清液通过D101型大孔吸附树脂柱，所述大孔吸附树脂柱内径为1. 5cm，柱高为10cm，用 80ml水洗脱，弃去水洗脱液，再用80ml体积浓度为20%的乙醇溶液洗脱，弃去20%乙醇洗 脱液，再次用l〇〇ml体积浓度为50 %的乙醇溶液洗脱，收集所述乙醇洗脱液，减压浓缩，向 所得残渣中加甲醇溶液lml溶解，即得； 对照品溶液的制备：另取苦杏仁苷对照品，加甲醇制成每lml含2mg苦杏仁苷的溶液， 即得； 鉴别：照薄层色谱法试验，分别精密吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1-3 y 1，分 别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比为20 :10 :3 :1的三氯甲烷-甲醇-冰醋酸-水溶液 为展开剂，展开，然后取出，晾干，喷以含有0.8%磷钼酸的15%硫酸乙醇溶液，在105°C下 加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点； 或 F、蜜款冬花的鉴别： 供试品溶液的制备：取所述中药组合物3g，研细，加体积比为2 :1的乙醚-甲醇溶液 30ml，超声处理30分钟，所述超声的功率为200-300?，频率为30-50kHz，滤过，蒸干所得滤 液，然后加入体积比为1:1的甲醇-无水乙醇溶液溶解残渣，即得； 对照品溶液的制备：取蜜款冬花、款冬花对照药材各2g，加甲醇30ml，超声处理30分 钟，滤过，蒸干所得滤液，加水20ml溶解残渣，随后加乙醚振摇提取2次，每次加入20ml，合 并乙醚液，蒸干，用30?60°C的石油醚浸泡残渣2次，每次加入15ml，浸泡约1. 5分钟，倾 去石油醚，向所述残渣中加入无水乙醇2ml溶解，即得蜜款冬花、款冬花对照品溶液； 鉴别：照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液和对照品溶液各1?5 y 1，分别点于同 一硅胶G薄层板上，以体积比为3:1的60?90°C的石油醚一丙酮为展开剂，展开二次，取 出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C下加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对 照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。
7. 根据权利要求1-6任一所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在 于，所述中药组合物的原料药组成为：柴胡8重量份、黄芩8重量份、荆芥8重量份、防风8 重量份、蜜款冬花8重量份、炒苦杏仁7重量份、炒白芍13重量份、乌梅8重量份、穿山龙13 重量份、虎杖13重量份、射干8重量份、生甘草4重量份；或 柴胡6重量份、黄苳10重量份、荆芥6重量份、防风10重量份、蜜款冬花6重量份、炒 杏仁9重量份、炒白苟10重量份、乌梅10重量份、穿山龙10重量份、虎杖15重量份、射干 6重量份、生甘草6重量份；或 柴胡10重量份、黄苳6重量份、荆芥10重量份、防风6重量份、蜜款冬花10重量份、炒 苦杏仁6重量份、炒白芍15重量份、乌梅6重量份、穿山龙15重量份、虎杖10重量份、射干 10重量份、生甘草3重量份；或 柴胡7重量份、黄芩9重量份、荆芥7重量份、防风9重量份、蜜款冬花7重量份、炒苦 杏仁8重量份、炒白苟12重量份、乌梅9重量份、穿山龙12重量份、虎杖14重量份、射干7 重量份、生甘草5重量份；或 柴胡9重量份、黄芩7重量份、荆芥9重量份、防风7重量份、蜜款冬花9重量份、炒苦 杏仁7重量份、炒白苟14重量份、乌梅7重量份、穿山龙14重量份、虎杖11重量份、射干9 重量份、生甘草4重量份。
8. 根据权利要求1-7任一所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在 于，还包括制备所述中药组合物的方法，包括如下步骤： (1) 按照选定重量份数称取柴胡、黄芩、荆芥、防风、蜜款冬花、炒苦杏仁、炒白芍、乌梅、 穿山龙、虎杖、射干、生甘草，分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细粉，过筛备用； (2) 取上述细粉加水提取，合并并过滤所得提取液，将所得滤液减压浓缩获得清膏； (3) 将获得的清膏进行干燥，制成干膏粉，然后选择性的加入常规辅料，按照常规工艺 制成临床上可接受的剂型。
9. 根据权利要求8所述的疏风止咳的中药组合物的质量检测方法，其特征在于，制备 所述中药组合物的方法，包括如下步骤： (1)按照选定重量份数称取柴胡、黄芩、荆芥、防风、蜜款冬花、炒苦杏仁、炒白芍、乌梅、 穿山龙、虎杖、射干、生甘草，分别粉碎成细粉后混合或混合后粉碎成细粉，过筛备用； (2) 取上述细粉加水煎煮1-3次，每次1-3小时，每次加入8-12倍所述细粉重量的水， 合并并过滤所得煎煮液，将所得滤液减压浓缩至50°C下相对密度为1. 10-1. 15的清膏； (3) 将获得的清膏进行干燥，制成干膏粉，然后选择性的加入常规辅料，按照常规工艺 制成临床上可接受的剂型。
10.由权利要求1-9任一所述的质量检测方法在中药组合物或中药制剂质量检测领域 中的用途。
【文档编号】G01N30/90GK104483417SQ201410838275
【公开日】2015年4月1日 申请日期:2014年12月29日 优先权日:2014年12月29日
【发明者】武琳, 杨光, 肖婷婷, 彭鹏 申请人:北京中研同仁堂医药研发有限公司