专利名称：快速内毒素检测鲎试剂盒的制作方法
技术领域：
本实用新型公开一种快速内毒素检测鲎试剂盒，按国际专利分类表(IPC)划分属于检测试剂盒类制造技术领域，尤其是涉及一种内毒素检测鲎试剂盒。
背景技术：
细菌内毒素是革兰氏阴性菌细菌壁的主要成分，是革兰氏阴性菌死亡后分解出的一种毒素。注射入人体会引起发热反应。大量内毒素进入血液，可使血管透性改变，局部出血，严重时能导致内毒素性休克。药典规定大输液药品、注射药品等必须检测细菌内毒素含量。从海洋动物鲎的血液提取的鲎试剂会和细菌内毒素发生反应，形成凝胶，是检测细菌内毒素的最佳方法。传统的凝胶法鲎试剂的反应时间为60分钟。在进行鲎试验时，所有和供试品(样品)或鲎试剂直接接触的器械都必须是无热原的。而且某些供试品可能会对鲎试验有干扰，产生假阴性反应，因此在鲎试验的同时进行供试品阳性对照是十分必要的。
发明内容针对现有技术的不足，本实用新型提供了一种快速内毒素检测鲎试剂盒，检测时间不超过30分钟，可用于注射用水、药品、透析用水、医疗器械等的细菌内毒素快速检测。为达到上述目的，本实用新型是通过以下技术方案实现的一种快速内毒素检测鲎试剂盒，包括盒体及其内的一支供试品管、一支供试品阳性对照管、一支无热原采样瓶和至少一支无热原移液管，其中，供试品管，其为管内容置高灵敏度鲎试剂的供试品反应管；供试品阳性对照管，其为管内容置细菌内毒素工作标准品的对照管。进一步，所述的供试品管为装有灵敏度为0. 125EU/ml、0. 06EU/ml或0. 03EU/ml鲎试剂的供试品反应管，且供试品反应管内鲎试剂的装量为0. 2-0. 6ml。进一步，所述的供试品管及供试品阳性对照管均为能直接进行冷冻干燥并能真空封口的鲎试验反应试管。进一步，所述的鲎试验反应试管内直径上下一致，为7-12mm。进一步，所述的无热原移液管为三支一次性塑料移液管，其上带有刻度，刻度标示有0. 25ml及0. 5ml，上述的无热原移液管为细长型，能伸入供试品管底吸取溶液。本实用新型快速检测细菌内毒素水平的检测试剂盒，检测时间不超过30分钟，比传统的内毒素检测鲎试剂的检测时间缩短了 30分钟以上。本试剂盒配套有供试品阳性对照管，其内细菌内毒素工作标准品的效价为试剂盒标示灵敏度的二倍，确保实验的准确性； 配套有鲎试验所必须的无热原移液管和采样瓶，使用简单方便。本实用新型的无热原采样瓶和无热原移液管的细菌内毒素含量小于0. 005EU/ml。本实用新型具有如下有益效果1、反应快速。传统的凝胶法鲎试剂反应时间为1小时。本实用新型采用高灵敏度鲎试剂，如灵敏度为0. 125EU/ml, 0. 06EU/ml或0. 03EU/ml的凝胶法鲎试剂来检测内毒素水平高于0. 25EU/ml的供试品，使反应时间由1小时缩短为12-30分钟；2、配置齐全，结构简单。试剂盒包含包括了供试品管阳性对照管，保证了实验的准确性。试剂盒包含操作所需要的无热原配件，使用者不必自己准备无热原实验材料；3、使用方便。按标示量加供试品溶解鲎试剂成为供试品管，再用无热原移液管取一半体积的鲎试剂和供试品反应溶液溶解细菌内毒素工作标准品成为供试品阳性对照管， 在37° C保温12-30分钟即可。

图1是本实用新型结构示意图；图2是本实用新型一种无热原移液管示意图。
具体实施方式
以下结合附图对本实用新型作进一步说明实施例请参阅图1，一种快速内毒素检测鲎试剂盒，盒体5内包含一支供试品管 1，内容为高灵敏度鲎试剂，一支供试品阳性对照管2，内容为细菌内毒素工作标准品，一支无热原采样瓶3，三支无热原移液管41、42、43。鲎试剂的灵敏度为0. 125EU/ml, 0. 06EU/ml 或0. 03EU/ml的凝胶法鲎试剂。鲎试剂的装量为0. 2-0. 6ml，最优为0. 5ml。细菌内毒素工作标准品的效价为试剂盒标示灵敏度的二倍。盛放鲎试剂的容器为能直接进行冷冻干燥并可以真空封口鲎试验反应试管，试管的内部直径上下一致，为7-12mm，最优为8_10mm。无热原采样瓶3和无热原移液管的细菌内毒素含量小于0. 005EU/ml。无热原移液管带有刻度，刻度标示有0. 25ml及0. 5ml，如图2所示。无热原移液管为细长型，能伸入反应管底吸取溶液。本实用新型的凝胶法鲎试剂，灵敏度0. 125EU/ml, 0. 06EU/ml或0. 03EU/ml,体积0. 2-0. 6ml，最佳0. 5ml，灌装于能冷冻干燥的鲎试验反应试管中，冷冻干燥后在真空状态下加丁基胶塞封口，加铝盖形成供试品管。细菌内毒素工作标准品，效价为试剂盒标示灵敏度的两倍，灌装于能冷冻干燥的鲎试验反应试管中，冷冻干燥后在真空状态下加丁基胶塞封口，加铝盖形成供试品阳性对照管。无热原移液管，标有0. 5ml和0. 25ml刻度线的一次性塑料移液管，经除热原处理后在无菌条件下包装于无热原塑料袋6中。无热原采样瓶，IOml玻璃瓶，经除热原处理后在无菌条件下封口。本实用新型中鲎试剂为鲎科动物东方鲎的血液变形细胞溶解物的冷冻干燥品， 鲎试剂中含有C因子、B因子、凝固酶原、凝固蛋白原等。在适宜的条件下，细菌内毒素激活 C因子，引起一系列酶促反应，使鲎试剂产生凝集反应形成凝胶。本实用新型的使用方法1.用采样瓶接取2ml供试品；2.用配套的无热原移液管吸取0.5ml供试品于供试品管中，轻轻振摇溶解鲎试剂，注意不要产生气泡；3.用无热原移液管吸取0. 25ml鲎试剂溶液，加入供试品阳性管中，轻轻振摇溶解细菌内毒素工作标准品，注意不要产生气泡；4.把供试品管和供试品阳性管在37° C孵育12-30分钟。结果判断孵育结束后，将供试品管和供试品阳性管从恒温器中轻轻取出，缓慢倒转180°。若试管内容物呈坚实凝胶，不变形，不从管壁滑脱者为阳性，记录为(+ );不呈凝胶或虽生成凝胶但不能保持完整并从管壁滑脱者为阴性，记录为(一)。当供试品阳性管为阳性(+ )时实验有效。若供试品管为阴性，判供试品内毒素含量小于试剂盒标示的灵敏度。 若供试品管为阳性，判供试品内毒素含量大于或等于试剂盒标示的灵敏度。当供试品阳性管为阴性时实验无效，可能由于供试品对本实验有抑制或实验过程操作不当，应重复实验。本实用新型中的供试品，在行业领域内技术人员也称为样品。以上所记载，仅为利用本创作技术内容的实施例，任何熟悉本项技艺者运用本创作所做的修饰、变化，皆属本创作主张的专利范围，而不限于实施例所揭示者。
权利要求1.一种快速内毒素检测鲎试剂盒，其特征在于包括盒体及其内的一支供试品管、一支供试品阳性对照管、一支无热原采样瓶和至少一支无热原移液管，其中供试品管，其为管内容置高灵敏度鲎试剂的供试品反应管；供试品阳性对照管，其为管内容置细菌内毒素工作标准品的对照管。
2.根据权利要求1所述的快速内毒素检测鲎试剂盒，其特征在于所述的供试品管为装有灵敏度为0. 125EU/ml、0. 06EU/ml或0. 03EU/ml鲎试剂的供试品反应管，鲎试剂的装量为 0. 2-0. 6ml。
3.根据权利要求1所述的快速内毒素检测鲎试剂盒，其特征在于所述的供试品管及供试品阳性对照管容器均为能直接进行冷冻干燥并能真空封口的鲎试验反应试管。
4.根据权利要求3所述的快速内毒素检测鲎试剂盒，其特征在于所述的鲎试验反应试管内部直径上下一致，为7-12mm。
5.根据权利要求1所述的快速内毒素检测鲎试剂盒，其特征在于所述的无热原移液管为三支一次性塑料移液管，其上带有刻度，刻度标示有0. 25ml及0. 5ml，上述的无热原移液管为细长型。
专利摘要本实用新型公开一种快速内毒素检测鲎试剂盒，包括一支供试品管，内容为高灵敏度鲎试剂，一支供试品阳性对照管，内容为细菌内毒素工作标准品，一支无热原采样瓶和三支无热原移液管。本实用新型的检测时间在30分钟以内，比传统的内毒素检测鲎试剂的检测时间缩短了30分钟以上。本试剂盒配套有供试品阳性对照管，确保实验的准确性；配套有鲎试验所必须的无热原移液管和采样瓶，使用简单方便。
文档编号G01N33/579GK202119777SQ201120214060
公开日2012年1月18日 申请日期2011年6月23日 优先权日2011年6月23日
发明者不公告发明人 申请人:厦门市鲎试剂实验厂有限公司