专利名称：一种主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法
技术领域：
本发明属于烟草制品测定技术领域，具体是一种主流烟气粒相物味觉成分的分离测定评价方法。
背景技术：
感官代谢组(sensometabolome)是指所有全部的感官活性、低分子量化合物的集合体，反映感官表现型，引发食品特征的嗅觉、味觉和化学感觉。为了寻找引发食品味觉的特征成分，研究人员最近将分离分析技术和感官评价技术相结合提出了感官组学(sensomics)的概念(Angew. Chem. Int. Ed. , 2011, 50, 2220-2242)。感官组学是以感官代谢组为研究对象，在分子水平上研究食品感官质量的多学科交叉技术。目前，应用 感官组学的方法研究最多的是天然产物中引发或调节甜味、鲜味的味觉成分。例如，在紫苏中发现了一种甜味化合物紫苏葶[下面式A所示的化合物(Med. Res. Rev., 1989，9，91-115)]，它的甜味强度比蔗糖高370倍，在水中相对不溶，有苦味和薄荷脑-甘草余味，已经被日本用作烟草制品增甜剂。最近在牛肉汤中发现了一种增强鲜味的化合物，N-(l-羧乙基)-6_轻甲基-3-轻基-I-卩比唳内盐[下面式B所示的化合物(J. Agric. Food Chem.,2011，59，12578; US8007851 2011，Aug 30)]。该化合物本身没有味觉，但能增强蔗糖、L-丙氨酸和阿斯巴甜的甜味。进一步研究发现，该化合物不仅有味觉增强特性，对味觉影响还非常广泛，能增强甜味(葡萄糖和蔗糖)、鲜味(MSG和GMP)和咸味(NaCl )，但并不影响苦味(咖啡因和L-苯丙氨酸)和酸味(柠檬酸)。当食品中含有该化合物时，味觉感官阈值可降低2-32倍[香味化学与工艺学(第二版)，中国科学技术出版社，2012]。对卷烟而言，影响感官质量的两个最重要因素是香气和吃味。目前，国内外对卷烟烟气香气成分进行了大量研究，形成了非常成熟的香气分离评价方法，但卷烟烟气味觉成分的分离评价方法还没有报道，相关的应用研究也没有开展。
权利要求
1.一种主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于该方法具体步骤如下通过剑桥滤片收集烟气粒相物，用乙醇作为溶剂萃取剑桥滤片得到烟气粒相物提取物；称取一定量的烟气粒相物提取物，用超滤膜过滤后，通过柱层色谱分级分离，紫外检测仪检测不同波长下流分的吸光度，用自动流分收集器收集各个流分，分别标记为P1、P2、P3、P4、P5、P6、P7、P8、P9、PlO......等； 将各流分用冻干机冻干，用于味觉测评使用。
2.根据权利要求I所述的主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于所述味觉测评具体方式如下取一份儿冻干流分，用蒸馏水稀释，使测评人员按10分标度法对流分的甜、酸、苦、咸进行标度检验，强度和标度值如下无(_)、微有(1-3)、较强(4-6)、强(7-9);将各流分用蒸馏水按体积比I :1逐步稀释，然后按浓度增加的顺序呈给经过训练的测评人员，每一个稀释浓度用三点测试法评价；当某一稀释浓度与两个空白之间的味觉差异刚好被辨别出来时，称这个稀释倍数为味觉活性值；确定每一流分的味觉活性值。
3.根据权利要求2所述的主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于所述测评人员在进行味觉评价之前，参照ISO 3972:2011、ISO 3972:1991，对测评人员进行味觉敏感度的校准，测评人员数量要求6个以上，最好为12个，环境温度为22-25 °C。
4.根据权利要求I所述的主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于通过剑桥滤片收集烟气粒相物时，是按照IS03308和GB/T 19609-2004规定的方法，在吸烟机上抽吸卷烟捕集烟气粒相物的，环境温度为22±2°C，湿度为60±5%。
5.根据权利要求4所述的主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于所述卷烟可为国内外不同牌号的烤烟型和混合型卷烟。
6.根据权利要求I所述的主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于所述的柱层色谱包括硅胶、凝胶、大孔吸附树脂等柱色谱，其中优先使用凝胶柱色谱；凝胶柱色谱填料可以为 SephadexG-10、Sephadex G_15、Sepharose 6B>Sepharose ConA>SephadexG-25、Sephadex LH-20 等，其中优先使用 SephadexG-10、Sephadex G-15、Sephadex LH-20。
7.根据权利要求I所述的主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征在于所述的紫外检测波长可为220、254、280、340纳米等。
全文摘要
一种主流烟气粒相物味觉成分的分离测定方法，其特征是具体步骤如下:(1)通过剑桥滤片收集烟气粒相物，用乙醇作为溶剂萃取剑桥滤片得到烟气粒相物提取物；(2)称取该提取物，用超滤膜过滤后，通过柱层色谱分级分离，紫外检测仪检测不同波长下流分的吸光度，收集器收集各个流分，分别标记为P1、P2、P3、……等；(3)将各流分用冻干机冻干，用于味觉测评使用。本发明以味觉活性为向导，用柱层色谱对主流烟气粒相物进行分级分离，用自动流分收集器收集不同数量的流分，然后根据相关国际标准，筛选主要的味觉活性代谢物，最后通过溶剂逐步稀释得到每一流分的味觉活性值。本发明流程简单、操作方便、适用范围广。
文档编号G01N21/31GK102692483SQ201210210080
公开日2012年9月26日 申请日期2012年6月25日 优先权日2012年6月25日
发明者万敏, 何保江, 刘俊辉, 周富臣, 孙世豪, 宋瑜冰, 宗永立, 屈展, 张建勋, 李鹏, 杨春强, 毛健 申请人:中国烟草总公司郑州烟草研究院, 江苏中烟工业有限责任公司